專利名稱：一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及一種真菌殺蟲劑培養(yǎng)基，特別是一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
蟲生真菌的重要成員扁座殼孢菌,其有性型為莫勒菌0foe77erie77a)，目前認為該菌隸屬于子囊菌門、糞菌綱、肉座菌目、麥角菌科。扁座殼孢菌及其有性型莫勒菌能引起粉虱和介殼類昆蟲群體性流行病的發(fā)生，這使得它成為有用的生物防治劑。座殼孢菌及其有性型的代謝產(chǎn)物呈現(xiàn)較好的抗菌、殺瘧原蟲活性，并對昆蟲和腫 瘤細胞有較強的毒性，這預示該菌在生物農(nóng)藥或醫(yī)藥上存在很大應用價值。若要對其進行大規(guī)模生產(chǎn)應用，首先要考慮明確其對培養(yǎng)基各營養(yǎng)成分的需求從而對其進行控制。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基組成成分明確、穩(wěn)定，使得發(fā)酵過程和產(chǎn)品質(zhì)量易于控制，菌絲產(chǎn)量高。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基，由葡萄糖、干酪素、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、維生素B6和水組成，其中葡萄糖31. Og 32. 0g，干酪素2. 95g 3. 05g,磷酸氫二鉀0. 95g I. 05g,硫酸鎂0. 6g 0. 7g,維生素B6為0. Ollg
0.012g，用水定容至1L。上述扁座殼孢菌菌絲生長培養(yǎng)基為液體發(fā)酵培養(yǎng)基。上述扁座殼孢菌菌絲生長培養(yǎng)基可按常規(guī)方法配制，滅菌條件為溫度121°C，壓力范圍0. IMPa 0. 15MPa,時間為30min。上述扁座殼孢菌菌絲生長培養(yǎng)基在接種前需將其冷卻至35°C以下。上述扁座殼孢菌菌絲生長培養(yǎng)基在接種時接種量要控制在培養(yǎng)基重量比的10%以內(nèi)。上述扁座殼孢菌菌絲生長培養(yǎng)基中，碳源為葡糖糖，氮源為干酪素，添加微量元素為維生素B6,其最優(yōu)配比為葡萄糖31. 4g，干酪素3g，磷酸氫二鉀lg，硫酸鎂0. 64g，維生素B6S0.0115g，用水定容至IL0本發(fā)明的有益效果是該培養(yǎng)基配方成分明確，解決了天然培養(yǎng)基成分復雜以及成分含量不穩(wěn)定而導致發(fā)酵過程和產(chǎn)品質(zhì)量不易控制的問題，而且菌絲體產(chǎn)量高，菌絲干重可達26. I g/L以上，為等量PDB培養(yǎng)基產(chǎn)量的3. 8倍。該培養(yǎng)基可以進行連續(xù)化、批量化大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)，對于該菌的大規(guī)模應用提供了必要的前提條件。


圖I是本發(fā)明扁座殼孢菌菌絲生長培養(yǎng)基的構(gòu)成示意圖。圖2是通過響應面法優(yōu)化本發(fā)明培養(yǎng)基所得glucose (X1)和vitamin B6 (X2)兩因素對菌絲生長的影響的響應曲面圖。圖3是通過響應面法優(yōu)化本發(fā)明培養(yǎng)基所得glucose (X1)和vitamin B6 (X2)兩因素對菌絲生長的影響的等高線圖。圖4是通過響應面法優(yōu)化本發(fā)明培養(yǎng)基所得glucose (X1)和MgSO4 WH2O(X3)兩因素對菌絲生長的影響的響應曲面圖。圖5是通過響應面法優(yōu)化本發(fā)明培養(yǎng)基所得glucose (X1)和MgSO4 WH2O(X3)兩因素對菌絲生長的影響的等高線圖。圖6是通過響應面法優(yōu)化本發(fā)明培養(yǎng)基所得vitamin B6(X2)和MgSO4 7H20(X3)兩因素對菌絲生長的影響的響應曲面圖。圖7是通過響應面法優(yōu)化本發(fā)明培養(yǎng)基所得vitamin B6(X2)和MgSO4 7H20(X3) 兩因素對菌絲生長的影響的等高線圖。
具體實施例方式本發(fā)明的扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基，由葡萄糖、干酪素、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、維生素B6和水組成，其中葡萄糖31. Og 32. Og,干酪素2. 95g 3. 05g,磷酸氫二鉀
0.95g I. 05g，硫酸鎂0. 6g 0. 7g，維生素B6為0. Ollg 0. 012g，用水定容至IL0上述扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基為液體發(fā)酵培養(yǎng)基。上述扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基可按常規(guī)方法配制，滅菌條件為溫度121°C，壓力范圍 0. IMPa 0. 15MPa，時間為 30min。上述扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基在接種前需將其冷卻至35°C以下。上述扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基在接種時接種量要控制在培養(yǎng)基重量比的10%以內(nèi)。上述扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基中，碳源為葡糖糖，氮源為干酪素，添加微量元素為維生素B6,其最優(yōu)配比為葡萄糖31. 4g，干酪素3g，磷酸氫二鉀lg，硫酸鎂0. 64g，維生素B6S 0.0115g，用水定容至IL0下面結(jié)合具體實施例對利用本發(fā)明的扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基生產(chǎn)該菌菌絲的過程及效果作進一步的說明。實施例I :從自然侵染扁座殼孢菌的粉虱蟲尸上分離純化獲得該菌，并借助形態(tài)特征及分子生物學證據(jù)對其進行鑒定。將其接種至上述培養(yǎng)基和對照PDB培養(yǎng)基中，分別按照常規(guī)方法進行菌絲發(fā)酵生產(chǎn)。結(jié)果表明扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基的菌絲干重達26. I g/L,為對照培養(yǎng)基菌絲干重6. 86g/L的3. 8倍。其中，扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基按最優(yōu)配比進行配制。實施例2 :從自然侵染扁座殼孢菌的粉虱蟲尸上分離純化獲得該菌，并借助形態(tài)特征及分子生物學證據(jù)對其進行鑒定。將其接種至上述培養(yǎng)基和對照PDB培養(yǎng)基中，分別按照常規(guī)方法進行菌絲發(fā)酵生產(chǎn)。結(jié)果表明扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基的菌絲干重達24.12 §/1，為對照培養(yǎng)基菌絲干重6.6^/1的3.65倍。其中，扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基配方為葡萄糖32. Og,干酪素3g，磷酸氫二鉀lg，硫酸鎂0. 7g，維生素B6 0. 012g,用水定容至1L。實施例3 :從自然侵染扁座殼孢菌的粉虱蟲尸上分離純化獲得該菌，并借助形態(tài)特征及分子生物學證據(jù)對其進行鑒定。將其接種至上述培養(yǎng)基和對照PDB培養(yǎng)基中，分別按照常規(guī)方法進行菌絲發(fā)酵生產(chǎn)。結(jié)果表明扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基的菌絲干重達23.7 8/1，為對照培養(yǎng)基菌絲干重6.59§/1的3.6倍。其中，扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基配方為葡萄糖31. Og,干酪素2. 95g,磷酸氫二鉀0. 95g,硫酸鎂0. 6g,維生素B6 0. Ollg,用水定容至1L。以上是本發(fā)明的較 佳實施例，凡依本發(fā)明技術(shù)方案所作的改變，所產(chǎn)生的功能作用未超出本發(fā)明技術(shù)方案的范圍時，均屬于本發(fā)明的保護范圍。
權(quán)利要求
1.一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基，其特征在于由葡萄糖、干酪素、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、維生素B6和水組成，其中葡萄糖31. Og 32. Og,干酪素2. 95g 3. 05g,磷酸氫二鉀0. 95g I. 05g，硫酸鎂0. 6g 0. 7g，維生素B6為0. Ollg 0. 012g，用水定容至IL0
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基，其特征在于所述扁座殼孢菌菌絲生長培養(yǎng)基為液體發(fā)酵培養(yǎng)基。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基，其特征在于所述扁座殼孢菌菌絲生長培養(yǎng)基的滅菌條件為溫度121°C，壓力范圍0. IMPa 0. 15MPa，時間為30mino
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基，其特征在于所述扁座殼孢菌菌絲生長培養(yǎng)基在接種前需將其冷卻至35°C以下。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基，其特征在于所述扁座殼孢菌菌絲生長培養(yǎng)基在接種時接種量要控制在培養(yǎng)基重量比的10%以內(nèi)。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基，其特征在于所述扁座殼孢菌菌絲生長培養(yǎng)基中，碳源為葡糖糖，氮源為干酪素，添加微量元素為維生素B6,其最優(yōu)配比為葡萄糖31. 4g，干酪素3g，磷酸氫二鉀lg，硫酸鎂0. 64g，維生素B6為0. 0115g，用水定容至1L。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種真菌殺蟲劑培養(yǎng)基，特別是一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養(yǎng)基，由葡萄糖、干酪素、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、維生素B6和水組成，其中葡萄糖31.0g～32.0g，干酪素2.95g～3.05g，磷酸氫二鉀0.95g～1.05g，硫酸鎂0.6g～0.7g，維生素B6為0.011g～0.012g，用水定容至1L。該培養(yǎng)基組成成分明確、穩(wěn)定，解決了天然培養(yǎng)基成分復雜以及成分含量不穩(wěn)定而導致發(fā)酵過程和產(chǎn)品質(zhì)量不易控制的問題，而且菌絲體產(chǎn)量較高，菌絲干重可達26.1g/L以上，為等量PDB培養(yǎng)基產(chǎn)量的3.8倍。該培養(yǎng)基可以進行連續(xù)化、批量化大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)，對于該菌的大規(guī)模應用提供了必要的前提條件。
文檔編號C12R1/645GK102746997SQ201210268659
公開日2012年10月24日 申請日期2012年7月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月31日
發(fā)明者關雄, 宋飛飛, 李小霞, 謝小聰, 邱云鋒, 邱君志 申請人:福建農(nóng)林大學