本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是一種基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒的制備方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、糖尿病是常見慢性疾病，包括1型糖尿?。╰1dm）和2型糖尿?。╰2dm），是由自身免疫引發(fā)的慢性疾病。其中，在糖尿病發(fā)病初期，機體免疫系統(tǒng)錯誤地將胰島β細(xì)胞識別為外來病原體，從而激活t淋巴細(xì)胞、b淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞，釋放多種炎癥因子，如白細(xì)胞介素-1β（il-1β）和干擾素-γ（ifn-γ）等。這些炎癥因子通過上調(diào)胰島β細(xì)胞的轉(zhuǎn)鐵蛋白受體表達(dá)，增加鐵的攝取，同時抑制谷胱甘肽過氧化物酶4（gpx4）等抗氧化酶的活性，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)活性氧（ros）水平升高，從而引發(fā)脂質(zhì)過氧化和鐵死亡。這些機制最終導(dǎo)致胰島β細(xì)胞數(shù)量減少和胰島素分泌功能受損，引發(fā)血糖持續(xù)升高，并加速糖尿病的發(fā)生與進展。鑒于鐵死亡在胰島β細(xì)胞損傷中的重要作用，調(diào)控鐵死亡信號通路有望成為糖尿病治療的有效技術(shù)途徑。

2、近年來，多酚類化合物如姜黃素、槲皮素、兒茶素、蘆丁等，因其調(diào)節(jié)鐵代謝、抗氧化和抑制脂質(zhì)過氧化等多重機制，顯示出抑制鐵死亡、修復(fù)胰島β細(xì)胞功能的潛力。然而，這類藥物在實際應(yīng)用中受到口服生物利用度低和靶向效率差的限制，難以在胰腺炎癥部位實現(xiàn)有效蓄積，導(dǎo)致療效受限，因此，提高藥物的口服吸收效率和胰腺靶向遞送能力對于治療糖尿病至關(guān)重要。針對這些問題，研究實驗發(fā)現(xiàn)，單不飽和脂肪酸通過調(diào)控納米粒的軟硬度，可顯著提高其在腸道中的吸收效率。柔性結(jié)構(gòu)使納米粒能夠更緊密地結(jié)合腸道黏液層，延長其在腸道中的滯留時間，并通過變形性促進其穿過腸道屏障（如腸道微褶皺細(xì)胞，m細(xì)胞），從而提升藥物的口服生物利用度。此外，為了進一步提高藥物在胰腺炎癥部位的蓄積效率，靶向配體修飾的納米粒通過特異性靶向m細(xì)胞和派爾斑中巨噬細(xì)胞的整合素受體，借助巨噬細(xì)胞的炎癥趨化特性，將藥物精準(zhǔn)遞送至胰腺炎癥部位。遞送至胰腺后，納米粒通過調(diào)控鐵死亡關(guān)鍵通路，減少胰島β細(xì)胞損傷，保護胰島功能。

3、因此，基于軟硬度調(diào)控與靶向配體修飾的雙重優(yōu)化，構(gòu)建一種負(fù)載多酚類藥物的納米粒，用于抑制胰島β細(xì)胞鐵死亡并減少其損傷，為糖尿病治療提供新型、高效的解決方案，展現(xiàn)出重要的應(yīng)用價值，但至今未見有公開報道。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒的制備方法及其應(yīng)用，可有效解決多酚類藥物生物利用度低、靶向性差，極大的提高藥物生物利用度以及胰腺炎癥靶向能力的問題。

2、本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，一種基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒的制備方法，該脂質(zhì)納米粒由模型藥、單不飽和脂肪酸、不同peg分子量的磷脂聚乙二醇偶聯(lián)物復(fù)合制成，方法是：

3、將模型藥、單不飽和脂肪酸與不同peg分子量的磷脂聚乙二醇偶聯(lián)物混合，其中模型藥與單不飽和脂肪酸質(zhì)量比為1:?5-15，單不飽和脂肪酸與不同peg分子量的磷脂聚乙二醇偶聯(lián)物的質(zhì)量比為3.5?-4.5?:?1，然后溶解于3-5?ml乙醇中，在頻率60-120hz超聲混和均勻，然后于25-60?℃下，在攪拌下，將混合溶液緩慢滴入5-15?ml去離子水中，以500-1200r/min的速度攪拌0.5-2?h；再在25-60?℃下旋蒸15-40?min，除去乙醇，并以1500-3000r/min離心5-20?min，去除沉淀，即得載有模型藥的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒；

4、所述的單不飽和脂肪酸為油酸（oa）、芥酸（ea）、棕櫚油酸（pa）、神經(jīng)酸（na）、十六烯酸或二十碳烯酸的一種；

5、所述的不同peg分子量的磷脂聚乙二醇偶聯(lián)物為dspe-peg2000-rgd、dspe-peg3000-rgd、dspe-peg3400-rgd、dspe-peg4000-rgd、dspe-peg5000-rgd、dspe-peg2000-甘露糖(man)、dspe-peg3000-man、dspe-peg3400-man、dspe-peg4000-man、dspe-peg5000-man、dspe-peg2000-irgd、dspe-peg3000-irgd、dspe-peg3400-irgd、dspe-peg4000-irgd、dspe-peg5000-irgd、dspe-peg2000-葉酸(fa)、dspe-peg3000-fa、dspe-peg3400-fa、dspe-peg4000-fa、dspe-peg5000-fa、dspe-peg2000-透明質(zhì)酸(ha)、dspe-peg3000-ha、dspe-peg3400-ha、dspe-peg4000-ha、dspe-peg5000-ha、dspe-peg2000、dspe-peg3000、dspe-peg3400、dspe-peg4000或dspe-peg5000中的一種；

6、所述的模型藥為姜黃素（cur）、槲皮素（que）、白藜蘆醇、兒茶素、蘆丁、黃芩素、陳皮素、綠原酸、沒食子酸、原花青素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、花青素、木犀草素或蘆丁糖的多酚類化合物中的一種。

7、本發(fā)明所述方法制備的基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用，所述的糖尿病為1型糖尿病和2型糖尿病。

8、本發(fā)明所述方法制備的基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒在制備治療胰腺炎性疾病藥物中的應(yīng)用。

9、本發(fā)明所述方法制備的基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒在口服藥物遞送中的應(yīng)用。

10、本發(fā)明原料豐富，制備方法簡單，易生產(chǎn)，產(chǎn)品質(zhì)量好，性質(zhì)穩(wěn)定，所制得的脂質(zhì)納米?？诜枚雀摺邢蛐始?，能通過將多酚類藥物有效遞送至胰腺炎癥部位，極大提高藥物生物利用度以及胰腺炎癥靶向能力，抑制胰島β細(xì)胞的鐵死亡來發(fā)揮治療糖尿病的作用，是治療糖尿病和胰腺炎藥物上的一大創(chuàng)新，有著巨大的社會和經(jīng)濟效益。

技術(shù)特征：

1.一種基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒的制備方法，該脂質(zhì)納米粒由模型藥、單不飽和脂肪酸、不同peg分子量的磷脂聚乙二醇偶聯(lián)物復(fù)合制成，方法是：

2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒的制備方法，其特征在于，制備方法是：將cur、oa與dspe-peg2000-rgd混合，其中cur與oa質(zhì)量比為1:10，oa與dspe-peg2000-rgd的質(zhì)量比為4?:?1，然后將其溶解于4.5?ml乙醇中，在頻率90hz超聲混和均勻，然后于45?℃下，在攪拌下，將混合溶液緩慢滴入10ml去離子水中，以800r/min的速度攪拌1h；最后，再在45?℃下旋蒸30?min，除去乙醇，并以2200r/min離心10?min，去除沉淀，即得載有cur的納米粒。

3.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒的制備方法，其特征在于，制備方法是：將que、ea與dspe-peg3000-?man混合，其中que與ea質(zhì)量比為1:?5，ea與dspe-peg3000-?man的質(zhì)量比為3.5?:?1，然后將其溶解于4?ml乙醇中，在頻率60hz超聲混和均勻，然后于25?℃下，在攪拌下，將混合溶液緩慢滴入5ml去離子水中，以500r/min的速度攪拌0.5h；最后，再在40?℃下旋蒸15?min，除去除去乙醇，并以1500r/min離心5min，去除沉淀，即得載有que的納米粒。

4.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒的制備方法，其特征在于，制備方法是：將兒茶素、pa與不同peg分子量的磷脂聚乙二醇偶聯(lián)物混合，其中兒茶素與pa質(zhì)量比為1:?15，pa與dspe-peg3400-irgd的質(zhì)量比為4.5?:?1，然后將其溶解于5?ml乙醇中，頻率120hz超聲混和均勻，然后于60?℃下，在攪拌下，將混合溶液緩慢滴入15?ml去離子水中，以1200?r/min的速度攪拌2?h；再在60?℃下旋蒸40?min，除去乙醇，并以3000r/min離心20?min，去除沉淀，即得載有兒茶素的納米粒。

5.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒的制備方法，其特征在于，制備方法是：將白藜蘆醇、na與dspe-peg4000-fa混合，其中白藜蘆醇與na比為1:?7，na與dspe-peg4000-fa的質(zhì)量比為4.2?:?1，然后將其溶解于3.5?ml乙醇中，在頻率105hz超聲混和均勻，然后于35?℃下，在攪拌下，將混合溶液緩慢滴入12?ml去離子水中，以700?r/min的速度攪拌1.5?h；再在35?℃下旋蒸30?min，除去乙醇，并以2400r/min離心16?min，去除沉淀，即得載有白藜蘆醇的納米粒。

6.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒的制備方法，其特征在于，制備方法是：將蘆丁、十六烯酸與dspe-peg5000-ha混合，其中蘆丁與十六烯酸比為1:12，十六烯酸與dspe-peg5000-ha的質(zhì)量比為3.7?:?1，然后將其溶解于4.5?ml乙醇中，在頻率75hz超聲混和均勻，然后于50?℃下，在攪拌下，將混合溶液緩慢滴入7.5?ml去離子水中，以900?r/min的速度攪拌0.8?h；再在50?℃下旋蒸20?min，除去乙醇，并以1800r/min離心8min，去除沉淀，即得載有蘆丁的納米粒。

7.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒的制備方法，其特征在于，制備方法是：將黃芩素、二十碳烯酸與dspe-peg2000混合，其中黃芩素與二十碳烯酸質(zhì)量比為1:?6，二十碳烯酸與dspe-peg2000的質(zhì)量比為4.3:?1，然后將其溶解于3.8?ml乙醇中，在頻率85hz超聲混和均勻，然后于35?℃下，在攪拌下，將混合溶液緩慢滴入13?ml去離子水中，以650?r/min的速度攪拌1.7h；再在35?℃下旋蒸19min，除去乙醇，并以2750r/min離心9?min，去除沉淀，即得載有黃芩素的納米粒。

8.權(quán)利要求1-6任一項制備方法制備的基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用，所述的糖尿病為1型糖尿病和2型糖尿病。

9.權(quán)利要求1-6任一項制備方法制備的基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒在制備治療胰腺炎性疾病藥物中的應(yīng)用。

10.權(quán)利要求1-6任一項制備方法制備的基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒在口服藥物遞送中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
一種基于不飽和脂肪酸的鐵死亡調(diào)節(jié)納米粒的制備方法，該脂質(zhì)納米粒由模型藥、單不飽和脂肪酸、不同PEG分子量的磷脂聚乙二醇偶聯(lián)物復(fù)合制成，方法是：將模型藥、單不飽和脂肪酸與不同PEG分子量的磷脂聚乙二醇偶聯(lián)物混合，然后溶解于乙醇中，超聲混勻，滴入去離子水中，攪拌、旋蒸，除去甲醇和乙醇，離心，除上清液，干燥，即得；原料豐富，制備方法簡單，易生產(chǎn)，產(chǎn)品質(zhì)量好，性質(zhì)穩(wěn)定，能通過將多酚類藥物有效遞送至胰腺炎癥部位，極大提高藥物生物利用度以及胰腺炎癥靶向能力，抑制胰島β細(xì)胞的鐵死亡來發(fā)揮治療糖尿病的作用，是治療糖尿病和胰腺炎藥物上的一大創(chuàng)新，社會和經(jīng)濟效益巨大。

技術(shù)研發(fā)人員：侯琳,張振中,鄧思穎,佘文研,胡路遠(yuǎn),張慧娟,苗瑞琳,暢瑞欣,鄭琳玥
受保護的技術(shù)使用者：鄭州大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/8