本發(fā)明涉及一種sod脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用，屬于及生物技術(shù)或者化妝品。

背景技術(shù)：

1、超氧化物歧化酶superoxide?dismutase簡稱sod，是迄今發(fā)現(xiàn)的最重要消除皮損及衰老病因“超氧離子自由基(o2-)”的抗氧化酶，是體內(nèi)唯一與自由基為抵物的清除劑，又是人體黑色素合成中起重要作用的酪氨酸酶酶抑制劑。經(jīng)過醫(yī)學(xué)界長期的基本理論研究，確認sod的補充對人體抗衰老有極大益處。然而，由于sod是分子量較大的生物制劑，在制劑中的配伍和應(yīng)用，在皮膚中的的滲透，是化妝品工業(yè)備受關(guān)注及最熱門的課題。

2、在經(jīng)皮遞送中，脂質(zhì)體作為一種備受關(guān)注的納米制劑，不僅可以增強包裹物與皮膚的相容性，促進透皮，而且可以提高包裹物的穩(wěn)定性，增強與其他基質(zhì)成分及活性成分的兼容。前期已有一些sod脂質(zhì)體的報道和應(yīng)用。如rengel,eur?j?pharmacol,2002,15:441-448文章報道的sod脂質(zhì)體包封率最高為35％，而對于帶電脂質(zhì)體，在人體吸收的過程中可能會造成一定的損傷，并不能應(yīng)用在食品中。

3、目前報道的sod脂質(zhì)體的制備方法基本為薄膜分散法，薄膜分散法是脂質(zhì)體制備最常規(guī)的技術(shù)之一，其制備過程主要分為兩大步驟：先干燥溶解在有機溶劑中的脂質(zhì)，以形成一層脂質(zhì)薄膜，并將脂質(zhì)薄膜分散于水溶液中自組裝形成雙層結(jié)構(gòu)。而其他常規(guī)制備方法(例如逆向蒸發(fā)法、注射/蒸發(fā)法以及脫水-再水化法等)與薄膜分散法相比，也有一定的相似之處，大致分為四個步驟：將脂質(zhì)溶解在有機溶劑中、蒸發(fā)旋干有機溶劑、脂質(zhì)分散在水介質(zhì)中、自組裝形成脂質(zhì)體。通常，利用上述提及的傳統(tǒng)方法所制備出的脂質(zhì)體會具有一個或幾個磷脂雙分子層。但在后處理的過程中，往往會用到超聲處理等步驟，不容易放大，且對于sod此類的大分子蛋白，目前報道的最多的方法為薄膜分散法，如中國專利cn113827491a，但此法包封率低最高僅能達到70％左右，且不穩(wěn)定，因此需要找到一種更經(jīng)濟更高效的sod脂質(zhì)體制備方法。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、[技術(shù)問題]

2、現(xiàn)有技術(shù)中sod脂質(zhì)體的制備多采用薄膜分散法，該傳統(tǒng)方法制備的sod脂質(zhì)體存在包封率低、并且穩(wěn)定性差，生物利用率差等問題，不利于sod的深加工廣泛應(yīng)用。

3、[技術(shù)方案]

4、為了解決現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，本發(fā)明的目的是提供一種sod脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用，該sod脂質(zhì)體比傳統(tǒng)方法薄膜分散法得到的脂質(zhì)體包封率高，更穩(wěn)定，且透皮吸收效果和生物利用率更高，抗衰效果更明顯。

5、為了實現(xiàn)上述目的，提供的技術(shù)方案如下：

6、本發(fā)明提供了一種sod脂質(zhì)體的制備方法，所述方法包括如下步驟：

7、(1)將卵磷脂和膽甾醇用無水乙醇充分溶解，然后吹干無水乙醇得到脂質(zhì)體前體；

8、(2)將預(yù)熱的無水乙醇和sod溶液加入步驟(1)獲得的脂質(zhì)體前體中，水浴保溫，然后冷卻至室溫即可。

9、在一種實施方式中，步驟(1)所述卵磷脂包括卵磷脂pc?80、卵磷脂pc?60、卵磷脂pc?20、氫化卵磷脂、蛋黃卵磷脂中的一種或多種。

10、在一種實施方式中，步驟(1)所述卵磷脂和膽甾醇的質(zhì)量比為700:100～500；優(yōu)選為700:300～500；進一步優(yōu)選為700:300～400。

11、在一種實施方式中，步驟(1)所述無水乙醇的用量標準為只要能夠?qū)⒙蚜字湍戠薮纪耆芙饧纯桑粺o水乙醇的用量優(yōu)選為700:(100～500)：5～15ml；mg:mg:ml；進一步優(yōu)選為：700:(100～500)：10；mg:mg:ml。

12、在一種實施方式中，步驟(1)所述脂質(zhì)體前體制備過程中，還包括表面活性劑。

13、在一種實施方式中，所述表面活性劑包括吐溫20，吐溫60，吐溫80，peg，甘油，棕櫚酸中的一種或多種；優(yōu)選為吐溫20，吐溫60，吐溫80；進一步優(yōu)選為吐溫80。

14、在一種實施方式中，所述卵磷脂、膽甾醇和表面活性劑的質(zhì)量比為700:100～500：100。

15、在一種實施方式中，步驟(2)所述預(yù)熱的無水乙醇指的是預(yù)熱50～60℃的無水乙醇；優(yōu)選為60℃。

16、在一種實施方式中，步驟(2)所述sod溶液為pbs配制的sod溶液、1/10pbs配制的sod溶液、tris-hcl配制的sod溶液中的任一種；優(yōu)選為1/10pbs配制的sod溶液。

17、在一種實施方式中，所述pbs的ph值為7.4。

18、在一種實施方式中，所述sod脂質(zhì)體中sod的終濃度為3000iu/ml～30000iu/ml；優(yōu)選為3000iu/ml～20000iu/ml。

19、在一種實施方式中，步驟(2)所述脂質(zhì)體前體，無水乙醇和sod溶液的質(zhì)量比為100：(50～100)：(100～200)；優(yōu)選為100：(50～80)：(100～200)；進一步優(yōu)選為100：80：200。

20、在一種實施方式中，步驟(2)所述水浴保溫的溫度為40～60℃，時間為5～20min。

21、本發(fā)明還提供了上述所述的制備方法獲得的sod脂質(zhì)體。

22、本發(fā)明還提供了上述所述的sod脂質(zhì)體在乳液、精華、面霜等護膚品中的應(yīng)用。

23、本發(fā)明還提供了一種上述所述的sod脂質(zhì)體的凍干粉，所述凍干粉是將sod脂質(zhì)體與凍干保護劑混合一起凍干而成。

24、在一種實施方式中，所述凍干保護劑為葡萄糖，蔗糖和pvp?k60中的一種或多種；優(yōu)選為pvp?k60和蔗糖；進一步優(yōu)選為pvp?k60。

25、在一種實施方式中，所述凍干保護劑的質(zhì)量分數(shù)為5～10％；優(yōu)選為5％。

26、有益效果：

27、本發(fā)明制備的sod脂質(zhì)體比傳統(tǒng)方法薄膜分散法得到的脂質(zhì)體包封率高，是目前報道的最高包封率：

28、(1)本發(fā)明中通過加入表面活性劑使sod的包封率提高到92％，粒徑為170.2nm，更穩(wěn)定；

29、(2)本發(fā)明中sod脂質(zhì)體的透皮吸收效果比sod水溶液高120％；

30、(3)本發(fā)明中sod脂質(zhì)體的生物利用率比sod水溶液高；sod組在糞便中4h達到峰值，而sod-lipo組保持低水平持續(xù)排出的情況，表明sod-lipo排出更少，小腸的吸收能力更強，生物利用度更高；

31、(4)本發(fā)明中sod脂質(zhì)體的抗衰效果比sod水溶液更顯著；sod-lip組的表皮厚度和真皮厚度均顯著高于空白組，且皮膚的完整性和毛囊的數(shù)量明顯改善?？诜od脂質(zhì)體可以顯著增加衰老小鼠皮膚的膠原蛋白含量，使膠原呈現(xiàn)出規(guī)律且致密排布的狀態(tài)。

技術(shù)特征：

1.一種sod脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述卵磷脂和膽甾醇的質(zhì)量比為700:100～500。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述脂質(zhì)體前體制備過程中，還包括表面活性劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述表面活性劑包括吐溫20，吐溫60，吐溫80，peg，甘油，棕櫚酸中的一種或多種。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述sod溶液為pbs配制的sod溶液、1/10pbs配制的sod溶液、tris-hcl配制的sod溶液中的任一種。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述sod脂質(zhì)體中sod的終濃度為3000iu/ml～30000iu/ml。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述脂質(zhì)體前體，無水乙醇和sod溶液的質(zhì)量比為100：(50～100)：(100～200)。

8.由權(quán)利要求1～7任一所述的制備方法獲得的sod脂質(zhì)體。

9.權(quán)利要求8所述的sod脂質(zhì)體在制備乳液、精華、面霜護膚品中的應(yīng)用。

10.一種sod脂質(zhì)體的凍干粉，其特征在于，所述凍干粉是將權(quán)利要求8所述的sod脂質(zhì)體與凍干保護劑混合一起凍干而成。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種SOD脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用，屬于及生物技術(shù)或者化妝品技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明SOD脂質(zhì)體的制備包括：將卵磷脂和膽甾醇用無水乙醇充分溶解，然后吹干無水乙醇得到脂質(zhì)體前體；將預(yù)熱的無水乙醇和SOD溶液加入脂質(zhì)體前體中，水浴保溫，然后冷卻至室溫即可。該方法獲得SOD脂質(zhì)體比傳統(tǒng)方法薄膜分散法得到的脂質(zhì)體包封率高，更穩(wěn)定，且透皮吸收效果和生物利用率更高，抗衰效果更明顯。

技術(shù)研發(fā)人員：張巖峰,顧麗紅,陳永麗,張艷艷,彭冰冰,鄒智蓉,張凱敏
受保護的技術(shù)使用者：深圳中科欣揚生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/8