本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥，特別涉及一種靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、心肌梗死(mi)后的心源性死亡往往是導(dǎo)致生命危險(xiǎn)事件的主要原因，這些事件主要由惡性室性心律失常(vas)所驅(qū)動(dòng)。心交感神經(jīng)的過度激活與心肌梗死緊密相關(guān)，這不僅增加了惡性室性心律失常的發(fā)生率，還促進(jìn)了不良的心室重構(gòu)，從而形成了一個(gè)惡性循環(huán)。研究顯示，交感神經(jīng)節(jié)(sg)的干預(yù)能夠改善心肌梗死引起的功能障礙。然而，傳統(tǒng)的臨床切除方法，如心臟交感神經(jīng)去支配和星狀神經(jīng)節(jié)阻滯，可能會(huì)引發(fā)霍納綜合征和其他嚴(yán)重反應(yīng)。盡管利用金納米棒和光遺傳系統(tǒng)等方法已經(jīng)證實(shí)了控制交感神經(jīng)活動(dòng)過度激活從而保護(hù)心臟的潛力，但它們在臨床應(yīng)用上仍面臨金屬材料生物相容性不理想、易引起的生物毒性等問題。而通過shrna來減少cav2.2電流和交感神經(jīng)活動(dòng)的興奮性以減少惡性室性心律失常的方法則存在基因轉(zhuǎn)染效率低和長期治療效果不確定等問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供一種靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物及其制備方法和應(yīng)用，以解決相關(guān)技術(shù)中抑制交感神經(jīng)活動(dòng)過度激活的材料生物相容性低、毒性高、轉(zhuǎn)染效率低、長期治療效果不確定等問題。

2、本發(fā)明提供的技術(shù)方案具體如下：

3、第一方面，本發(fā)明提供一種靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物(以下簡稱sdnf)，藥物以dna納米花為載體，dna納米花表面連接核酸適配體，內(nèi)部包裹并連接cbd3肽；其中，所述核酸適配體與交感神經(jīng)細(xì)胞表面的受體相適配，cbd3肽通過酸敏感連接單元連接dna納米花上的核苷酸。

4、結(jié)合本發(fā)明的第一方面，一些實(shí)施例中，受體為l1細(xì)胞粘附分子，核酸適配體具有如seq?id?no.1所示的核苷酸序列。

5、結(jié)合本發(fā)明的第一方面，一些實(shí)施例中，藥物的粒徑為300～400nm。

6、結(jié)合本發(fā)明的第一方面，一些實(shí)施例中，酸敏感連接單元為亞胺鍵(c＝n)。

7、第二方面，本發(fā)明提供一種制備靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物的方法，包括：

8、利用酸敏感連接單元將cbd3肽與單鏈的dna1連接起來，得到cbd3-dna1；

9、提供環(huán)狀dna模板；其中，dna1與環(huán)狀dna模板的部分序列互補(bǔ)；

10、將環(huán)狀dna模板、dntps、cbd3-dna1、phi29聚合酶在反應(yīng)緩沖液中混合，進(jìn)行滾環(huán)擴(kuò)增反應(yīng)，純化，得到權(quán)利要求1所述的靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物。

11、結(jié)合本發(fā)明的第二方面，一些實(shí)施例中，利用酸敏感連接單元將cbd3肽與單鏈的dna1連接起來包括：

12、將n-末端辛酸-精氨酸重復(fù)序列-cbd3與cho-dna1在室溫下混合，反應(yīng)之后得到cbd3-dna1。

13、結(jié)合本發(fā)明的第二方面，一些實(shí)施例中，提供環(huán)狀dna模板包括：使引物p1和p2分別與t1和t2雜交，加入t4?dna連接酶孵育，得到環(huán)狀dna模板；其中，p1具有如seq?id?no.4所示的核苷酸序列，p2具有如seq?id?no.5所示的核苷酸序列，t1具有如seq?id?no.2所示的核苷酸序列，t2具有如seq?id?no.3所示的核苷酸序列。

14、第三方面，本發(fā)明提供靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物在制備用于防治室性心律失常相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用。

15、第四方面，本發(fā)明提供靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物在制備用于防治心肌梗死相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用。

16、結(jié)合本發(fā)明的第三和第四方面，一些實(shí)施例中，藥物的劑型為膠囊劑、片劑、口服劑、微囊制劑、注射劑中的一種或多種。

17、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：

18、本發(fā)明提供的靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物在急性心梗大鼠模型中可顯著抑制心肌梗死后交感神經(jīng)過度激活，減輕神經(jīng)炎癥和神經(jīng)性疼痛，并表現(xiàn)出明顯的室性心律失常活動(dòng)減少；在慢性心梗模型中，該藥物能改善大鼠的心臟功能，縮小心梗面積，并減少心梗引起的周圍神經(jīng)重塑，同時(shí)增強(qiáng)電生理穩(wěn)定性。以上結(jié)果表明，本發(fā)明提供的藥物對心肌梗死后室性心律失常和心室重塑具有防治作用。

技術(shù)特征：

1.一種靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物，其特征在于：所述藥物以dna納米花為載體，dna納米花表面連接核酸適配體，內(nèi)部包裹并連接cbd3肽；其中，所述核酸適配體與交感神經(jīng)細(xì)胞表面的受體相適配，cbd3肽通過酸敏感連接單元連接dna納米花上的核苷酸。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物，其特征在于：所述受體為l1細(xì)胞粘附分子，所述核酸適配體具有如seq?id?no.1所示的核苷酸序列。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物，其特征在于：所述藥物的粒徑為300～400nm。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物，其特征在于：所述酸敏感連接單元為亞胺鍵。

5.一種制備權(quán)利要求1所述的靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物的方法，其特征在于，包括：

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物的方法，其特征在于：所述利用酸敏感連接單元將cbd3肽與單鏈的dna1連接起來包括：

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物的方法，其特征在于：提供環(huán)狀dna模板包括：使引物p1和p2分別與t1和t2雜交，加入t4?dna連接酶孵育，得到環(huán)狀dna模板；其中，p1具有如seq?id?no.4所示的核苷酸序列，p2具有如seq?id?no.5所示的核苷酸序列，t1具有如seq?id?no.2所示的核苷酸序列，t2具有如seq?id?no.3所示的核苷酸序列。

8.權(quán)利要求1所述的靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物在制備用于防治室性心律失常相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用。

9.權(quán)利要求1所述的靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物在制備用于防治心肌梗死相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用。

10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的應(yīng)用，其特征在于：所述藥物的劑型為膠囊劑、片劑、口服劑、微囊制劑、注射劑中的一種或多種。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種靶向進(jìn)入交感神經(jīng)細(xì)胞的藥物及其制備方法和應(yīng)用，藥物以DNA納米花為載體，DNA納米花表面連接核酸適配體，內(nèi)部包裹并連接CBD3肽；其中，核酸適配體與交感神經(jīng)細(xì)胞表面的受體相適配，CBD3肽通過酸敏感連接單元連接DNA納米花上的核苷酸。該藥物在急性心梗大鼠模型中可顯著抑制心肌梗死后交感神經(jīng)過度激活，減輕神經(jīng)炎癥和神經(jīng)性疼痛，并表現(xiàn)出明顯的室性心律失?；顒?dòng)減少；在慢性心梗模型中，該藥物能改善大鼠的心臟功能，縮小心梗面積，并減少心梗引起的周圍神經(jīng)重塑，同時(shí)增強(qiáng)電生理穩(wěn)定性。

技術(shù)研發(fā)人員：江洪,余鋰鐳,周曉亞,吳駿,周麗平,王悅怡,喬家明,王家樂
受保護(hù)的技術(shù)使用者：武漢大學(xué)人民醫(yī)院（湖北省人民醫(yī)院）
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/8