本發(fā)明涉及生物，具體涉及一種富硒屎腸球菌菌劑在制備治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用。

背景技術：

1、炎癥性腸病(inflammatory?bowel?disease，ibd)是一種慢性腸道炎癥性疾病，患者常會出現(xiàn)腹瀉、便血等消化道癥狀以及體重下降、發(fā)熱乏力等全身癥狀。近年來，ibd發(fā)病率顯著增加。潰瘍性結腸炎(ulcerative?colitis，uc)是一種典型的炎癥性腸病，其病變范圍較廣，其特征是結腸黏膜的持續(xù)炎癥和潰瘍形成。常用的抗uc藥物包括氨基水楊酸衍生物、糖皮質激素、免疫抑制劑和生物制劑等，然而治療uc的藥物需要長期服用，因此往往產生副作用以及耐藥性等諸多問題?？紤]到長期服用的安全性及經濟性等挑戰(zhàn)，需要開發(fā)新的治療策略用于預防和治療uc。

2、腸道菌群紊亂是uc的一個重要表現(xiàn)，與健康人相比，uc患者的腸道菌群多樣性減少，促炎細菌如腸桿菌科和梭桿菌科以及其產生的代謝產物會進一步加劇腸道炎癥。因此，通過服用活體益生菌來調節(jié)腸道菌群逐漸引起研究人員的注意。益生菌能夠通過調節(jié)腸道菌群、增強腸道屏障功能、調節(jié)免疫等多種機制來緩解腸炎癥狀。雙歧桿菌、乳酸菌、酪酸梭菌和乳桿菌等益生菌都具有調節(jié)腸道菌群，增強腸道屏障功能的能力。屎腸球菌和鼠李糖乳桿菌屬于乳酸菌，其中，屎腸球菌抑制致病菌、促進腸道修復、增強免疫力和抑制炎癥等多方面的能力使其對uc具有潛在益處。鼠李糖乳桿菌同樣具有調節(jié)腸道菌群、增強腸道屏障功能、調節(jié)免疫及炎癥信號通路的能力，有望被開發(fā)為治療uc的藥物或載體。

3、炎癥會引起組織細胞氧化損傷，是uc發(fā)病過程中一個重要的病理生理過程。腸道炎癥環(huán)境下活性氧(ros)含量增加，過量的ros會導致腸道氧化應激，破壞細胞內環(huán)境的穩(wěn)態(tài)，從而引起細胞損傷和死亡。因此，抗氧化藥物治療能夠減少腸道上皮細胞氧化損傷，保護腸道的屏障功能。硒是人體中一種重要的微量元素，具有抗氧化能力，不僅可以中和自由基，清除ros，還可以組成多種抗氧化酶，以硒蛋白的形式發(fā)揮抗氧化作用。

4、利用益生菌屎腸球菌和鼠李糖乳桿菌作為硒的載體，通過富硒發(fā)酵工藝，將無機硒轉化為容易被機體吸收的有機硒，不但可以提高硒的生物利用度，減少腸道氧化損傷，還能夠結合益生菌本身的益生功能，有效增強腸道屏障功能，緩解炎癥性腸病，減少不良反應。有望開發(fā)作為一種安全有效的預防或治療炎癥性腸病的益生菌治療策略。

技術實現(xiàn)思路

1、為了解決現(xiàn)有技術的問題，本發(fā)明的目的是提供一種富硒屎腸球菌菌劑在制備預防和/或治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用。

2、為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案：

3、第一方面，本申請?zhí)峁┮环N富硒屎腸球菌菌劑在制備預防和/或治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用。

4、第二方面，本申請?zhí)峁┮环N改善腸道環(huán)境用于預防和/或治療潰瘍性結腸炎的益生菌制劑。

5、第三方面，本申請?zhí)峁┮环N富硒屎腸球菌菌劑在制備與常規(guī)免疫抑制劑、小分子藥物、中藥、生物制劑聯(lián)合預防和/或治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用。

6、本申請第一方面提供一種富硒屎腸球菌菌劑在制備治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用。結腸炎為dss誘導的潰瘍性結腸炎。

7、本申請第二方面提供一種富硒屎腸球菌菌劑在制備預防潰瘍性結腸炎藥物中的應用。

8、進一步地，富硒屎腸球菌菌劑由屎腸球菌經過富硒發(fā)酵制得，所述的硒含量為5-100μg/g。屎腸球菌在固體培養(yǎng)基復蘇后，挑取單菌落至200ml液體培養(yǎng)基，40℃恒溫活化培養(yǎng)24h。將活化后的屎腸球菌種子液按照1:50的濃度接種到1l培養(yǎng)基中，加入除菌過濾的納米硒溶液至終濃度為2-20mg/l，在40℃下進行24h靜置培養(yǎng)，通過8000g離心10min，收集發(fā)酵菌。

9、進一步地，富硒屎腸球菌含量不低于1×108cfu/g。富硒屎腸球菌對于腸炎的治療效果顯著優(yōu)于非治療組。

10、進一步地，富硒屎腸球菌的發(fā)酵培養(yǎng)基包含如下組分：維生素c，4g/l；nacl，2.4g/l；na2hpo4，5.8g/l；kh2po4，0.528571g/l；葡萄糖，5g/l；酵母抽提物，3g/l；牛肉浸粉，1.7g/l；大豆蛋白胨，2g/l；牛肉蛋白胨，20g/l；納米硒溶液，2-20mg/l。

11、本申請第三方面提供一種改善腸道環(huán)境用于預防和/或治療潰瘍性結腸炎的益生菌制劑，其特征在于：所述益生菌制劑包括富硒屎腸球菌。

12、進一步地，益生菌制劑包括屎腸球菌發(fā)酵培養(yǎng)物、發(fā)酵上清、發(fā)酵液沉淀、超聲裂解上清、超聲裂解沉淀中的一種或多種的組合。

13、進一步地，益生菌制劑包括凍干粉、片劑、膠囊劑或顆粒劑中的任意一種。

14、本申請第四方面提供一種富硒屎腸球菌菌劑在制備與常規(guī)免疫抑制劑、小分子藥物、中藥、生物制劑聯(lián)合預防和/或治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用。

15、有益效果：本發(fā)明將納米硒和屎腸球菌相結合，將屎腸球菌作為遞送硒蛋白的生物載體，具有更高的硒蛋白遞送效率、益生菌腸道定植能力不變、治療成本低、給藥便利、抗腸炎效果好等諸多優(yōu)點。富硒屎腸球菌對于腸炎的治療效果顯著優(yōu)于非治療組。

16、與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點：(1)本發(fā)明以益生菌作為硒的生物載體，通過富硒發(fā)酵技術，將無機硒轉化為易于機體吸收的有機硒形式，與其它硒源相比，不僅提高了硒的轉化效率和遞送效率，且具有益生菌制備方法簡便，適合工業(yè)化生產的優(yōu)點。屎腸球菌作為硒的生物載體，增加了硒的靶向效率和生物利用度，而硒蛋白的抗氧化能力增強了腸道的屏障功能，減少氧化損傷，提高了益生菌的定植效率及生物活性，共同發(fā)揮抑制腸道炎癥的能力。

17、(2)本發(fā)明的富硒屎腸球菌具有益生菌可以口服給藥的特點，同時具備益生菌在制備與常規(guī)免疫抑制劑、小分子藥物、中藥、生物制劑聯(lián)合預防和/或治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用的特點。

18、(3)本發(fā)明的富硒屎腸球菌，其特點是在小鼠急性結腸炎模型中，與非治療組小鼠相比，可以顯著地抑制腸道炎癥病變，保護腸道屏障功能；富硒屎腸球菌治療后小鼠體重變化穩(wěn)定，結腸長度與疾病活動指數(shù)接近健康組小鼠。

19、(4)本發(fā)明的富硒屎腸球菌，其具有的一個令人驚訝的顯著效果是：其對炎癥性腸病的治療效果竟然優(yōu)于表達內皮抑素的長雙歧桿菌(該菌株的療效已經在國際刊物經過同行評審、獲得發(fā)表，frontiers?in?microbiology,2022,13:927277.)，并且接近健康小鼠，且腸道內部無明顯炎癥區(qū)域，糞便成型度較高。

技術特征：

1.一種富硒屎腸球菌菌劑在制備治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用。

2.一種富硒屎腸球菌菌劑在制備預防潰瘍性結腸炎藥物中的應用。

3.根據(jù)權利要求1或2所述的應用，其特征在于：所述富硒屎腸球菌菌劑由屎腸球菌經過富硒發(fā)酵制得，所述的硒含量為5-100μg/g。

4.根據(jù)權利要求1或2所述的應用，其特征在于：所述富硒屎腸球菌含量不低于1×108cfu/g。

5.根據(jù)權利要求3所述的應用，其特征在于：所述富硒屎腸球菌的發(fā)酵培養(yǎng)基包含如下組分：維生素c，4g/l；nacl，2.4g/l；na2hpo4，5.8g/l；kh2po4，0.528571g/l；葡萄糖，5g/l；酵母抽提物，3g/l；牛肉浸粉，1.7g/l；大豆蛋白胨，2g/l；牛肉蛋白胨，20g/l；納米硒溶液，2-20mg/l。

6.一種改善腸道環(huán)境用于預防和/或治療潰瘍性結腸炎的益生菌制劑，其特征在于：所述益生菌制劑包括富硒屎腸球菌。

7.根據(jù)權利要求4所述的益生菌制劑，其特征在于：所述益生菌制劑包括屎腸球菌發(fā)酵培養(yǎng)物、發(fā)酵上清、發(fā)酵液沉淀、超聲裂解上清、超聲裂解沉淀中的一種或多種的組合。

8.根據(jù)權利要求5所述的益生菌制劑，其特征在于：所述益生菌制劑包括凍干粉、片劑、膠囊劑或顆粒劑中的任意一種。

9.權利要求3所述的富硒屎腸球菌菌劑在制備與常規(guī)免疫抑制劑、小分子藥物、中藥、生物制劑聯(lián)合預防和/或治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用。

技術總結
本發(fā)明公開了一種富硒屎腸球菌菌劑在制備治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用，所述的富硒屎腸球菌通過富硒發(fā)酵工藝制備，將納米硒轉化為適合機體吸收的有機硒，在腸道發(fā)揮抗氧化能力，顯著緩解DSS誘導的潰瘍性結腸炎，降低疾病活動指數(shù)及體重變化，保護腸道屏障功能，從而緩解潰瘍性結腸炎，具有廣泛的應用前景。

技術研發(fā)人員：華子春,尹特
受保護的技術使用者：江蘇靶標生物醫(yī)藥研究所有限公司
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/5/8