本發(fā)明涉及一種葉蛋白提取的方法，更具體一點說，涉及一種用于桑產地溯源的葉蛋白提取的方法。

背景技術：

產地溯源的目的是為了實現(xiàn)食品防偽和安全，能夠在生產、加工、流通過程中任何指定階段追溯食品的產地，實現(xiàn)“從農田到餐桌”的全程關注。綜述農產品與加工食品產地溯源技術研究進展，主要分析和總結食品溯源技術與原理；農產品產地溯源的化學技術研究進展，包括穩(wěn)定同位素分析、礦物元素分析、有機成分分析；加工食品產地溯源研究。

植物葉蛋白或稱綠色蛋白濃縮物(leaf protein concentration，簡稱LPC)，是從新鮮植物葉片中提取的高質量濃縮蛋白質，不僅是畜禽生長發(fā)育和生產畜產品的主要營養(yǎng)物質，而且目前也正成為人類的保健營養(yǎng)理想食品之一。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供具有工藝簡單、低能耗、無需添加任何化學藥劑等技術特點的一種用于桑產地溯源的葉蛋白提取的方法。

本發(fā)明提供的一種用于桑產地溯源的葉蛋白提取的方法，它采用如下步驟：

1)按質量份數，選取新鮮采摘的80～100份桑葉，清洗去除表面附著物，置于70～75℃條件下的烘箱內干燥1～1.5h，經粉碎機粉碎，過40～60目的分樣篩，獲得預處理樣品；

2)按質量份數，取5～10份步驟1)獲得的預處理樣品，加入去離子水，置于20～30℃條件下的恒溫水浴鍋中浸泡1～2h，用超聲波細胞粉碎機對植物細胞進行充分破碎，離心過濾，獲得桑葉蛋白水溶液；

3)將步驟2)獲的桑葉蛋白質水溶液置于50～70℃條件下的恒溫水浴鍋中，水浴絮凝1～2h，真空泵抽濾，冷凍干燥1～2h，獲得純桑葉蛋白。

作為一種優(yōu)選，步驟2)中所述預處理樣品與去離子水樣液比為1:20。

作為一種優(yōu)選，步驟3)中所述真空泵參數真空壓設置為16～20pa，所述冷凍干燥參數溫度設置為-47～-50℃。

本發(fā)明提供的一種用于桑產地溯源的葉蛋白提取的方法，它采用如下步驟：

1)按質量份數，選取新鮮采摘的90份桑葉，清洗去除表面附著物，置于73℃條件下的烘箱內干燥1.3h，經粉碎機粉碎，過50目的分樣篩，獲得預處理樣品；

2)按質量份數，取8份步驟1)獲得的預處理樣品，加入去離子水，置于25℃條件下的恒溫水浴鍋中浸泡1.5h，用超聲波細胞粉碎機對植物細胞進行充分破碎，離心過濾，獲得桑葉蛋白水溶液；

3)將步驟2)獲的桑葉蛋白質水溶液置于60℃條件下的恒溫水浴鍋中，水浴絮凝1.5h，真空泵抽濾，冷凍干燥1.5h，獲得純桑葉蛋白。

作為一種優(yōu)選，步驟2)中所述預處理樣品與去離子水樣液比為1:20，步驟3)中所述真空泵參數真空壓設置為18pa，所述冷凍干燥參數溫度設置為-48℃。

本發(fā)明的有效益效果：本發(fā)明提取方法以水為溶劑，整個實驗過程不再摻雜其它化學試劑，既保證了葉蛋白的純度，也避免了提取的蛋白質結構被化學試劑破壞；無化學劑添加，保證了用穩(wěn)定同位素質譜儀對提取出的高純度桑葉蛋白進行同位素比質譜，得出特征數據是精準有效地數據，適用于桑產地溯源的葉蛋白的追溯；制備環(huán)保綠色無污染，工藝簡單、成本低；只需水浴加熱提取，低能耗、節(jié)省能源。

具體實施方式

下面將結合具體實施例對本發(fā)明作詳細的介紹：

本發(fā)明所述的一種用于桑產地溯源的葉蛋白提取的方法，采用如下步驟：

1)按質量份數，選取新鮮采摘的80～100份桑葉，清洗去除表面附著物，置于70～75℃條件下的烘箱內干燥1～1.5h，經粉碎機粉碎，過40～60目的分樣篩，獲得預處理樣品；

2)按質量份數，取5～10份步驟1)獲得的預處理樣品，加入去離子水，置于20～30℃條件下的恒溫水浴鍋中浸泡1～2h，用超聲波細胞粉碎機對植物細胞進行充分破碎，離心過濾，獲得桑葉蛋白水溶液；

3)將步驟2)獲的桑葉蛋白質水溶液置于50～70℃條件下的恒溫水浴鍋中，水浴絮凝1～2h，真空泵抽濾，冷凍干燥1～2h，獲得純桑葉蛋白。

作為一種優(yōu)選的實施例，步驟2)中所述預處理樣品與去離子水樣液比為1:20。

作為一種優(yōu)選的實施例，步驟3)中所述真空泵參數真空壓設置為16～20pa，所述冷凍干燥參數溫度設置為-47～-50℃。

實施例1：一種用于桑產地溯源的葉蛋白提取的方法，該制備方法采用如下步驟：

1)按質量份數，選取新鮮采摘的80份桑葉，清洗去除表面附著物，置于70℃條件下的烘箱內干燥1h，70℃的條件保護了蛋白質結構也實現(xiàn)了快速蒸發(fā)水的效果，再經粉碎機粉碎，過40目的分樣篩，獲得預處理樣品；

2)按質量份數，取5份步驟1)獲得的預處理樣品，加入100份去離子水，置于20℃條件下的恒溫水浴鍋中浸泡1h，用超聲波細胞粉碎機對植物細胞進行充分破碎，離心過濾，獲得桑葉蛋白水溶液；

3)將步驟2)獲的桑葉蛋白質水溶液置于50℃條件下的恒溫水浴鍋中，水浴絮凝1h，用真空壓力為16pa的真空泵抽濾，在-47℃條件下冷凍干燥1h，獲得純桑葉蛋白，利用穩(wěn)定同位素質譜儀對提取出的高純度桑葉蛋白進行同位素比質譜，得出特征數據進行溯源地分析。

實施例2：一種用于桑產地溯源的葉蛋白提取的方法，該制備方法采用如下步驟：

1)按質量份數，選取新鮮采摘的90份桑葉，清洗去除表面附著物，置于73℃條件下的烘箱內干燥1.3h，73℃的條件保護了蛋白質結構也實現(xiàn)了快速蒸發(fā)水的效果，再經粉碎機粉碎，過50目的分樣篩，獲得預處理樣品；

2)按質量份數，取8份步驟1)獲得的預處理樣品，加入160份去離子水，置于25℃條件下的恒溫水浴鍋中浸泡1.5h，用超聲波細胞粉碎機對植物細胞進行充分破碎，離心過濾，獲得桑葉蛋白水溶液；

3)將步驟2)獲的桑葉蛋白質水溶液置于60℃條件下的恒溫水浴鍋中，水浴絮凝1.5h，用真空壓力為18pa的真空泵抽濾，在-48℃條件下冷凍干燥1.5h，獲得純桑葉蛋白，利用穩(wěn)定同位素質譜儀對提取出的高純度桑葉蛋白進行同位素比質譜，得出特征數據進行溯源地分析。

實施例3：一種用于桑產地溯源的葉蛋白提取的方法，該制備方法采用如下步驟：

1)按質量份數，選取新鮮采摘的100份桑葉，清洗去除表面附著物，置于75℃條件下的烘箱內干燥1.5h，75℃的條件保護了蛋白質結構也實現(xiàn)了快速蒸發(fā)水的效果，再經粉碎機粉碎，過60目的分樣篩，獲得預處理樣品；

2)按質量份數，取10份步驟1)獲得的預處理樣品，加入200份去離子水，置于30℃條件下的恒溫水浴鍋中浸泡2h，用超聲波細胞粉碎機對植物細胞進行充分破碎，離心過濾，獲得桑葉蛋白水溶液；

3)將步驟2)獲的桑葉蛋白質水溶液置于70℃條件下的恒溫水浴鍋中，水浴絮凝2h，用真空壓力為20pa的真空泵抽濾，在-50℃條件下冷凍干燥2h，獲得純桑葉蛋白，再利用穩(wěn)定同位素質譜儀對提取出的高純度桑葉蛋白進行同位素比質譜，得出特征數據進行溯源地分析。

本發(fā)明所述的實施例并不限于以上所述3個實施例，通過前述公開的數值范圍，在就具體實施例中進行任意替換，從而可以得到無數個實施例，對此不一一例舉。