本發(fā)明涉及一種用于檢測(cè)農(nóng)藥的適配體傳感器的制備方法，屬于農(nóng)產(chǎn)品安全檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。

技術(shù)背景

隨著我國人民生活水平不斷提高，農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量安全問題越來越受到關(guān)注，尤其果品、蔬菜中農(nóng)藥殘留問題已經(jīng)成為公眾關(guān)注的焦點(diǎn)，常用農(nóng)藥如毒死蜱、對(duì)硫磷、丙溴磷等具有一定的內(nèi)吸性，可以通過食物鏈的富集作用轉(zhuǎn)移至人體，對(duì)人體具有潛在致癌作用，因此，農(nóng)藥一直是環(huán)境和食品安全檢測(cè)的重要項(xiàng)目，加強(qiáng)對(duì)農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)對(duì)保護(hù)生態(tài)環(huán)境，尤其是保障人類健康有著十分深遠(yuǎn)的意義。

常用的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法有酶抑制法和免疫傳感器法，可以實(shí)現(xiàn)有機(jī)磷農(nóng)藥的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)，具有較好的實(shí)用價(jià)值，然而，酶抑制法存在回收率低、錯(cuò)檢、漏檢比例較高、重復(fù)性差、難以滿足低殘留和定量檢測(cè)的要求等缺點(diǎn)，免疫傳感器是基于抗原和抗體特異性結(jié)合所引發(fā)的免疫反應(yīng)的原理所研制的傳感器，但是所用生物敏感物質(zhì)抗體獲取比較昂貴，處理環(huán)境比較苛刻，與傳統(tǒng)的免疫分析方法相比，適配體傳感器具有特異性強(qiáng)、分析速度快、結(jié)構(gòu)簡單、成本低廉等優(yōu)點(diǎn)，適配體傳感器的敏感界面是固定適配體到電極的表面，其直接影響適配體傳感器的穩(wěn)定性、靈敏度和選擇性等主要性能。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種能克服上述缺陷以及操作簡單、靈敏度高、選擇性好的檢測(cè)農(nóng)藥殘留的適配體傳感器制備方法，采取的技術(shù)方案為：

所述一種檢測(cè)農(nóng)藥的適配體傳感器的制備，其特征在于，適配體傳感器的傳感界面組成包括導(dǎo)電炭黑-殼聚糖、氧化石墨烯復(fù)合四氧化三鐵納米復(fù)合物，進(jìn)而固定農(nóng)藥的核酸適配體，最后用牛血清蛋白即BSA封閉，得到檢測(cè)農(nóng)藥的適配體傳感器。

所述方法的步驟如下：

1) 清洗、活化并測(cè)試裸玻碳電極，獲得預(yù)處理玻碳電極；

2) 制備炭黑-殼聚糖復(fù)合液，滴涂到步驟1)的預(yù)處理玻碳電極上；

3) 制備氧化石墨烯-四氧化三鐵復(fù)合納米材料，并用殼聚糖溶液進(jìn)行分散，將此分散液滴涂到在步驟2)所得的修飾電極上；

4) 在步驟3)所得的修飾電極上固定農(nóng)藥適配體；

5) 用牛血清蛋白封閉步驟4)所得的電極，得到適配體生物傳感器。

根據(jù)步驟1)所述清洗、活化并測(cè)試裸玻碳電極是利用熱 piranha 溶液浸泡裸玻碳電極后，用Al₂O₃漿拋光，再依次用去離子水、HNO₃、無水乙醇和去離子水超聲清洗，干燥后用循環(huán)伏安法活化，并通過檢測(cè)裸電極循環(huán)伏安曲線峰電位差測(cè)試電極。

根據(jù)步驟2)所述在預(yù)處理電極表面分層滴涂導(dǎo)電炭黑-殼聚糖溶液，是先將0.25 g 殼聚糖溶解于50 mL 乙酸溶液中持續(xù)攪拌至完全分散得到殼聚糖溶液，再將1.0 mg 導(dǎo)電炭黑加入到1.0 mL 上述殼聚糖溶液中超聲分離50 min得到導(dǎo)電炭黑-殼聚糖溶液，取7 μL的炭黑-殼聚糖溶液滴涂在預(yù)處理玻碳電極上，在空氣中干燥，用超純水沖洗表面，將未固定在電極表面的液體沖洗掉，得到炭黑-殼聚糖修飾的玻碳電極。

根據(jù)步驟3)所述在電極表面滴涂氧化石墨烯-四氧化三鐵復(fù)合納米材料，是先采用 Hummers 方法制備氧化石墨烯，再利用熱溶劑法制備氧化石墨烯-四氧化三鐵復(fù)合物，將7 μL的氧化石墨烯-四氧化三鐵復(fù)合納米材料滴涂在電極上，在空氣中干燥，得到氧化石墨烯-四氧化三鐵復(fù)合物修飾的電極。

根據(jù)步驟4)所述在工作電極上滴涂農(nóng)藥適配體，是將步驟3)所得電極浸入20 μL的2.5 μM適配體溶液中，并在4 ℃下靜置12 h，之后用pH 7.5的磷酸鹽緩沖溶液沖洗去除未吸附上的適配體，得到適配體修飾的電極。

根據(jù)步驟5)所述用牛血清蛋白封閉固定電極，是指將固定電極浸入0.5%的BSA溶液中26 ℃下靜置2 h。

所述方法的具體步驟如下：

1)利用熱Piranha溶液浸泡裸玻碳電極后，用Al₂O₃漿拋光，再依次用去離子水、HNO₃、無水乙醇和去離子水超聲清洗，干燥后用循環(huán)伏安法活化，并通過檢測(cè)裸電極循環(huán)伏安曲線峰電位差測(cè)試電極，得到預(yù)處理電極；

2)在50 mL 1.0% 乙酸溶液中加入0.25 g殼聚糖，配制成0.5% 殼聚糖溶液，將1.0 mg導(dǎo)電炭黑加入到1.0 mL新配制的0.5% 殼聚糖溶液中，通過超聲處理直到均勻分散，將制備好的炭黑-殼聚糖復(fù)合物在4 ℃下存儲(chǔ)；

3)采用Hummers方法制備氧化石墨烯，再利用熱溶劑法制備氧化石墨烯-四氧化三鐵復(fù)合物，將40 mg氧化石墨烯加入到30 mL 乙二醇中，再分別加入3 g 氯化鐵，9 g 醋酸鈉和30 mL 乙二胺(EDA)，超聲分散得到均勻溶液，然后回流加熱8 h，經(jīng)過離心分離后水洗數(shù)次，真空干燥得到氧化石墨烯-四氧化三鐵復(fù)合物；

4)將7 μL的步驟2)制備的導(dǎo)電炭黑-殼聚糖復(fù)合物滴涂在步驟1)所得的預(yù)處理玻碳電極上，在空氣中干燥，用超純水沖洗表面，將未固定在電極表面的復(fù)合物沖洗掉，得到導(dǎo)電炭黑-殼聚糖修飾的電極；

5)滴涂7 μL的步驟3)制得的氧化石墨烯-四氧化三鐵復(fù)合納米材料滴涂到步驟4)所得修飾電極的表面上，在空氣中干燥，用超純水沖洗表面，將未固定在電極表面的復(fù)合物沖洗掉，得到氧化石墨烯-四氧化三鐵復(fù)合修飾的電極；

6)將步驟5)得到的電極浸入20 μL的2.5 μM農(nóng)藥適配體溶液中并在4 ℃下靜置12 h，之后用pH 7.5的磷酸鹽緩沖溶液沖洗去除未吸附上的適配體，得到適配體修飾的電極；

7)將步驟6)所得固定電極浸入0.5%的BSA溶液中26 ℃下靜置2 h。

所述一種檢農(nóng)藥的適配體傳感器的制備，其特征在于：適配體傳感器的敏感界面組成包括導(dǎo)電炭黑-殼聚糖復(fù)合膜和氧化石墨烯-四氧化三鐵復(fù)合物，然后固定適配體。

所述一種檢測(cè)農(nóng)藥的適配體傳感器的制備，其特征在于：玻碳電極(d=3 mm)的清洗，傳感器傳感界面的構(gòu)建及過程表征(制備炭黑-殼聚糖、氧化石墨烯復(fù)合四氧化三鐵納米復(fù)合材料并以殼聚糖作為分散劑進(jìn)行分散，利用納米材料的協(xié)同作用共同修飾電極)，適配體傳感器工作曲線的建立，適配體傳感器性能的檢測(cè)，適配體傳感器對(duì)實(shí)際樣品的檢測(cè)。

所述一種檢測(cè)農(nóng)藥的適配體傳感器的制備，其特征在于：實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化，主要包括測(cè)試底液pH和孵育時(shí)間；所制備的適配體傳感器的工作曲線為：ΔI=14.82×logC+13.26 (ng/mL) (R²=0.993，0.1-10⁵ ng/mL)；適配體傳感器性能檢測(cè)包括特異性、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性、再生性以及適配體傳感器對(duì)蔬菜樣品回收率的測(cè)定。

其制備原理為：適配體傳感器以適配體作為識(shí)別元件，通過固定化技術(shù)將適配體結(jié)合到感受器表面，發(fā)生特異性識(shí)別反應(yīng)后，生成的復(fù)合物與產(chǎn)生的物理或化學(xué)信號(hào)相關(guān)聯(lián)，由換能器將其轉(zhuǎn)化為與待測(cè)物質(zhì)濃度(或活度)有關(guān)的可定量或者可處理的物理化學(xué)信號(hào)，再經(jīng)過二次儀表放大并且輸出信號(hào)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)待測(cè)物質(zhì)的檢測(cè)，本發(fā)明采用以殼聚糖作為分散劑制備的導(dǎo)電炭黑和氧化石墨烯復(fù)合四氧化三鐵納米復(fù)合物對(duì)玻碳電極進(jìn)行修飾，氧化石墨烯復(fù)合四氧化三鐵納米材料，通過傳統(tǒng)的溶劑熱方法在通過加熱、回流、提純、清洗、干燥等步驟制備。導(dǎo)電炭黑是一種典型的特種炭黑，因其良好的導(dǎo)電性能和較高的性價(jià)比，廣泛應(yīng)用于導(dǎo)電和防靜電制品中，氧化石墨稀(graphene oxide, GO)作為石墨稀的衍生物，為氧化石墨的剝落物，可用強(qiáng)質(zhì)子酸處理原始石墨，再進(jìn)行氧化生成氧化石墨，氧化石墨稀價(jià)格便宜，容易制得，同時(shí)它具有較好的親水性和較低的生物毒性，因此在生物醫(yī)學(xué)、生物分析、以及生物傳感等領(lǐng)域具有潛在的應(yīng)用價(jià)值，殼聚糖(CS)屬于多糖類，它具有優(yōu)異的成膜性、吸附性、透氣性和滲透性，成膜后具有很好的吸附性、穩(wěn)定性和良好的生物相容性，其豐富的氨基、多孔性結(jié)構(gòu)使它被廣泛用于生物分子的固定和修飾電極的制備，殼聚糖的良好的生物相容性，可作為適配體的固定載體，為適配體在電極表面的固定提供了一個(gè)良好的生物界面，保持了適配體的生物活性以用來和農(nóng)藥進(jìn)行有效的特異性結(jié)合，采用本發(fā)明制成的適配體傳感器可以在蔬果采收、上市前進(jìn)行農(nóng)藥殘留的快速測(cè)定，直接對(duì)農(nóng)藥殘留量是否超標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，避免因食用含有殘留農(nóng)藥的蔬果而引起中毒，為農(nóng)產(chǎn)品安全生產(chǎn)與消費(fèi)提供殘留檢測(cè)的技術(shù)支撐。

為達(dá)到以上目的，采取以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：一種檢測(cè)農(nóng)藥的適配體傳感器的制備，其特征在于：(1) 適配體傳感器制備前裸玻碳電極的清洗、活化和性能測(cè)試，如果測(cè)試循環(huán)伏安曲線中的峰電位差在100 mV以下，氧化峰和還原峰對(duì)稱，則所述玻碳電極可使用，否則要重新返回清洗步驟中，直到符合要求；(2) 清洗好的裸玻碳電極表面滴涂分散均勻的炭黑-殼聚糖復(fù)合液，繼而修飾氧化石墨烯-四氧化三鐵復(fù)合物，然后固定適配體，最后用牛血清白蛋白(BSA)封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)，適配體傳感器制備結(jié)束后，放入冰箱里4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

為達(dá)到以上目的，采取以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：一種檢測(cè)農(nóng)藥的適配體傳感器的制備，其特征在于：(1) 將上述制備好的適配體傳感器在工作底液中以不同的掃速做循環(huán)伏安方法掃描，可以得到峰值和掃速的關(guān)系，得到是受擴(kuò)散控制的；(2) 配置一系列的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液，進(jìn)行循環(huán)伏安掃描，得到抑制率，進(jìn)一步得出上述制備的適配體傳感器的工作曲線、檢測(cè)范圍和檢測(cè)限；(3) 配置一系列經(jīng)?；旌鲜褂玫霓r(nóng)藥溶液，以檢測(cè)所制備的適配體傳感器的特異性；(4)通過循環(huán)伏安掃描多段并且于冰箱中放置一段時(shí)間再次測(cè)量驗(yàn)證上述適配體傳感器的穩(wěn)定性，通過解離和再次免疫檢測(cè)其再生性能；(5) 對(duì)實(shí)際果蔬樣品進(jìn)行分析得出該適配體傳感器的回收率。

本發(fā)明使用的氧化石墨烯是用強(qiáng)質(zhì)子酸處理原始石墨，再進(jìn)行氧化生成氧化石墨，然后采用傳統(tǒng)的溶劑熱方法經(jīng)過加熱、回流、提純、清洗、干燥等步驟制備制備氧化石墨烯-四氧化三鐵納米復(fù)合材料，再以具有良好生物相容性和成膜性的殼聚糖作為分散劑進(jìn)行分散，得到的納米復(fù)合物膜能夠促進(jìn)電化學(xué)反應(yīng)中電子的傳遞，提高電極上的響應(yīng)電流，用以制備響應(yīng)信號(hào)強(qiáng)和靈敏度高的適配體傳感器。

所述適配體傳感器的制備工藝如下：(1) 取7 μL分散均勻的導(dǎo)電炭黑-殼聚糖納米復(fù)合膜滴涂在預(yù)處理好的玻碳電極表面，常溫下靜置3 h，用pH7.5的PBS沖洗電極表面；(2) 電極表面晾干后，取7 μL氧化石墨烯-四氧化三鐵納米復(fù)合材料的殼聚糖分散液滴涂在電極表面，常溫下靜置2 h，然后用pH7.5的PBS緩沖液沖洗表面，氮?dú)獯蹈桑?3) 將上述經(jīng)納米材料修飾好的電極浸入在農(nóng)藥適配體溶液中，4 ℃條件下浸泡12 h，取出后用pH7.5的PBS緩沖液沖洗表面；(4) 最后將上述制備好的電極浸于0.5%的BSA溶液中，室溫下靜置2h，進(jìn)而封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)，適配體傳感器制作完成，保存在4 ℃條件下備用。

本發(fā)明的有益效果：

首先，本發(fā)明引入了一種超級(jí)電容器電極材料：導(dǎo)電炭黑-殼聚糖復(fù)合物，利用導(dǎo)電炭黑優(yōu)良的導(dǎo)電性能及殼聚糖優(yōu)異的生物相容性、成膜性，有效地提高了導(dǎo)電性及電容，利用氧化石墨烯-四氧化三鐵復(fù)合物的殼聚糖混合溶液提高電極的比表面積，協(xié)同炭黑修飾電極，顯著地增強(qiáng)了信號(hào)響應(yīng)；

其次，本發(fā)明制備的適配體傳感器檢測(cè)范圍較寬，線性范圍為0.1-10⁵ ng/mL，檢測(cè)限較低，達(dá)到0.033 ng/mL，對(duì)制備好的適配體傳感器保存三周后檢測(cè)，其電流響應(yīng)仍可保持在初始電流的80%以上，穩(wěn)定性良好，且該適配體傳感器可有效地復(fù)活5次，再生性較好；

第三，本發(fā)明所制備的適配體傳感器的檢測(cè)結(jié)果與氣相色譜法的檢測(cè)結(jié)果一致，可作為蔬菜上市前農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)的輔助手段。

附圖說明

圖1導(dǎo)電炭黑透射電鏡圖；(A，低倍下導(dǎo)電炭黑透射電鏡圖；B，高倍下導(dǎo)電炭黑透射電鏡圖)；

圖2 氧化石墨烯、氧化石墨烯-四氧化三鐵復(fù)合物掃描電鏡圖；(A，低倍下氧化石墨烯掃描電鏡圖；B，高倍下氧化石墨烯-四氧化三鐵復(fù)合物掃描電鏡圖)；

圖3 電極組裝過程阻抗圖譜；(a，裸玻碳電極；b，導(dǎo)電炭黑-殼聚糖復(fù)合物修飾后的電極；c，氧化石墨烯-四氧化三鐵修飾后的電極；d，固定適配體后的電極；e，牛血清白蛋白封閉后的電極)；

圖4 適配體傳感器工作條件優(yōu)化：pH值和孵育時(shí)間的優(yōu)化；

圖5 適配體傳感器的工作曲線；(A，從a到h農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度分別為10⁵, 10⁴, 1000, 100, 10, 1, 0.1 ng/mL；B，適配體傳感器的工作標(biāo)準(zhǔn)曲線)。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1導(dǎo)電炭黑-殼聚糖納米復(fù)合液的制備

將殼聚糖(CS)溶于1.0%的乙酸溶液中，配制0.5% CS溶液，室溫下磁力攪拌至殼聚糖完全溶解，將1.0 mg導(dǎo)電炭黑粉末溶解于1.0 mL 上述CS溶液中，超聲分散直至得到溶解均勻的復(fù)合溶液，圖1為導(dǎo)電炭黑-殼聚糖復(fù)合物的透射電鏡圖，A圖為低倍下掃描圖，B圖為高倍鏡投射圖；

實(shí)施例2 氧化石墨烯-四氧化三鐵復(fù)合物的制備

氧化石墨烯是通過改進(jìn)的Hummers方法制得，具體制備步驟如下：將石墨粉末加入H₂SO₄ (12mL）、K₂S₂O₈ (2.5 g)、P₂O₅ (2.5 g) 的混合液中，80℃反應(yīng) 4.5 h，然后加入 0.5 L水稀釋，并過濾洗滌以除去多余的酸，所得的預(yù)產(chǎn)物在室溫下過夜干燥，然后將預(yù)氧化的石墨加入H₂SO₄ (120 mL)中，在冰水浴保護(hù)下逐步加入KMnO₄ (15 g)，此混合物在 35℃下攪拌反應(yīng) 30 min、90℃下反應(yīng) 90 min后，加入250 mL水稀釋，使其沸騰反應(yīng) 25 min，再攪拌 2 小時(shí)后，加入 0.7 L水和 20 mL 30%H₂O₂溶液終止反應(yīng)，混合物過濾后用 1:10 的稀鹽酸沖洗數(shù)次后，再用水沖洗至中性，然后將所得產(chǎn)物進(jìn)一步透析純化除去剩余的金屬離子，透析一星期后，將得到的氧化石墨在室溫條件下超聲剝離 30 min，最終GO儲(chǔ)備液的濃度大約為 0.5 mg·mL^-1，圖2A即為氧化石墨烯的低倍掃描電鏡圖，從圖中可以看到氧化石墨烯非常薄的片層結(jié)構(gòu)，氧化石墨烯復(fù)合四氧化三鐵是通過溶劑熱法制得：40 mg氧化石墨烯混合3.0 g FeCl₃·6H₂O，9.0 g CH₃COONa 和30 mL 乙二胺 (EDA)超聲得到均相溶液，將此混合溶液加熱回流8 h，將混合物進(jìn)行離心分離，然后分別用水和酒精清洗數(shù)次，60 ℃真空干燥即得到氧化石墨烯復(fù)合四氧化三鐵，圖2B即為氧化石墨烯復(fù)合四氧化三鐵的掃描電鏡圖，球形的四氧化三鐵離子負(fù)載到片層氧化石墨烯上；

實(shí)施例3 玻碳電極的清洗、活化和測(cè)試

玻碳電極修飾前，首先浸入熱的“piranha”溶液 (H₂SO₄: H₂O₂ = 3:1)中浸泡15 min，用水清洗干凈，接下來用0.3 μm、30 nm的Al₂O₃漿在麂皮上拋光至鏡面，拋光后用去離子水清洗去除表面污物，然后依次用6 mol/L的HNO₃、無水乙醇和去離子水各自超聲清洗5 min，氮?dú)猸h(huán)境下干燥。

玻碳電極的活化：徹底清洗后，電極在0.5 mol/L H₂SO₄溶液中用循環(huán)伏安法活化，掃描范圍1.0 V~-1.0 V，反復(fù)掃描直至達(dá)到穩(wěn)定的循環(huán)伏安圖為止。

預(yù)處理好的玻碳電極的測(cè)試：在含有1×10^-3 mol/L K₃Fe(CN)₆的0.20 mol/L KNO₃溶液中跑循環(huán)伏安曲線，掃描速度50 mV/s，掃描范圍為-0.1 V~0.6 V，以測(cè)試玻碳電極的性能；當(dāng)循環(huán)伏安曲線中的峰電位差在100 mV以下，所述玻碳電極可使用，否則要重新進(jìn)行清洗，處理所述玻碳電極，直到符合要求，圖3為玻碳電極修飾過程的阻抗圖，在玻碳電極表面分別修飾炭黑-殼聚糖復(fù)合物及氧化石墨烯-四氧化三鐵納米復(fù)合物之后，阻抗值依次減小，由于二者均具有良好的導(dǎo)電性，固定適配體、封閉牛血清白蛋白之后，阻抗分別增大，是由于其均為蛋白分子，修飾在電極表面會(huì)形成絕緣層從而阻礙電子的傳遞。

實(shí)施例4 適配體傳感器的制備

取7 μL分散均勻的炭黑-殼聚糖復(fù)合液滴涂在電極表面，常溫下靜置使其干燥，然后用pH7.5的PBS緩沖液沖洗表面，氮?dú)獯蹈?，再? μL制備好的氧化石墨烯-四氧化三鐵納米復(fù)合物溶液滴涂在電極上，常溫下干燥，然后用pH7.5的磷酸鹽緩沖液沖洗電極表面，氮?dú)獯蹈?，再將上述?jīng)納米材料修飾的電極浸在20 μL 2.5 μM的農(nóng)藥適配體溶液中，4 ℃條件下浸泡12 h，取出后用PBS緩沖液沖表面，晾干待用，最后將上述電極浸入0.5%的BSA溶液中室溫下靜置2 h，以封閉電極上非特異性結(jié)合位點(diǎn)，適配體傳感器制作完成，保存在4 ℃條件下備用。

實(shí)施例5 適配體傳感器使用條件的優(yōu)化及測(cè)定

從測(cè)試底液pH和孵育時(shí)間對(duì)所制備的適配體傳感器的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化，測(cè)試底液 pH的范圍為6.0~8.5，孵育時(shí)間的范圍為10~60 min，經(jīng)過試驗(yàn)分析如圖4所示，測(cè)試底液的最佳pH值為7.5，最佳孵育時(shí)間為40 min。

分別配置濃度為10⁵, 10⁴, 1000, 100, 10, 1, 0.1 ng/mL的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，將上述制備好的適配體傳感器分別浸入不同濃度的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，在常溫下孵育40 min，檢測(cè)反應(yīng)前后電流變化得到其工作曲線（圖5）。

選5根于相同條件下制備好的適配體傳感器檢測(cè)其重現(xiàn)性；連續(xù)15天依次檢測(cè)相同濃度的農(nóng)藥溶液以檢測(cè)其穩(wěn)定性；將反應(yīng)后的傳感器用甘氨酸-HCl緩沖液(pH2.8)解離農(nóng)藥5 min后再次檢測(cè)其再生能力，結(jié)果表明該傳感器具有良好的重現(xiàn)性、穩(wěn)定性以及再生性。

把蔬菜徹底清洗干凈并用去離子水清洗3次，噴灑上一定濃度的農(nóng)藥，放置5 h后，用10 mL丙酮/0.1 M pH7.5磷酸鹽緩沖溶液(1/9, v/v)做溶劑超聲處理20 min，然后再離心10 min (10000 rpm)，得到的上清液用來檢測(cè)實(shí)際樣品的回收率，其回收率可以達(dá)到96.0%~106.0%，加標(biāo)回收率檢測(cè)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.21%~3.70%，且傳感器的重現(xiàn)性良好。

此適配體傳感器檢測(cè)農(nóng)藥農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法操作工藝簡單，檢測(cè)時(shí)間較短，檢測(cè)農(nóng)藥濃度范圍廣，靈敏度高，再生能力高以及對(duì)實(shí)際樣品分析有較好的回收率和重現(xiàn)性，符合我國農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)發(fā)展和國際化要求，雖然本發(fā)明已以較佳的實(shí)施例公開如上，但其并非用以限定本發(fā)明，任何熟悉此技術(shù)的人，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，都可以做各種改動(dòng)和修飾，因此本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)該以權(quán)利要求書所界定的為準(zhǔn)。