用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的裝置的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的裝置，屬于醫(yī)療器械領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]目前，腫瘤越來(lái)越嚴(yán)重威脅到人類(lèi)的生命健康。據(jù)報(bào)道，我國(guó)每年新發(fā)腫瘤病例約為312萬(wàn)例，其中，全國(guó)平均每天8550人、每分鐘有6人被診斷為腫瘤，全國(guó)腫瘤死亡率為180.54/10萬(wàn)，每年因腫瘤死亡的病例達(dá)270萬(wàn)例。如此觸目的數(shù)據(jù)，高度引起相關(guān)部門(mén)的重視，每位醫(yī)療工作者也都為降低腫瘤疾病而努力。腫瘤的死亡率高居不下的原因除了發(fā)病率外，腫瘤的惡性化轉(zhuǎn)移是造成癌癥復(fù)發(fā)和治愈率低下的根本原因，對(duì)腫瘤細(xì)胞缺乏有效的檢測(cè)是一個(gè)重要原因。
[0003]檢測(cè)腫瘤細(xì)胞能有效地對(duì)腫瘤情況進(jìn)行早期診斷；能對(duì)治療手段的效果進(jìn)行快速有效的評(píng)估，可以以此確定較為合適的具體治療方案；能實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)，具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。
[0004]然而傳統(tǒng)的技術(shù)方法很難對(duì)其進(jìn)行直接檢測(cè)分析。跟著科技的發(fā)展，人們提出了一系列基于微米/納米材料與結(jié)構(gòu)的分離技術(shù)以實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的富集和檢測(cè)。但是現(xiàn)有基于此種方法的檢測(cè)靈敏度依然有待于提高，據(jù)報(bào)道，利用此法僅有五六成的乳腺癌患者中檢測(cè)出了腫瘤細(xì)胞。因此需要不斷的發(fā)展高靈敏富集和檢測(cè)方法。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0005]為了克服現(xiàn)有的腫瘤細(xì)胞檢測(cè)方法的不足，本實(shí)用新型提供了一種以納米凸起為基底的裝置來(lái)檢測(cè)腫瘤細(xì)胞。
[0006]為達(dá)到上述實(shí)用新型目的，本實(shí)用新型所采用的技術(shù)方案是:用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的裝置，其由玻璃基板與硅蓋板組成；所述硅蓋板設(shè)有由凸起構(gòu)成的粗糙區(qū)域；所述硅蓋板還設(shè)有兩個(gè)孔；所述玻璃基板設(shè)有儲(chǔ)液池與兩條流體通道；所述玻璃基板位于硅蓋板的下方；所述粗糙區(qū)域與儲(chǔ)液池對(duì)應(yīng)；所述每條流體通道一端連通儲(chǔ)液池，一端與一個(gè)孔對(duì)應(yīng)。
[0007]根據(jù)本實(shí)用新型的裝置，所述凸起的高度為1.2微米；凸起的間距為0.3微米。
[0008]根據(jù)本實(shí)用新型的裝置，所述儲(chǔ)液池的面積為玻璃基板面積的40%。
[0009]根據(jù)本實(shí)用新型的裝置，所述硅蓋板與玻璃基板為方形；所述硅蓋板上的兩個(gè)孔位于對(duì)角線(xiàn)位置。
[0010]硅蓋板上的凸起粗糙區(qū)域捕捉富集腫瘤細(xì)胞，為檢測(cè)區(qū)域。上述所謂粗糙區(qū)域與儲(chǔ)液池對(duì)應(yīng)是指粗糙區(qū)域與儲(chǔ)液池面積接近，最好一致；面面相向。
[0011]優(yōu)選的，流體通道包括平滑流道和魚(yú)骨形流道。魚(yú)骨形流道能夠很好地混合均勻流入其中的流體。
[0012]玻璃基板與硅蓋板封接結(jié)合，玻璃基板上的儲(chǔ)液池與流體通道形成封閉結(jié)構(gòu)，玻璃基板形成的儲(chǔ)液池可以用來(lái)存放試劑，通道用于流體的流通，需要在硅蓋板上設(shè)置小孔，作為流體的出入口 ；本實(shí)用新型優(yōu)選小孔的孔徑為I毫米。
[0013]本實(shí)用新型公開(kāi)了用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞裝置的制備:
[0014]根據(jù)設(shè)計(jì)的儲(chǔ)液池、流體通道，繪制出所需圖形，制出鉻掩膜板；以超聲波刻蝕法，在玻璃基板上制備出儲(chǔ)液池與流體通道；根據(jù)設(shè)計(jì)，采用反應(yīng)離子刻蝕法在硅蓋板上制備出凸起粗糙區(qū)域；用激光打孔法在硅蓋板上制備出兩個(gè)小孔；最后用乙醇及去離子水清洗干凈；為帶有粗糙區(qū)域的硅蓋板；將硅蓋板封接在玻璃基板上方，流體儲(chǔ)液池與粗糙區(qū)域?qū)?yīng)；流體通道的一端與小孔對(duì)應(yīng)，分別為流體入口及出口。
[0015]由于上述技術(shù)方案的運(yùn)用，本實(shí)用新型具有以下優(yōu)點(diǎn):
[0016]本實(shí)用新型將納米粗糙區(qū)域應(yīng)用到用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的裝置中，顯著地提高了捕捉腫瘤細(xì)胞的效率；極大的提高了腫瘤細(xì)胞檢測(cè)的靈敏度；有利于病癥的準(zhǔn)確檢測(cè)。
【附圖說(shuō)明】
[0017]圖1為用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞裝置的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0018]圖2為實(shí)施例一硅蓋板的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0019]圖3為實(shí)施例一玻璃基板的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0020]其中，1、玻璃基板，2、硅蓋板，21、流體入口，22、流體出口，23、凸起粗糙區(qū)域，11、儲(chǔ)液池，12、流體通道，13、流體通道；
[0021]圖4為已知數(shù)目的腫瘤細(xì)胞與用本實(shí)用新型的裝置檢測(cè)到腫瘤細(xì)胞的光強(qiáng)圖。
【具體實(shí)施方式】
[0022]下面結(jié)合附圖及實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型作進(jìn)一步描述:
[0023]實(shí)施例一
[0024]附圖1為檢測(cè)腫瘤細(xì)胞裝置的結(jié)構(gòu)示意圖，由玻璃基板I以及封接在玻璃基板上方的硅蓋板2組成。
[0025]附圖2為硅蓋板的結(jié)構(gòu)示意圖，硅蓋板設(shè)有流體入口 21與出口 22，還設(shè)有凸起粗糙區(qū)域23。
[0026]附圖3為玻璃基板的結(jié)構(gòu)示意圖，設(shè)有儲(chǔ)液池11，流體出口與入口通過(guò)流體通道12、13分別與儲(chǔ)液池。流體通道包括平滑流道和魚(yú)骨形流道。流入魚(yú)骨形流道中的流體能夠很好地混合均勻。
[0027]檢測(cè)腫瘤細(xì)胞裝置的制備:
[0028]根據(jù)設(shè)計(jì)的儲(chǔ)液池、流體通道，繪制出所需圖形，制出保護(hù)膜附在玻璃上；以超聲波刻蝕法，在玻璃基板上制備出儲(chǔ)液池與流體通道；根據(jù)設(shè)計(jì)，采用反應(yīng)離子刻蝕法在硅蓋板上制備出凸起粗糙區(qū)域；用激光打孔法在硅蓋板上制備出兩個(gè)小孔；最后用乙醇及去離子水清洗干凈；為帶有粗糙區(qū)域區(qū)域的硅蓋板；將硅蓋板封接在玻璃基板上方，流體儲(chǔ)液池與粗糙區(qū)域?qū)?yīng)；流體通道的一端與小孔對(duì)應(yīng)，分別為流體入口及出口。將潔凈硅蓋板和玻璃基板表面用等離子氧化處理I分鐘，再對(duì)應(yīng)復(fù)合在一起，于124°C烘箱中處理22小時(shí)，實(shí)現(xiàn)不可逆封接。
[0029]儲(chǔ)液池大小為1.3厘米X 1.4厘米X 2毫米；流體通道直徑為I毫米，與小孔對(duì)應(yīng)，流體不外泄；凸起的高度為1.2微米；凸起的間距為0.3微米。
[0030]樣品檢測(cè):
[0031]將血樣中紅細(xì)胞裂解，分離出白細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞；之后加入一定量的抗體(根據(jù)需要檢測(cè)的腫瘤細(xì)胞選擇合適的抗體)標(biāo)記的電化學(xué)發(fā)光材料(三聯(lián)吡啶釕化合物)，共孵育，離心去除未結(jié)合腫瘤細(xì)胞的電化學(xué)發(fā)光材料，得到細(xì)胞懸浮液；將細(xì)胞懸液以恒定的流速加入檢測(cè)腫瘤細(xì)胞裝置的入口，經(jīng)過(guò)流體通道勻速進(jìn)入儲(chǔ)液池中。在凸起粗糙線(xiàn)的作用下，結(jié)合上電化學(xué)發(fā)光材料的腫瘤細(xì)胞被粗糙區(qū)域牢牢捕捉；細(xì)胞懸浮液添加完成后，捕捉的腫瘤細(xì)胞可以洗脫下來(lái)，利用電化學(xué)發(fā)光體系對(duì)捕獲的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，可以進(jìn)行循環(huán)電位掃描，或者采用脈沖電位模式，或者采用恒電位模式，即可得到電化學(xué)發(fā)光信號(hào)，通過(guò)電化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度計(jì)算出腫瘤細(xì)胞的捕獲效率。
[0032]在血樣中放置了已知不同數(shù)目的乳腺癌細(xì)胞，根據(jù)方法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的信號(hào)。附圖4是在血樣中放置了不同數(shù)目已知的乳腺癌細(xì)胞電化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度以及用本實(shí)用新型的裝置去檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的電化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度圖?？梢钥吹奖緦?shí)用新型的裝置捕捉到的信號(hào)和已知數(shù)目的細(xì)胞的電化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度有明顯的相吻合的情況，證明本實(shí)用新型的裝置有非常高的捕捉和檢測(cè)效率。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的裝置，其特征在于:所述用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的裝置由玻璃基板與硅蓋板組成；所述硅蓋板設(shè)有由凸起構(gòu)成的粗糙區(qū)域；所述硅蓋板還設(shè)有兩個(gè)孔；所述玻璃基板設(shè)有儲(chǔ)液池與兩條流體通道；所述玻璃基板位于硅蓋板的下方；所述粗糙區(qū)域與儲(chǔ)液池對(duì)應(yīng)；所述每條流體通道一端連通儲(chǔ)液池，一端與一個(gè)孔對(duì)應(yīng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的裝置，其特征在于:所述凸起的高度為1.2微米；凸起的間距為0.3微米。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的裝置，其特征在于:所述儲(chǔ)液池的面積為玻璃基板面積的40%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的裝置，其特征在于:所述硅蓋板與玻璃基板為方形。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的裝置，其特征在于:所述硅蓋板上的兩個(gè)孔位于對(duì)角線(xiàn)位置。
【專(zhuān)利摘要】本實(shí)用新型屬于醫(yī)用器械領(lǐng)域，公開(kāi)了用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的裝置其由玻璃基板與硅蓋板組成；所述硅蓋板設(shè)有由凸起構(gòu)成的粗糙區(qū)域；所述硅蓋板還設(shè)有兩個(gè)孔；所述玻璃基板設(shè)有儲(chǔ)液池與兩條流體通道；所述玻璃基板位于硅蓋板的下方；所述粗糙區(qū)域與儲(chǔ)液池對(duì)應(yīng)；所述每條流體通道一端連通儲(chǔ)液池，一端與一個(gè)孔對(duì)應(yīng)。本實(shí)用新型將納米粗糙區(qū)域應(yīng)用到用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的裝置中，顯著地提高了捕捉腫瘤細(xì)胞的效率；極大的提高了腫瘤細(xì)胞檢測(cè)的靈敏度；有利于病癥的準(zhǔn)確檢測(cè)。
【IPC分類(lèi)】G01N33-574
【公開(kāi)號(hào)】CN204462155
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201420817969
【發(fā)明人】張偉
【申請(qǐng)人】常熟市創(chuàng)新模具有限公司
【公開(kāi)日】2015年7月8日
【申請(qǐng)日】2014年12月22日