本發(fā)明屬于獸用生物制品,具體涉及禽腺病毒基因工程疫苗及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、禽腺病毒會(huì)嚴(yán)重造成病理?yè)p傷,進(jìn)而導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生嚴(yán)重的免疫抑制,極易導(dǎo)致繼發(fā)感染或使多種疫苗免疫失敗,給養(yǎng)雞業(yè)造成巨大的損失,因此需要一種基因工程疫苗來(lái)解決這一問題。
2、但是部分疫苗大多存在制備靈活性和精準(zhǔn)性欠佳,影響疫苗生產(chǎn)效率和使用作用效果。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、為解決上述背景技術(shù)中提出的問題。本發(fā)明提供了禽腺病毒基因工程疫苗及其制備方法與應(yīng)用,具有能夠保障制備靈活性、精準(zhǔn)性、保障生產(chǎn)效率和使用效果的特點(diǎn)。
2、為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:禽腺病毒基因工程滅活疫苗,滅活疫苗的抗原為滅活后的ybav-4株病毒;ybav-4株病毒的編號(hào)為cctccno.v201541。
3、優(yōu)選的,病毒分離用培養(yǎng)分離的方式,病毒鑒定用血清方法鑒定。
4、優(yōu)選的,疫苗制備用細(xì)胞培養(yǎng)或雞胚接種的方法,疫苗制備純化的方法為萃取或中和離子交換等方式。
5、優(yōu)選的,病毒滅活用乙醇滅活的方式。
6、優(yōu)選的,禽腺病毒基因工程疫苗的制備方法,包括以下步驟:
7、步驟一、分離、克隆與鑒定:首先取出病死雞中肝臟,并對(duì)其進(jìn)行粉碎,此時(shí)將肝臟與滅菌生理鹽水通過1-3:5-12進(jìn)行配比,進(jìn)行凍融離心處理后取上層,再加入與上層比例1-3:10-30量的青霉素,在4度的環(huán)境放置8-10個(gè)小時(shí),然后借助血清法對(duì)其進(jìn)行鑒定,之后將鑒定完成的病毒在載體上進(jìn)行克隆,并在克隆后進(jìn)行鑒定,確保成功克?。?/p>
8、步驟二、基因序列分析:對(duì)克隆完成的病毒進(jìn)行序列分析,且在分析后進(jìn)行編碼和調(diào)控處理,調(diào)控完成后,可對(duì)基因進(jìn)行改造處理;
9、步驟三、疫苗制備與純化:這時(shí)將載體注入轉(zhuǎn)染的宿主細(xì)胞內(nèi)部,再通過雞胚接種的方式,對(duì)重組病毒進(jìn)行大量收集,之后對(duì)重組病毒與白油和吐溫的佐劑進(jìn)行配置,將重組病毒配重后,通過萃取、加熱或中或離子交換的方式進(jìn)行純化為疫苗處理;
10、步驟四、疫苗檢驗(yàn)與質(zhì)量控制:選擇10只18-25天的健康且體重相似的雞,選出其中五只對(duì)其進(jìn)行注射0.2-0.4ml,接種后對(duì)雞進(jìn)行觀察記錄,接種20-60天,對(duì)10只雞分別進(jìn)行抽血處理,之后用瓊擴(kuò)試驗(yàn)檢測(cè)免疫雞與對(duì)照雞,對(duì)疫苗進(jìn)行評(píng)估處理即可。
11、優(yōu)選的,禽腺病毒基因工程疫苗的應(yīng)用,根據(jù)禽腺病毒基因工程疫苗或根據(jù)禽腺病毒基因工程疫苗的制備方法用于治療或預(yù)防禽腺病毒感染的藥物中的應(yīng)用。
12、與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果是:
13、1、本發(fā)明,通過分離、克隆與鑒定,能夠高精準(zhǔn)的對(duì)病毒進(jìn)行分離收集,且方便在分離后進(jìn)行鑒定和克隆處理,方便后續(xù)對(duì)疫苗進(jìn)行生產(chǎn),通過設(shè)置基因序列分析,能夠確定病毒的基因組、編碼區(qū)和調(diào)控區(qū),方便對(duì)病毒和疫苗進(jìn)行了解和優(yōu)化處理,通過設(shè)置疫苗制備與純化,能夠提高疫苗的效率保障疫苗作用。
1.禽腺病毒基因工程滅活疫苗,其特征在于:滅活疫苗的抗原為滅活后的ybav-4株病毒;ybav-4株病毒的編號(hào)為cctccno.v201541。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的禽腺病毒基因工程疫苗,其特征在于:病毒分離用培養(yǎng)分離的方式,病毒鑒定用血清方法鑒定。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的禽腺病毒基因工程疫苗,其特征在于:疫苗制備用細(xì)胞培養(yǎng)或雞胚接種的方法,疫苗制備純化的方法為萃取或中和離子交換等方式。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的禽腺病毒基因工程疫苗,其特征在于:病毒滅活用乙醇滅活的方式。
5.禽腺病毒基因工程疫苗的制備方法,根據(jù)權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)的禽腺病毒基因工程疫苗,包括以下步驟:其特征在于:
6.禽腺病毒基因工程疫苗的應(yīng)用,根據(jù)權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)的禽腺病毒基因工程疫苗或權(quán)利要求5的禽腺病毒基因工程疫苗的制備方法用于治療或預(yù)防禽腺病毒感染的藥物中的應(yīng)用。