本技術(shù)要求2019年3月8日遞交的美國臨時(shí)申請no.62/815,486的優(yōu)先權(quán)，其內(nèi)容通過引用整體并入。公開了一種使用胰高血糖素樣肽和fc區(qū)的融合蛋白在調(diào)節(jié)血糖水平中的用途。

背景技術(shù)：

1、糖尿病與較高的心血管發(fā)病率和死亡率有關(guān)。高血壓、高血脂和糖尿病與心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)增加獨(dú)立相關(guān)。與沒有糖尿病的人相比，2型糖尿病的患者的患心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)增加了兩到四倍。

2、胰高血糖素樣肽-1(glp-1)被稱為對(duì)代謝和心血管有益的多效性肽。它源自前胰高血糖素原，這是一種158個(gè)氨基酸的前體多肽，其在不同組織中加工而形成許多不同的胰高血糖素原衍生肽。胰高血糖素原衍生肽包括胰高血糖素、胰高血糖素樣肽-1(glp-1)、胰高血糖素樣肽-2(glp-2)和胃泌酸調(diào)節(jié)素(oxm)，它們涉及包括葡萄糖穩(wěn)態(tài)、胰島素分泌、胃排空和腸道生長，以及食物攝入的調(diào)節(jié)的多種生理功能。

3、glp-1是一種由37個(gè)氨基酸組成的肽，對(duì)應(yīng)于胰高血糖素原的第72至108位氨基酸(胰高血糖素原的第92至128位)。主要的生物活性形式是一種30個(gè)氨基酸組成的肽激素(glp-1(7-37)酸)，它在餐后在腸道中產(chǎn)生，并被豐富的內(nèi)源性蛋白酶dpp4迅速降解。

4、許多glp-1類似物和衍生物是已知的。這些glp-1類似物包括毒晰外泌肽(exendins)，它是在希拉毒蜥的毒液中發(fā)現(xiàn)的肽。毒晰外泌肽與天然glp-1具有序列同源性，且可以結(jié)合glp-1受體并啟動(dòng)負(fù)責(zé)許多歸因于glp-1(7-37)oh的活動(dòng)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)反應(yīng)。這些glp-1類似物和衍生物在本文中稱為“glp-1肽”、“glp-1化合物”或“glp-1ra”，并且這些術(shù)語在整個(gè)申請中可互換使用。

5、glp-1肽在治療非胰島素依賴型糖尿病方面表現(xiàn)出最大的前景。與給藥會(huì)導(dǎo)致低血糖的胰島素不同，glp-1受血糖水平控制，并且不存在與glp-1肽治療相關(guān)的低血糖風(fēng)險(xiǎn)。

6、各種長效glp-1肽(諸如，glp-1融合蛋白)具有更長的半衰期，同時(shí)保持對(duì)β細(xì)胞功能、胰島素敏感性、體重和心血管系統(tǒng)1-4的多重有益作用并且缺乏危及生命的不良事件，如低血糖5，上述各種長效glp-1肽在過去幾十年中得到了深入研究。

7、然而，盡管它作為一種抗糖尿病藥物很有吸引力，但是一些研究表明glp-1治療的副作用，如惡心、嘔吐以及心率增加可能會(huì)干擾glp-1ra的持續(xù)增長6-8。

8、根據(jù)sikirica等人的橫斷面調(diào)查，惡心/嘔吐是醫(yī)生和患者停用glp-1肽的最主要的影響因素，分別占比約46％和64％。并且，大約一半的患者報(bào)告惡心/嘔吐相關(guān)因素是與glp-1ras相關(guān)的最麻煩的問題8。glp-1肽的另一個(gè)潛在缺點(diǎn)是心率增加，這在幾乎所有g(shù)lp-1肽的臨床試驗(yàn)中都有報(bào)道10,11。這可能是外周給藥glp-1肽對(duì)心肌細(xì)胞的直接影響12,13，長效glp-1肽比短效glp-1肽更顯著和持續(xù)6。長效glp-1肽對(duì)心率的增加很小，但心率增加可能代表安全問題，因?yàn)樗峭砥谛牧λソ咛悄虿』颊咝难芗膊〉奈ｋU(xiǎn)因素之一?？偟膩碚f，這些副作用可能會(huì)削弱glp-1肽在真實(shí)世界治療中的功效，因此這表明有必要開發(fā)更安全的glp-1肽以最終提高治療效果。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、技術(shù)問題

2、本公開內(nèi)容涉及對(duì)其受體具有獨(dú)特結(jié)合親和力特性的fc融合glp-1肽(下文有時(shí)稱為“glp-1-gfc”或簡稱為“融合蛋白”或“融合肽”)的用途，該受體被設(shè)計(jì)用于提高體內(nèi)穩(wěn)定性和安全性。本文所述的glp-1-gfc作為長效glp-1ra顯示出良好的藥代動(dòng)力學(xué)(pk)和藥效學(xué)(pd)特性，與商業(yè)化的glp-1類似物(諸如，度拉糖肽)相比，具有更安全的特性。

3、技術(shù)方案

4、在一個(gè)方面，提供了一種治療糖尿病的方法，包括向有需要的受試者施用融合蛋白。在一個(gè)實(shí)施例中，糖尿病是胰島素依賴型的。在另一個(gè)實(shí)施例中，糖尿病是非胰島素依賴型的。

5、另一方面包括一種控制或調(diào)節(jié)受試者的葡萄糖水平的方法，該方法包括向有需要的受試者施用本文所述的融合蛋白。

6、在一個(gè)實(shí)施例中，受試者患有2型糖尿病。

7、在另一個(gè)實(shí)施例中，受試者可能患有代謝綜合征。

8、融合蛋白包含igfc和與fc連接的glp-1肽。在一個(gè)實(shí)施例中，fc是包含igg4ch2/ch3部分、igd?ch2部分和igd鉸鏈部分的雜合體，其中igd鉸鏈部分具有糖基化。

9、在另一個(gè)實(shí)施例中，glp-1肽可以具有不超過6個(gè)的氨基酸，這些氨基酸不同于glp-1(7-37)(seq?id?no:1)、glp-1(7-36)(seq?id?no:11)，或exendin-4(seq?id?no:10)中相應(yīng)的氨基酸。甚至更優(yōu)選的是，glp-1肽具有不超過5個(gè)的氨基酸，這些氨基酸不同于具有序列seq?id?no:1的glp-1(7-37)、glp-1(7-36)(seq?id?no:11)或具有序列seq?id?no:10的exendin-4中的相應(yīng)氨基酸。優(yōu)選地，glp-1肽具有不超過4個(gè)、3個(gè)或2個(gè)的氨基酸，這些氨基酸不同于glp-1(7-37)、glp-1(7-36)或exendin-4中的相應(yīng)氨基酸。在特定實(shí)施例中，作為融合蛋白一部分的glp-1肽具有選自由seq?id?nos:1和11-34組成的組的氨基酸序列。在一個(gè)實(shí)施例中，igd鉸鏈部分可以具有選自由seq?id?nos：35-38組成的組的氨基酸序列。

10、公開了以下示例性實(shí)施方式。

11、實(shí)施方式1.一種調(diào)節(jié)有需要的受試者的血糖水平的方法，包括向受試者施用有效量的融合肽，所述融合肽包含(a)胰高血糖素樣肽-1(glp-1)肽和(b)免疫球蛋白fc區(qū)，

12、其中，免疫球蛋白fc區(qū)(b)包含

13、(i)分離的igd鉸鏈區(qū)，其由來自seq?id?no:35的c端的35至49個(gè)連續(xù)氨基酸殘基組成：以及

14、(ii)免疫球蛋白fc多肽的ch2結(jié)構(gòu)域和ch3結(jié)構(gòu)域。

15、實(shí)施方式2.實(shí)施方式1所述的方法，其中，有效量為約0.01mg/kg至約1mg/kg體重。

16、實(shí)施方式3.前述實(shí)施方式中任一項(xiàng)所述的方法，其中，以一周或更長的間隔腸胃外施用所述融合肽。

17、實(shí)施方式4.前述實(shí)施方式中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述受試者患有糖尿病、葡萄糖耐受不良和/或胰島素抵抗。

18、實(shí)施方式5.前述實(shí)施方式中任一項(xiàng)所述的方法，其中，glp-1肽(a)包含選自由seqid?no:1和seq?id?nos：10到34組成的組的氨基酸序列。

19、實(shí)施方式6.前述實(shí)施方式中任一項(xiàng)所述的方法，其中，分離的igd鉸鏈區(qū)(i)包含氨基酸序列seq?id?no:36、37或38。

20、實(shí)施方式7.前述實(shí)施方式中任一項(xiàng)所述的方法，其中，免疫球蛋白fc區(qū)(b)包含選自由seq?id?nos：4到8組成的組的氨基酸序列。

21、實(shí)施方式8.前述實(shí)施方式中任一項(xiàng)所述的方法，其中，融合肽包含選自由seq?idnos：40到42或54組成的組的氨基酸序列。

22、實(shí)施方式9.前述實(shí)施方式中任一項(xiàng)所述的方法，其中，以一周的間隔或以每周一次的頻率以0.01mg/kg至0.2mg/kg的劑量施用所述融合肽。

23、實(shí)施方式10.前述實(shí)施方式中任一項(xiàng)所述的方法，其中，以兩周的間隔或每隔一周的頻率以0.2mg/kg至0.5mg/kg的劑量施用所述融合肽。

24、實(shí)施方式11.前述實(shí)施方式中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述受試者患有糖尿病。

25、實(shí)施方式12.前述實(shí)施方式中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述糖尿病為ii型糖尿病。

26、實(shí)施方式13.前述實(shí)施方式中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述融合肽為皮下施用。

27、實(shí)施方式14.前述實(shí)施方式中任一項(xiàng)所述的方法，其中，融合肽是包含通過硫鍵連接在一起的兩個(gè)肽的二聚體，其中，每個(gè)肽均包含序列號(hào)為seq?id?no:4、5、6、7或8的fc區(qū)(b)。

28、實(shí)施方式15.一種用于預(yù)防和/或治療有需要的受試者的糖尿病的方法，包括向受試者施用有效量的融合肽的步驟，所述融合肽包含(a)胰高血糖素樣肽-1(glp-1)肽和(b)免疫球蛋白fc區(qū)，

29、其中，免疫球蛋白fc區(qū)(b)包含

30、(i)分離的igd鉸鏈區(qū)，其由來自seq?id?no:35的c端的35至49個(gè)連續(xù)氨基酸殘基組成；以及

31、(ii)免疫球蛋白fc多肽的ch2結(jié)構(gòu)域和ch3結(jié)構(gòu)域。

32、實(shí)施方式16.實(shí)施方式15所述的方法，其中，有效量為約0.01mg/kg至約1mg/kg體重。

33、實(shí)施方式17.實(shí)施方式15-16中任一項(xiàng)所述的方法，其中，以一周或更長的間隔腸胃外施用所述融合肽。

34、實(shí)施方式18.實(shí)施方式15-17中任一項(xiàng)所述的方法，其中，以一周的間隔或以每周一次的頻率以0.01mg/kg至0.2mg/kg的劑量施用所述融合肽。

35、實(shí)施方式19.實(shí)施方式15-18中任一項(xiàng)所述的方法，其中，以兩周的間隔或每隔一周的頻率以0.2mg/kg至0.5mg/kg的劑量施用所述融合肽。

36、實(shí)施方式20.實(shí)施方式15-19中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述糖尿病為非胰島素依賴型糖尿病或胰島素依賴型糖尿病。

37、另一方面包括一種有效量的融合肽，該融合肽包含(a)胰高血糖素樣肽-1(glp-1)肽和(b)本文所述的免疫球蛋白fc區(qū)，用于調(diào)節(jié)血糖水平。

38、又一方面包括一種用于調(diào)節(jié)血糖水平的組合物，該組合物包含有效量的融合肽，該融合肽包含(a)胰高血糖素樣肽-1(glp-1)肽和(b)本文所述的免疫球蛋白fc區(qū)。

39、又一方面包括一種用于調(diào)節(jié)血糖水平的治療劑，該治療劑包含有效量的融合肽，該融合肽包含(a)胰高血糖素樣肽-1(glp-1)肽和(b)本文所述免疫球蛋白fc區(qū)。

40、另一方面包括一種用于調(diào)節(jié)血糖水平的有效量的融合肽的用途，該融合肽包含(a)胰高血糖素樣肽-1(glp-1)肽和(b)本文所述的免疫球蛋白fc區(qū)。

41、又一方面包括一種有效量的融合肽在制備用于調(diào)節(jié)血糖水平的藥物中的用途，該融合肽包含(a)胰高血糖素樣肽-1(glp-1)肽和(b)本文所述的免疫球蛋白fc區(qū)。

42、另一方面包括一種用于預(yù)防和/或治療糖尿病有效量的融合肽，該融合肽包含(a)胰高血糖素樣肽-1(glp-1)肽和(b)本文所述的免疫球蛋白fc區(qū)。

43、另一方面包括一種用于預(yù)防和/或治療糖尿病的組合物，該組合物包含有效量的融合肽，所述融合肽包含(a)胰高血糖素樣肽-1(glp-1)肽和(b)本文所述的免疫球蛋白fc區(qū)。

44、另一方面包括一種用于預(yù)防和/或治療糖尿病的治療劑，該治療劑包含有效量的融合肽，所述融合肽包含(a)胰高血糖素樣肽-1(glp-1)肽和(b)本文所述的免疫球蛋白fc區(qū)。

45、另一方面包括一種有效量的融合肽用于預(yù)防和/或治療糖尿病的用途，該融合肽包含(a)胰高血糖素樣肽-1(glp-1)肽和(b)本文所述的免疫球蛋白fc區(qū)。

46、另一方面包括一種有效量的融合肽在制備用于預(yù)防和/或治療糖尿病的藥物中的用途，所述融合肽包含(a)胰高血糖素樣肽-1(glp-1)肽和(b)本文所述的免疫球蛋白fc區(qū)。

47、發(fā)明的效果

48、公開了一種調(diào)節(jié)血糖水平和/或治療糖尿病的方法。該方法包括施用glp-1肽和fc區(qū)的融合肽的步驟。融合肽顯示出減少的如嘔吐、惡心和/或心率增加等副作用。