本發(fā)明涉及白靈菇分離純化，是一種白靈菇中生物堿類成分及其提取分離方法和應(yīng)用，tuoliensines?d是白靈菇中生物堿類成分的簡稱。

背景技術(shù)：

1、白靈菇（pleurotus?tuoliensis）屬于真菌門(enmycophyta)、擔(dān)子菌綱(basidiomycetes)、傘菌目(agaricales)、側(cè)耳科(pleurotaceae)、側(cè)耳屬(pleurotus)的高等真菌，其子實體一般較大，純白色，菌蓋直徑5cm至15cm或更大，厚3cm至4cm；初期近扁球形，多側(cè)生，有時偏生，表面近平滑或似絨狀，在我國僅產(chǎn)于新疆木壘、青河、托里、塔城、阿勒泰等氣候惡劣的沙漠戈壁里。相關(guān)的化學(xué)研究表明，多糖作為白靈菇主要活性成分研究較為廣泛，但對其他活性成分研究偏少，生物堿類成分作為白靈菇的主要功效成分之一，發(fā)現(xiàn)其具有抗胃癌，增強(qiáng)免疫力等多種功效。

2、惡性腫瘤嚴(yán)重威脅著人類的生命和健康，由于許多新型抗癌藥物價格昂貴，長期應(yīng)用容易引起耐藥性和副作用，使得尋找高效低毒的抗癌藥物成為腫瘤治療的關(guān)鍵。白靈菇作為藥食同源類真菌，其中含有多種活性強(qiáng)的生物堿類化合物。

3、因此，開發(fā)和利用白靈菇的生物堿類成分化合物，進(jìn)一步挖掘其潛在的藥用價值，并對其單體化合物的結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)進(jìn)行確定和表征，對白靈菇的開發(fā)利用具有重要意義。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供了一種白靈菇中生物堿類成分及其提取分離方法和應(yīng)用，克服了上述現(xiàn)有技術(shù)之不足，其首次公開了白靈菇中生物堿類成分，能夠作為制備預(yù)防胃癌或/和制備抗胃癌藥物的應(yīng)用。

2、本發(fā)明的技術(shù)方案之一是通過以下措施來實現(xiàn)的：一種白靈菇中生物堿類成分，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：

3、。

4、其中，tuoliensines?d是白靈菇中生物堿類成分的簡稱。

5、下面是對上述發(fā)明技術(shù)方案之一的進(jìn)一步優(yōu)化或/和改進(jìn)：

6、上述白靈菇中生物堿類成分，按照下述步驟得到：

7、第一步，將白靈菇子實體粉碎并加入乙醇，在室溫下浸泡3小時至4小時后，加熱回流提取3次，合并每次回流提取液并減壓回收、濃縮，得白靈菇浸膏；

8、第二步，將白靈菇浸膏用水分散，依次用石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯萃取，得到石油醚部位、二氯甲烷部位和乙酸乙酯部位浸膏；

9、第三步，取乙酸乙酯部位浸膏用硅膠柱色譜梯度洗脫分離后得到6個餾分，即fr1至fr6，其中，硅膠柱色譜梯度洗脫液包括石油醚和乙酸乙酯；

10、第四步，將得到的6個餾分中第3個餾分fr3再經(jīng)高效液相色譜梯度洗脫純化分離，并收集洗脫物，在第9.66分鐘處得到目標(biāo)產(chǎn)物白靈菇中生物堿類成分，其中，高效液相色譜洗脫液為甲醇和水的混合液。

11、上述第一步中，每1g白靈菇子實體加入8ml至12ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)95%的乙醇。

12、上述第一步中，加熱回流操作的溫度為50℃至60℃，每次回流時間為1小時至3小時。

13、上述第三步中，石油醚和乙酸乙酯的體積比依次為5:1、2:1、1.5:1、1:1、1:5、1:0。

14、上述第四步中，甲醇和水的體積比為15:85。

15、本發(fā)明的技術(shù)方案之二是通過以下措施來實現(xiàn)的：一種白靈菇中生物堿類成分的提取分離方法，按照下述步驟進(jìn)行：

16、第一步，將白靈菇子實體粉碎并加入乙醇，在室溫下浸泡3小時至4小時后，加熱回流提取3次，合并每次回流提取液并減壓回收、濃縮，得白靈菇浸膏；

17、第二步，將白靈菇浸膏用水分散，依次用石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯萃取，得到石油醚部位、二氯甲烷部位和乙酸乙酯部位浸膏；

18、第三步，取乙酸乙酯部位浸膏用硅膠柱色譜梯度洗脫分離后得到6個餾分，即fr1至fr6，其中，硅膠柱色譜梯度洗脫液包括石油醚和乙酸乙酯；

19、第四步，將得到的6個餾分中第3個餾分fr3再經(jīng)高效液相色譜梯度洗脫純化分離，并收集洗脫物，在第9.66分鐘處得到目標(biāo)產(chǎn)物白靈菇中生物堿類成分，其中，高效液相色譜洗脫液為甲醇和水的混合液。

20、本發(fā)明的技術(shù)方案之三是通過以下措施來實現(xiàn)的：一種白靈菇中生物堿類成分作為制備預(yù)防胃癌藥物的應(yīng)用。

21、本發(fā)明的技術(shù)方案之四是通過以下措施來實現(xiàn)的：一種白靈菇中生物堿類成分作為制備抗胃癌藥物的應(yīng)用。

22、本發(fā)明首次公開了白靈菇中生物堿類成分，并將該化合物進(jìn)行了hgc-27細(xì)胞（人胃癌細(xì)胞）細(xì)胞體外抗癌藥效學(xué)實驗，實驗明顯可以看出該化合物對hgc-27細(xì)胞具有較強(qiáng)的抑制作用，從而使該化合物能夠作為制備預(yù)防胃癌藥物或/和制備抗胃癌藥物的應(yīng)用。

技術(shù)特征：

1.一種白靈菇中生物堿類成分，其特征在于其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白靈菇中生物堿類成分，其特征在于按照下述步驟得到：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的白靈菇中生物堿類成分，其特征在于第一步中，每1g白靈菇子實體加入8ml至12ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)95%的乙醇。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的白靈菇中生物堿類成分，其特征在于第一步中，加熱回流操作的溫度為50℃至60℃，每次回流時間為1小時至3小時。

5.根據(jù)權(quán)利要求2或3或4所述的白靈菇中生物堿類成分，其特征在于第三步中，石油醚和乙酸乙酯的體積比依次為5:1、2:1、1.5:1、1:1、1:5、1:0。

6.根據(jù)權(quán)利要求2或3或4或5或6所述的白靈菇中生物堿類成分，其特征在于第四步中，甲醇和水的體積比為15:85。

7.一種根據(jù)權(quán)利要求1至6中任意一項所述的白靈菇中生物堿類成分的提取分離方法，其特征在于按照下述步驟進(jìn)行：

8.一種根據(jù)權(quán)利要求1至6中任意一項所述的白靈菇中生物堿類成分作為制備預(yù)防胃癌藥物的應(yīng)用。

9.一種根據(jù)權(quán)利要求1至6中任意一項所述的白靈菇中生物堿類成分作為制備抗胃癌藥物的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及白靈菇分離純化技術(shù)領(lǐng)域，是一種白靈菇中生物堿類成分及其提取分離方法和應(yīng)用，本發(fā)明中首次公開了白靈菇中生物堿類成分，本發(fā)明所述的白靈菇中生物堿類成分對人HGC?27（胃癌細(xì)胞）細(xì)胞具有一定的抑制作用，從而使白靈菇中生物堿類成分能夠作為制備預(yù)防胃癌藥物或/和制備抗胃癌藥物的應(yīng)用。

技術(shù)研發(fā)人員：劉剛,趙麗,帕提曼,劉勇,王凱
受保護(hù)的技術(shù)使用者：新疆天健生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/8