本發(fā)明屬于果汁制備，具體涉及一種固定化酶轉(zhuǎn)化棗中蔗糖為葡聚糖的方法及富含葡聚糖的棗汁和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、棗作為一種藥食同源的食物，具有很好的保健效果。棗中的蔗糖含量為15～66％，蔗糖由一分子葡萄糖和一分子果糖組成，是一種容易快速被利用的糖，過高的糖含量使不能被高血糖人群食用。葡聚糖是乳酸菌在生長(zhǎng)代謝過程中產(chǎn)生的一種胞外多糖，具有抗炎癥、抗腫瘤、調(diào)節(jié)腸道菌群以及免疫調(diào)節(jié)等一系列生物功能。目前缺少一種能夠有效將蔗糖轉(zhuǎn)化為葡聚糖的方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種固定化酶轉(zhuǎn)化棗中蔗糖為葡聚糖的方法及富含葡聚糖的棗汁和應(yīng)用。本發(fā)明所述方法能夠高效的將蔗糖轉(zhuǎn)化為葡聚糖，在降低容易利用糖的同時(shí)產(chǎn)生葡聚糖。

2、本發(fā)明提供了一種固定化酶轉(zhuǎn)化棗中蔗糖為葡聚糖的方法，包括以下步驟：

3、將固定化葡聚糖蔗糖酶與棗汁混合，進(jìn)行糖轉(zhuǎn)化，離心棄沉淀，得到富含葡聚糖的棗汁；編碼所述葡聚糖蔗糖酶的基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

4、優(yōu)選的是，所述糖轉(zhuǎn)化的溫度為30～35℃；所述糖轉(zhuǎn)化的時(shí)間為12～20h。

5、優(yōu)選的是，所述固定化葡聚糖蔗糖酶基于細(xì)菌增強(qiáng)基質(zhì)和乳酸乳球菌肽聚糖水解酶表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)、固定化獲得。

6、優(yōu)選的是，所述固定化葡聚糖蔗糖酶的方法包括以下步驟：

7、將編碼所述葡聚糖蔗糖酶的基因構(gòu)建到帶有乳酸乳球菌肽聚糖水解酶標(biāo)簽的質(zhì)粒中，得到重組質(zhì)粒；

8、將所述重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中，培養(yǎng)，誘導(dǎo)，收集菌體，超聲破碎，離心取上清，得到葡聚糖蔗糖酶粗酶液；

9、使用細(xì)菌增強(qiáng)基質(zhì)純化固定化酶的方法對(duì)得到的葡聚糖蔗糖酶粗酶液進(jìn)行固定化，得到固定化葡聚糖蔗糖酶。

10、優(yōu)選的是，所述質(zhì)粒包括pet-28a。

11、優(yōu)選的是，所述固定化的方法包括：將細(xì)菌增強(qiáng)基質(zhì)與所述葡聚糖蔗糖酶粗酶液混合，結(jié)合后離心取沉淀，洗滌。

12、優(yōu)選的是，所述結(jié)合的時(shí)間為30～60min；所述結(jié)合的溫度為0～4℃。

13、優(yōu)選的是，所述細(xì)菌增強(qiáng)基質(zhì)的制備用細(xì)菌包括乳酸乳球菌。

14、本發(fā)明還提供了上述技術(shù)方案所述方法制備得到的富含葡聚糖的棗汁。

15、本發(fā)明還提供了固定化葡聚糖蔗糖酶在提高棗汁中葡聚糖含量中的應(yīng)用，編碼所述葡聚糖蔗糖酶的基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

16、本發(fā)明提供了一種固定化酶轉(zhuǎn)化棗中蔗糖為葡聚糖的方法。本發(fā)明利用固定化酶將棗中蔗糖轉(zhuǎn)化為葡聚糖，能在降低蔗糖含量的同時(shí)提高益生元/膳食纖維葡聚糖的含量。

技術(shù)特征：

1.一種固定化酶轉(zhuǎn)化棗中蔗糖為葡聚糖的方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述糖轉(zhuǎn)化的溫度為30～35℃；所述糖轉(zhuǎn)化的時(shí)間為12～20h。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述固定化葡聚糖蔗糖酶基于細(xì)菌增強(qiáng)基質(zhì)和乳酸乳球菌肽聚糖水解酶表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)、固定化獲得。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述固定化葡聚糖蔗糖酶的方法包括以下步驟：

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述質(zhì)粒包括pet-28a。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述固定化的方法包括：將細(xì)菌增強(qiáng)基質(zhì)與所述葡聚糖蔗糖酶粗酶液混合，結(jié)合后離心取沉淀，洗滌。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述結(jié)合的時(shí)間為30～60min；所述結(jié)合的溫度為0～4℃。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述細(xì)菌增強(qiáng)基質(zhì)的制備用細(xì)菌包括乳酸乳球菌。

9.權(quán)利要求1～8任一項(xiàng)所述方法制備得到的富含葡聚糖的棗汁。

10.固定化葡聚糖蔗糖酶在提高棗汁中葡聚糖含量中的應(yīng)用，編碼所述葡聚糖蔗糖酶的基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種固定化酶轉(zhuǎn)化棗中蔗糖為葡聚糖的方法及富含葡聚糖的棗汁和應(yīng)用，具體屬于果汁制備技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明固定化酶轉(zhuǎn)化棗中蔗糖為葡聚糖的方法包括以下步驟：將固定化葡聚糖蔗糖酶與棗汁混合，進(jìn)行糖轉(zhuǎn)化，離心棄沉淀，得到富含葡聚糖的棗汁；編碼所述葡聚糖蔗糖酶的基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。本發(fā)明所述方法能夠高效的將蔗糖轉(zhuǎn)化為葡聚糖，在降低容易利用糖的同時(shí)產(chǎn)生葡聚糖。

技術(shù)研發(fā)人員：桑亞新,彭凱歌,趙芳坤,蒲元浩,孟慶泳
受保護(hù)的技術(shù)使用者：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/8