本發(fā)明屬于基因藥物，具體涉及一種抑制ets2表達(dá)的shrna干擾庫及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、非酒精性脂肪性肝病(nafld)是指除外長(zhǎng)期大量飲酒和其他明確的損肝因素所引起的,以甘油三酯為主的脂質(zhì)在肝細(xì)胞中蓄積為病理改變的肝臟代謝性疾病。nafld患者肝臟脂肪代謝功能出現(xiàn)障礙,使得大量脂肪類物質(zhì)蓄積于肝細(xì)胞(單純性脂肪肝),進(jìn)而導(dǎo)致肝細(xì)胞發(fā)生脂肪變性、肝細(xì)胞損傷、炎癥反應(yīng)、肝臟纖維化(非酒精性脂肪性肝炎,nash)。單純性脂肪肝是nafld的較為良性的階段,容易被逆轉(zhuǎn)。10％～20％的單純性脂肪肝可以進(jìn)展為nash。目前認(rèn)為nash是nafld進(jìn)展為肝硬化、肝細(xì)胞肝癌、肝衰竭等終末期肝病的重要環(huán)節(jié),在未來可能成為肝移植的首要原因。nafld不僅會(huì)影響患者的肝膽系統(tǒng),還與胰島素抵抗、血脂紊亂、動(dòng)脈粥樣硬化、脂肪栓塞、血液系統(tǒng)疾病等密切相關(guān),nafld被認(rèn)為是代謝綜合征的肝臟表現(xiàn)。nafld已成為目前臨床常見的肝病之一:流行病學(xué)調(diào)查表明,我國nafld發(fā)病率約為15％,而歐美地區(qū)nafld的發(fā)病率則在20％以上。因此,探尋nafld的有效療法具有非常重要的意義,而深入研究nafld的發(fā)病機(jī)制對(duì)于制定有效的nafld治療策略至關(guān)重要。

2、ets2是ets家族中的一種轉(zhuǎn)錄因子，主要位于細(xì)胞核內(nèi)，并以序列特異性的方式結(jié)合保守的dna結(jié)合位點(diǎn)(ggaa/t)，從而發(fā)揮調(diào)控作用。ets2的功能主要涉及干細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育，細(xì)胞衰老和死亡，腫瘤細(xì)胞發(fā)生發(fā)展以及血管再生。轉(zhuǎn)錄因子ets2通常激活與病原體和腫瘤防御相關(guān)的基因轉(zhuǎn)錄，主要通過它們對(duì)免疫細(xì)胞發(fā)育的控制來發(fā)揮作用。在以往的研究中，ets2常常參與腫瘤類疾病的發(fā)生發(fā)展過程，在全身幾乎各器官的腫瘤疾病中都高表達(dá)，在炎癥性疾病中也略有研究。此外，有許多研究也表明ets2調(diào)控組織損傷和病變中的細(xì)胞損傷，例如ets2可以促進(jìn)唐氏綜合征患者神經(jīng)元通過線粒體凋亡途徑死亡，也加速了心衰過程中的心肌細(xì)胞凋亡和自噬，還可以直接轉(zhuǎn)錄活化促凋亡蛋白bid等促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞死亡。ets2在糖尿病并發(fā)癥、組織炎癥介導(dǎo)的損傷、巨噬細(xì)胞引起的肝臟炎癥等發(fā)揮關(guān)鍵功能。這些研究均表明，ets2的異常表達(dá)和過度活化對(duì)多組織的慢性疾病發(fā)生具有促進(jìn)作用。但是，關(guān)于ets2作為脂肪肝治療靶點(diǎn)的研究仍然是空白。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明的目的是提供一種抑制ets2表達(dá)的shrna干擾庫及其應(yīng)用。

2、本發(fā)明的第一方面，提供了一種抑制ets2表達(dá)的shrna干擾庫，所述shrna干擾庫包括seq?id?no.1所示的shrna1、序列如seq?id?no.2所示的shrna2和序列如seq?id?no.3所示的shrna3中的一種或幾種。

3、在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述shrna干擾庫包括seq?id?no.1所示的shrna1、序列如seq?id?no.2所示的shrna2和序列如seq?id?no.3所示的shrna3。

4、本發(fā)明的第二方面，提供了一種上述的shrna干擾庫在制備抑制ets2表達(dá)的藥物中的應(yīng)用。

5、在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述藥物為抑制肝臟組織中的ets2表達(dá)的藥物。

6、本發(fā)明的第三方面，提供了一種上述的shrna干擾庫在制備治療肝臟疾病的藥物中的應(yīng)用。

7、在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述治療肝臟疾病的藥物為抑制肝臟脂質(zhì)積累的藥物。

8、在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述治療肝臟疾病的藥物為減緩肝臟損傷的藥物。

9、在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述藥物為減緩高脂飲食誘導(dǎo)的肝臟損傷的藥物。

10、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明通過研究發(fā)現(xiàn)ets2在非酒精性脂肪肝患者的肝臟組織中存在明顯的高表達(dá)，并且其高表達(dá)主要受飽和脂肪酸的刺激作用。經(jīng)小鼠試驗(yàn)證實(shí)，采用shrna干擾的方式特異性抑制肝臟中ets2基因的表達(dá)，可以明顯抑制高脂飲食誘導(dǎo)的肝臟損傷，小鼠的肝臟脂質(zhì)積累也得到明顯的改善，從而證明了干擾肝臟中ets2的表達(dá)可以抑制小鼠的脂質(zhì)積累，明顯減緩脂肪肝病人的肝臟損傷。

技術(shù)特征：

1.一種抑制ets2表達(dá)的shrna干擾庫，其特征在于，所述shrna干擾庫包括序列如seqid?no.1所示的shrna1、序列如seq?id?no.2所示的shrna2和序列如seq?id?no.3所示的shrna3中的一種或幾種。

2.如權(quán)利要求1所述的shrna干擾庫，其特征在于，所述shrna干擾庫包括seq?id?no.1所示的shrna1、序列如seq?id?no.2所示的shrna2和序列如seq?id?no.3所示的shrna3。

3.如權(quán)利要求1或2所述的shrna干擾庫在制備抑制ets2表達(dá)的藥物中的應(yīng)用。

4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物為抑制肝臟組織中的ets2表達(dá)的藥物。

5.如權(quán)利要求1或2所述的shrna干擾庫在制備治療肝臟疾病的藥物中的應(yīng)用。

6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述治療肝臟疾病的藥物為抑制肝臟脂質(zhì)積累的藥物。

7.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述治療肝臟疾病的藥物為減緩肝臟損傷的藥物。

8.如權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物為減緩高脂飲食誘導(dǎo)的肝臟損傷的藥物。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種抑制ETS2表達(dá)的shRNA干擾庫及其應(yīng)用，屬于基因藥物技術(shù)領(lǐng)域。該抑制ETS2表達(dá)的shRNA干擾庫包括SEQ?ID?NO.1所示序列shRNA1、SEQ?ID?NO.2所示序列shRNA2和SEQ?ID?NO.3所示序列shRNA3中的一種或幾種。采用shRNA干擾的方式特異性抑制肝臟中ETS2基因的表達(dá)，可以明顯抑制高脂飲食誘導(dǎo)的肝臟損傷，小鼠的肝臟脂質(zhì)積累也得到明顯的改善，從而證明了干擾肝臟中ETS2的表達(dá)可以抑制小鼠的脂質(zhì)積累，明顯減緩脂肪肝病人的肝臟損傷。

技術(shù)研發(fā)人員：趙健亞,萬春華,張偉良,李天豪
受保護(hù)的技術(shù)使用者：南通大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/8