本發(fā)明屬于醫(yī)藥領域，具體涉及一種ebv陽性免疫重建異種移植瘤模型的構建方法。

背景技術：

1、ebv相關胃癌的動物模型主要通過使用免疫缺陷小鼠(如nsg小鼠)皮下植入ebv陽性胃癌細胞株來構建，例如文獻《gastric?cancer,2021,24(5):1076-1088》中描述的方法，但這些模型存在顯著缺陷：首先，缺乏人類免疫系統(tǒng)的參與，無法模擬ebv在免疫重建和腫瘤微環(huán)境調控中的雙重功能；其次，難以全面揭示ebv通過調控免疫微環(huán)境促進腫瘤進展的機制；此外，現(xiàn)有模型應用范圍有限，無法用于評估結合免疫重建和腫瘤微環(huán)境調控的治療策略，且無法模擬臨床中復雜的免疫反應和腫瘤微環(huán)境變化，導致其預測臨床療效的能力受限。

2、本發(fā)明通過構建ebv陽性免疫重建異種移植瘤模型，有效彌補了這些缺陷，為ebv相關胃癌的研究和治療提供了更全面的工具和理論支持。

技術實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有問題的不足，本發(fā)明的目的是提供一種ebv陽性免疫重建異種移植瘤模型的構建方法。

2、本發(fā)明解決其技術問題采用的技術方案是：

3、第一方面，本發(fā)明保護一種ebv陽性免疫重建異種移植瘤模型的構建方法，所述方法包括如下步驟：取spf級雌性重度免疫缺陷小鼠，適應環(huán)境7±3天后尾靜脈注射人外周血單個核細胞(pbmc)，次日在小鼠右側腋下皮下移植人ebv陽性胃癌細胞系ags/ebv，即可。

4、在具體的實施方案中，適應環(huán)境時間為7±1天。

5、在具體的實施方案中，人外周血單個核細胞(pbmc)注射量和人ebv陽性胃癌細胞系ags/ebv移植量不做具體限制，根據(jù)實際需要選擇即可。

6、在更具體的實施方案中，人外周血單個核細胞(pbmc)注射量為3～10×10^6個，優(yōu)選5×10^6個。

7、在更具體的實施方案中，人ebv陽性胃癌細胞系ags/ebv移植量為3～10×10^6個，優(yōu)選5×10^6個。

8、在具體的實施方案中，所述spf級雌性重度聯(lián)合免疫缺陷小鼠為6～8周齡小鼠。

9、第二方面，本發(fā)明還保護前文所述的構建方法構建得到的ebv陽性免疫重建異種移植瘤模型。

10、有益效果

11、本發(fā)明提供的一種ebv陽性免疫重建異種移植瘤模型的構建方法，通過構建ebv陽性免疫重建異種移植瘤模型(pbmc+ags/ebv)，在ebv相關胃癌的研究中展現(xiàn)了顯著的優(yōu)勢和效果：

12、首先，本發(fā)明通過尾靜脈注射人類外周血單個核細胞，在重度免疫缺陷c-nkg小鼠中成功重建了人類免疫系統(tǒng)，能夠全面模擬ebv在免疫重建和腫瘤微環(huán)境調控中的雙重功能，突破了現(xiàn)有模型無法模擬人類免疫系統(tǒng)的局限。

13、其次，實驗數(shù)據(jù)顯示，現(xiàn)有ebv陽性胃癌模型通常需要30天甚至40天才能成瘤，而本發(fā)明模型僅需10-14天即可成瘤，顯著縮短了實驗周期，提高了研究效率。

14、此外，本發(fā)明首次證實ebv具有“免疫重建-腫瘤促進”雙重功能，不僅增強pbmc介導的免疫重建，還通過調控腫瘤微環(huán)境顯著加速胃癌進展，為ebv相關胃癌的機制研究提供了新視角。

15、同時，本發(fā)明模型能夠同時評估免疫重建和腫瘤進展，為開發(fā)結合免疫重建和腫瘤微環(huán)境調控的新型治療策略提供了實驗平臺。實驗數(shù)據(jù)表明，pbmc+ags/ebv組在10-14天內成功成瘤，腫瘤體積顯著大于其他組(p<0.05)，且免疫重建水平顯著提高(hcd45陽性細胞比例>40％)。

16、最后，本發(fā)明通過優(yōu)化實驗步驟和減少實驗周期，降低了實驗動物的使用量和實驗成本，更具環(huán)保性和經濟性。

17、綜上所述，本發(fā)明在模擬人類免疫系統(tǒng)、縮短成瘤時間、揭示ebv雙重功能以及支持治療策略開發(fā)等方面具有顯著優(yōu)勢，為ebv相關胃癌的研究和治療提供了高效、精準的工具和方法。

技術特征：

1.一種ebv陽性免疫重建異種移植瘤模型的構建方法，所述方法包括如下步驟：取spf級雌性重度免疫缺陷小鼠，適應環(huán)境7±3天后尾靜脈注射人外周血單個核細胞，次日在小鼠右側腋下皮下移植人ebv陽性胃癌細胞系ags/ebv，即可。

2.根據(jù)權利要求1所述的構建方法，其特征在于，適應環(huán)境時間為7±1天。

3.根據(jù)權利要求1所述的構建方法，其特征在于，人外周血單個核細胞注射量為3~10×10^6個。

4.根據(jù)權利要求3所述的構建方法，其特征在于，人外周血單個核細胞注射量為4~8×10^6個。

5.根據(jù)權利要求1所述的構建方法，其特征在于，人ebv陽性胃癌細胞系ags/ebv移植量為3~10×10^6個。

6.根據(jù)權利要求5所述的構建方法，其特征在于，人ebv陽性胃癌細胞系ags/ebv移植量為4~8×10^6個。

7.根據(jù)權利要求1所述的構建方法，其特征在于，所述spf級雌性重度免疫缺陷小鼠為6~8周齡小鼠。

8.權利要求1-7任一所述的構建方法構建得到的ebv陽性免疫重建異種移植瘤模型。

技術總結
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領域，具體涉及一種EBV陽性免疫重建異種移植瘤模型的構建方法；所述方法包括如下步驟：取SPF級雌性重度免疫缺陷小鼠，適應環(huán)境7±3天后尾靜脈注射人外周血單個核細胞，次日在小鼠右側腋下皮下移植人EBV陽性胃癌細胞系AGS/EBV。本發(fā)明提供的EBV陽性免疫重建異種移植瘤模型在模擬人類免疫系統(tǒng)、縮短成瘤時間、揭示EBV具有“免疫重建?促進腫瘤”雙重功能以及支持治療策略開發(fā)等方面具有顯著優(yōu)勢，為EBV相關胃癌的研究和治療提供了高效、精準的工具和方法。

技術研發(fā)人員：張杰,馮鋒,楊穎,趙雨,王文麗,胡小勤
受保護的技術使用者：中國藥科大學
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/5/8