專(zhuān)利名稱(chēng)：一種提取純化植物大分子活性成分的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種提取純化植物大分子活性成分的方法。
背景技術(shù)：
隨著植物化學(xué)研究的深入，植物大分子活性物質(zhì)越來(lái)越受到醫(yī)療保健界的關(guān)注。植物大分子包括蛋白質(zhì)、糖蛋白、糖肽、多糖、多肽、酶類(lèi)及多酚類(lèi)物質(zhì)。研究表明，植物大分子具有很強(qiáng)的生物活性，如免疫調(diào)節(jié)、抗癌、降血糖、降血脂、降血壓、抗氧化等功效。因此，在天然植物藥的研發(fā)生產(chǎn)中，對(duì)植物大分子的運(yùn)用越來(lái)越廣泛。在傳統(tǒng)針對(duì)植物大分子的制備方法包括水提醇沉法，有機(jī)溶劑法、樹(shù)脂吸附法等。但是，這些傳統(tǒng)方法都存在高溫、有機(jī)溶劑殘留以及強(qiáng)酸堿的問(wèn)題。這些因素都會(huì)影響植物大分子的結(jié)構(gòu)，尤其是當(dāng)破壞大分子三維立體結(jié)構(gòu)以后，其功效就會(huì)迅速喪失失活，從而影響產(chǎn)品功效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種可大幅度高產(chǎn)品的功效的提取純化植物大分子活性成分的方法。本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟(1)將植物藥材用水提取，得提取液；(2)提取液澄清過(guò)濾得清液；(3)清液進(jìn)行微孔膜精濾，得精濾液；(4)精濾液進(jìn)行活性分子純化截流，得大分子純化濃縮液；(5)純化濃縮液低溫干燥得到大分子活性成分。步驟(1)植物藥材包括枸杞、茶葉、青錢(qián)柳、麥冬、石斛或余甘子。步驟(1)所述的植物藥材用水提取為按植物藥材與水重量比1 16混合進(jìn)行攪拌提取，攪拌速度為20-30rpm。步驟⑵所述的澄清過(guò)濾為將提取液靜置12h，抽取上層清液在轉(zhuǎn)速為8000-10000rpm下進(jìn)行高速離心，得清液。步驟(3)所述的微孔膜的孔徑為0. 1-0. 2 μ m。步驟(4)所述的精濾液進(jìn)行活性分子純化截流是根據(jù)植物藥材大分子活性的分子量大小選擇與其分子量相匹配的膜進(jìn)行過(guò)濾。步驟(4)所述的純化濃縮液低溫干燥的溫度為35°C -40°C，干燥時(shí)間為8小時(shí)。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明采用水作為提取液，而且在低溫下進(jìn)行干燥，不會(huì)影響植物大分子的結(jié)構(gòu)，尤其是不會(huì)破壞大分子三維立體結(jié)構(gòu)，可以保持活性，從而大大提高了其功效。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。實(shí)施例1一種提取純化枸杞中大分子活性成分糖蛋白的方法，該方法包括以下步驟(1)將枸杞用水提取，得提取液；(2)提取液澄清過(guò)濾得清液；(3)清液用孔徑為0. 1-0. 2 μ m微孔膜進(jìn)行精濾，得精濾液；(4)由于枸杞糖蛋白的分子量大小在70k_80k范圍內(nèi)，因此選用分子量為50k和IOOk的超濾膜進(jìn)行分離純化得到枸杞糖蛋白純化濃縮液；(5)純化濃縮液低溫干燥得到枸杞糖蛋白。將本發(fā)明產(chǎn)品枸杞糖蛋白與市場(chǎng)上銷(xiāo)售的同類(lèi)產(chǎn)品進(jìn)行活性比較結(jié)果如下兩個(gè)劑量組即上述方法制得的枸杞糖蛋白5mg、市售枸杞糖蛋白500mg/kg. Bff0同時(shí)設(shè)空白對(duì)照組。采用SPF級(jí)昆明種小鼠，連續(xù)經(jīng)口灌胃給予，30天后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示本發(fā)明5mg劑量與市售500mg作用相當(dāng)，1)能明顯增強(qiáng)ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力；幻能明顯增強(qiáng)二硝基氟苯誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)；幻能明顯升高小鼠血清溶血素含量；4)能明顯增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞功能；5)能明顯增強(qiáng)小鼠碳廓清能力；6)能明顯增強(qiáng)抗體生成細(xì)胞能力。由此可見(jiàn)，本發(fā)明方法制得的枸杞糖蛋白可以明顯提高生物活性。實(shí)施例2一種提取純化茶葉中大分子活性成分茶多糖的方法，該方法包括以下步驟(1)將粗老茶用水提取，得提取液；(2)提取液澄清過(guò)濾得清液；(3)清液用孔徑為0. 1-0. 2 μ m微孔膜進(jìn)行精濾，得精濾液；(4)由于茶多糖的分子量大小在40k左右，因此選用分子量為30k和50k的超濾膜進(jìn)行分離純化得到茶多糖純化濃縮液；(5)純化濃縮液低溫干燥得到活性茶多糖。將本發(fā)明方法制得的活性茶多糖10mg/kg與市售同類(lèi)產(chǎn)品500mg/kg進(jìn)行降血糖活性比較
組別η空腹(Oh)0.5hIh2h曲線(xiàn)下面積模型對(duì)照組723.86土 4.62*44.64士 8.63*38.45 土 6.58*28.41 ±4.87*71.33 土 6.51*市售88.22 土 1.63**34.50土9.34*** 34.06+9.01*23.29 土 7.79*56.49 土 14.66***本發(fā)明產(chǎn)品87.14 士 1.05**20.73 土5.56*** 26.31 土4.96***19.32 土 5.26***41.54 土 8.91***正常對(duì)照組105.76 土 0.69**7.38 土 1.01**8.53 ±1.08**7.71 ±0.95**15.39+1.18**F值78.5537.7436.7418.3842.96P<0.0001<0.0001<0.0001<0.0001<0.0001
由此可見(jiàn)，本發(fā)明方法制得的茶多糖降血糖活性明顯大幅度提高。綜上所述本發(fā)明方法能夠更好的保留植物活性大分子的活性，使其產(chǎn)品功效更
顯著
權(quán)利要求
1.一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟(1)將植物藥材用水提取，得提取液；(2)提取液澄清過(guò)濾得清液；(3)清液進(jìn)行微孔膜精濾，得精濾液；(4)精濾液進(jìn)行活性分子純化截流，得大分子純化濃縮液；(5)純化濃縮液低溫干燥得到大分子活性成分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，步驟(1)植物藥材包括枸杞、茶葉、青錢(qián)柳、麥冬、石斛或余甘子。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，步驟(1)所述的植物藥材用水提取為按植物藥材與水重量比1 16混合進(jìn)行攪拌提取，攪拌速度為20-30rpm。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，步驟(2)所述的澄清過(guò)濾為將提取液靜置12h，抽取上層清液在轉(zhuǎn)速為8000-10000rpm下進(jìn)行高速離心，得清液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，步驟(3)所述的微孔膜的孔徑為0. 1-0. 2 μ m。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，步驟(4)所述的精濾液進(jìn)行活性分子純化截流是根據(jù)植物藥材大分子活性的分子量大小選擇與其分子量相匹配的膜進(jìn)行過(guò)濾。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，步驟(4)所述的純化濃縮液低溫干燥的溫度為35°C -40°C，干燥時(shí)間為8小時(shí)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種提取純化植物大分子活性成分的方法，該方法包括以下步驟(1)將植物藥材用水提取，得提取液；(2)提取液澄清過(guò)濾得清液；(3)清液進(jìn)行微孔膜精濾，得精濾液；(4)精濾液進(jìn)行活性分子純化截流，得大分子純化濃縮液；(5)純化濃縮液低溫干燥得到大分子活性成分。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有可大幅度高產(chǎn)品的功效等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C07K14/415GK102584968SQ201110458300
公開(kāi)日2012年7月18日 申請(qǐng)日期2011年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月31日
發(fā)明者許宏華, 韓超 申請(qǐng)人:上海善力健生物科技有限公司