本發(fā)明屬于天然成分提取制備，具體涉及美洲大蠊多肽的提取工藝及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、美洲大蠊(periplaneta?americana?l.)又名蜚蠊，作為藥用始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，是一種具有悠久藥用歷史的動物類中藥，傳統(tǒng)上被用于治療血瘀、癥堅寒熱等癥狀。美洲大蠊主要活性成分包括氨基酸、多肽、核苷、油脂等，具有抗炎、抗腫瘤、促進組織修復(fù)等多種藥理作用。其中多肽作為美洲大蠊中含量最高的活性成分，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、促進傷口愈合等功效。尤其在免疫調(diào)節(jié)方面，已有多方研究表明美洲大蠊水溶性多肽可增強荷瘤小鼠免疫力，改善免疫微環(huán)境。

2、目前美洲大蠊中活性成分的提取工藝有乙醇回流和加水煎煮等，但回流和煎煮均為加熱提取，多肽在提取過程長時間受熱可能會導(dǎo)致空間改變從而喪失活性。另外，美洲大蠊相較于其他昆蟲脂肪含量較高，現(xiàn)有除脂方法多以石油醚等有機溶劑浸漬除脂，但有機溶劑的使用可能會造成多肽空間結(jié)構(gòu)改變，導(dǎo)致活性降低，因此，有必要尋找一種適于美洲大蠊多肽的提取工藝，最大限度保留了多肽的活性。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術(shù)中的問題，本發(fā)明提出了美洲大蠊多肽的提取工藝及應(yīng)用，采用本發(fā)明，最大限度的保留了美洲大蠊多肽活性。

2、本發(fā)明所述的美洲大蠊多肽的提取工藝，其具體步驟為：美洲大蠊活蟲冷凍處死，勻漿，然后加入胰蛋白酶和蒸餾水，超聲酶解，靜置沉淀，抽濾，即得。

3、胰蛋白酶與美洲大蠊活蟲的配比(酶底比)為3000-10000u/g。

4、美洲大蠊活蟲與蒸餾水的料液比為1:10g/ml-1:40g/ml。

5、超聲酶解的溫度為37℃，時間為2-5h。

6、靜置沉淀的溫度為4℃。

7、本發(fā)明中，采用活蟲提取而非干燥后的粗粉提取，避免了干燥過程中對美洲大蠊多肽活性的影響，提取過程全程以水為溶劑且超聲酶解使用低溫，避免多肽受熱失活。超聲酶解，防止美洲大蠊粉沉積于底部，增加與酶的接觸面積。本發(fā)明通過低溫靜置后抽濾的方式可除去絕大部分脂肪，剩余部分脂肪以及小分子雜質(zhì)可進一步通過0.22μm微孔濾膜基本去除。

8、通過上述的提取工藝得到的美洲大蠊多肽對巨噬細胞無明顯毒性且可促進巨噬細胞的增殖和吞噬，美洲大蠊多肽可顯著提高小鼠免疫強度，給藥美洲大蠊多肽后小鼠免疫器官指數(shù)均有所提升，美洲大蠊多肽在體內(nèi)可提高小鼠免疫力，因此所述的美洲大蠊多肽可以應(yīng)用于制備免疫增強產(chǎn)品以及促進傷口愈合產(chǎn)品，尤其是用于制備術(shù)后免疫增強并促進手術(shù)創(chuàng)口愈合的產(chǎn)品。所述的產(chǎn)品為藥品或食品或保健食品或化妝品。

9、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

10、(1)本發(fā)明采用鮮蟲提取，冷凍處死，避免了干燥過程中對美洲大蠊多肽活性的影響。

11、(2)本發(fā)明全程使用水為溶劑，避免了有機溶劑對多肽活性的影響。

12、(3)超聲酶解低溫操作保證了多肽活性；低溫靜置后分離除去脂肪，保證最終產(chǎn)品的純凈程度。

13、(4)本發(fā)明所述的美洲大蠊多肽對巨噬細胞無明顯毒性且可促進巨噬細胞的增殖和吞噬，可顯著提高小鼠免疫強度，給藥美洲大蠊多肽后小鼠免疫器官指數(shù)均有所提升，美洲大蠊多肽在體內(nèi)可提高小鼠免疫力，為美洲大蠊多肽在食品和生物醫(yī)藥領(lǐng)域的進一步研究和發(fā)展提供參考。

技術(shù)特征：

1.美洲大蠊多肽的提取工藝，其特征在于，其具體步驟為：美洲大蠊活蟲冷凍處死，勻漿，然后加入胰蛋白酶和蒸餾水，超聲酶解，靜置沉淀，抽濾，即得。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的美洲大蠊多肽的提取工藝，其特征在于，胰蛋白酶與美洲大蠊活蟲的配比為3000-10000u/g。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的美洲大蠊多肽的提取工藝，其特征在于，美洲大蠊活蟲與蒸餾水的料液比為1:10g/ml-1:40g/ml。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的美洲大蠊多肽的提取工藝，其特征在于，超聲酶解的溫度為37℃，時間為2-5h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的美洲大蠊多肽的提取工藝，其特征在于，靜置沉淀的溫度為4℃。

6.美洲大蠊多肽，其特征在于，通過權(quán)利要求1～5任一項所述的提取工藝得到。

7.權(quán)利要求5所述的美洲大蠊多肽在制備免疫增強產(chǎn)品中的應(yīng)用。

8.權(quán)利要求5所述的美洲大蠊多肽在制備促進傷口愈合產(chǎn)品中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于天然成分提取制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及美洲大蠊多肽的提取工藝及應(yīng)用。本發(fā)明將美洲大蠊活蟲冷凍處死，勻漿，然后加入胰蛋白酶和蒸餾水，超聲酶解，靜置沉淀，抽濾，即得。采用本發(fā)明最大限度的保留了美洲大蠊多肽的活性以及純度。采用本發(fā)明獲得的美洲大蠊多肽對巨噬細胞無明顯毒性且可促進巨噬細胞的增殖和吞噬，可顯著提高小鼠免疫力，可應(yīng)用于免疫增強產(chǎn)品和促進傷口愈合產(chǎn)品的制備，為美洲大蠊多肽在食品和生物醫(yī)藥領(lǐng)域的進一步研究和發(fā)展提供參考。

技術(shù)研發(fā)人員：胡晶紅,郝金旺,吳建龍,王海榮
受保護的技術(shù)使用者：山東中醫(yī)藥大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/8