本發(fā)明涉及飼料添加劑領域，具體為一種預防病原性僵牛病、僵羊病的菌酶肽飼料添加劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、僵牛病、僵羊病是一種常見的牛羊類疾病，主要表現(xiàn)為生長發(fā)育遲緩、肌肉僵硬、行動困難等癥狀，嚴重影響了牛的健康和養(yǎng)殖經(jīng)濟效益。該病的發(fā)生與多種因素有關(guān)，包括營養(yǎng)不良、代謝紊亂、寄生蟲感染、慢性疾病以及飼養(yǎng)環(huán)境不良等。傳統(tǒng)的預防和治療方法主要依賴于改善飼料營養(yǎng)、驅(qū)蟲和藥物治療，但這些方法往往效果有限，且存在成本高、副作用大等問題。

2、近年來，隨著微生物學和酶工程技術(shù)的快速發(fā)展，菌酶肽飼料添加劑作為一種新型的功能性飼料添加劑，逐漸受到關(guān)注。菌酶肽飼料添加劑結(jié)合了益生菌、酶制劑和生物活性肽的多重功能，能夠通過改善牛羊的消化吸收、增強免疫力和調(diào)節(jié)代謝功能，有效預防僵牛病、僵羊病的發(fā)生。益生菌可以調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，抑制病原菌生長；酶制劑能夠分解飼料中的復雜營養(yǎng)物質(zhì)，提高飼料利用率；生物活性肽則具有增強免疫力、促進生長和抗氧化的作用。

3、然而，現(xiàn)有的菌酶肽飼料添加劑在實際應用中仍存在一些問題，首先，產(chǎn)品穩(wěn)定性較差：菌酶肽飼料添加劑中的益生菌、酶制劑和活性肽在儲存和運輸過程中容易失活，尤其是在高溫、高濕或長時間儲存條件下。其次，生產(chǎn)成本較高：菌酶肽飼料添加劑的制備工藝復雜，培養(yǎng)基和原料成本高，導致產(chǎn)品價格昂貴。最后，針對性和靶向性不足：僵牛病、僵羊病的病因復雜，涉及營養(yǎng)、代謝、環(huán)境等多方面因素，現(xiàn)有添加劑多側(cè)重于改善消化或增強免疫力，但對病原性僵牛病、僵羊病的影響靶向效果有限。因此，如何提高預防僵牛病、僵羊病的菌酶肽飼料的穩(wěn)定性、降低成本、增強對病原性僵牛病的預防就成了主要研究方向。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，本發(fā)明提供了一種預防病原性僵牛病、僵羊病的菌酶肽飼料添加劑及其制備方法，旨在通過優(yōu)化菌種組合、酶制劑配方和活性肽制備工藝，開發(fā)一種針對病原性僵牛病、僵羊病的菌酶肽飼料添加劑，以提高其穩(wěn)定性、降低生產(chǎn)成本，并增強其預防病原性僵牛病、僵羊病的效果。通過利用農(nóng)業(yè)副產(chǎn)品作為原料，結(jié)合先進的發(fā)酵和酶解技術(shù)，本專利不僅能夠有效預防僵牛病、僵羊病，還能促進資源的循環(huán)利用，推動綠色養(yǎng)殖的發(fā)展。

2、一種預防病原性僵牛病、僵羊病的菌酶肽飼料添加劑的制備方法，包括以下步驟：

3、（1）預處理：將原料粉碎至粒度為1-2mm的顆粒狀，將粉碎后的原料加入0.5-1wt%的鹽酸水溶液中，在溫度為90-100℃下進行酸處理，反應時間為1-2小時；然后將酸處理后的原料用水洗滌至中性，并加入1-2?wt?%的氫氧化鈉水溶液，在75-85℃下處理1-2小時，用水洗滌至中性，干燥后得到預酶解原料；

4、（2）將步驟（1）得到的預酶解原料、珊瑚粘液加入到復合酶酶解液中，在50-60℃下酶解反應4-6小時，過濾去除固體殘渣，得到酶解液；

5、（3）向步驟（2）得到的酶解液中接種復合發(fā)酵菌，接種量為5-10wt%，在30-37℃、4.5-5.5的ph條件下發(fā)酵24-48小時，發(fā)酵過程中以800-1000r/min轉(zhuǎn)速攪拌，并通氧保持溶氧量在60-80%，發(fā)酵結(jié)束后以800-1200r/min轉(zhuǎn)速離心4-6min，得到發(fā)酵液；

6、（4）對步驟（3）得到的發(fā)酵液進行噴霧干燥，溫度為60-80℃，得到所述預防病原性僵牛病、僵羊病的菌酶肽飼料添加劑。

7、步驟（1）所述原料為豆粕、玉米秸稈、麥麩和米糠、菜籽粕中的至少一種；優(yōu)選地，所述原料由豆粕、玉米秸稈、麥麩、菜籽粕按質(zhì)量比（1-2）：（3-4）：（2-3）：（1-2）混合而成。

8、步驟（1）所述鹽酸水溶液和原料的質(zhì)量比為（1-10）：1，氫氧化鈉水溶液和原料的質(zhì)量比為（1-10）：1。

9、步驟（2）所述預酶解原料、珊瑚粘液、復合酶酶解液的質(zhì)量比為1：（0.1-0.4）：（1-2）。

10、步驟（2）所述復合酶酶解液中的酶為胰蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶中的至少一種；優(yōu)選地，所述復合酶酶解液中的酶由胰蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶混合而成，其中胰蛋白酶的濃度為0.5-1wt%，淀粉酶的濃度為0.5-1wt%，纖維素酶的濃度為1-2wt%，余量為水。

11、步驟（3）所述復合發(fā)酵菌為嗜熱鏈球菌、黑曲霉、枯草芽孢桿菌中的至少一種；優(yōu)選地，所述復合發(fā)酵菌由嗜熱鏈球菌、黑曲霉、枯草芽孢桿菌按質(zhì)量比（1-2）：（1-2）：2混合而成。

12、豆粕富含植物蛋白，可通過酶解或發(fā)酵制備生物活性肽。

13、玉米秸稈富含纖維素，可作為益生菌的發(fā)酵底物。

14、麥麩富含膳食纖維和少量蛋白質(zhì)，可用于益生菌培養(yǎng)或酶解制備功能性肽。

15、菜籽粕含有豐富的蛋白質(zhì)，是提取肽類的重要來源。

16、本發(fā)明以豆粕、玉米秸稈、麥麩、菜籽粕為原料，將多種農(nóng)業(yè)副產(chǎn)品混合使用，優(yōu)化發(fā)酵底物的營養(yǎng)成分，同時，還促進資源循環(huán)利用，推動綠色農(nóng)業(yè)發(fā)展。

17、本發(fā)明采用粉碎、酸、堿對原料進行預處理，得到預酶解原料；將得到的預酶解原料、珊瑚粘液混合，用復合酶酶解，得到酶解液；接著向酶解液中接種復合發(fā)酵菌發(fā)酵，得到發(fā)酵液；最后對發(fā)酵液進行噴霧干燥，得到所述預防病原性僵牛病、僵羊病的菌酶肽飼料添加劑。

18、首先，通過酸堿蒸煮處理，可以去除部分抗營養(yǎng)因子（如植物中的天然抑制因子、抗氧化物質(zhì)等），破壞植物細胞壁，釋放出更多的可溶性蛋白質(zhì)和多糖成分，為后續(xù)酶解提供更好的底物，為后續(xù)發(fā)酵提供合適的環(huán)境。

19、使用具有廣譜酶解能力的酶（如胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶等）能夠?qū)⒃现械拇蠓肿拥鞍踪|(zhì)降解為小肽段或氨基酸，小肽段具有一定的抗菌或免疫調(diào)節(jié)作用，增強動物的抗病能力，間接減少病原菌感染的風險。

20、由于牛的主食含有大量植物原料，而植物原料中的纖維素和半纖維素提供了病原菌（如大腸桿菌、沙門氏菌、布魯氏菌）合適的環(huán)境。在酶解過程中，使用纖維素酶可有效降解植物纖維，增加其營養(yǎng)物質(zhì)的釋放，同時也能改變腸道內(nèi)的環(huán)境，從而間接影響病原菌的生長。

21、淀粉酶可以降解植物中的淀粉成分，釋放出單糖或寡糖，促進營養(yǎng)利用。淀粉降解過程中產(chǎn)生的小分子糖類也能為發(fā)酵提供底物，促進有益菌的生長和繁殖。

22、根據(jù)目標原料的不同，選擇合適的酶組成種類，優(yōu)化酶解配方，在提高發(fā)酵效率的同時能夠進一步增強發(fā)酵產(chǎn)物對病原性僵牛病的針對性。

23、嗜熱鏈球菌具有廣譜抗菌能力，能夠通過產(chǎn)生乳酸降低環(huán)境ph，抑制厭氧病原菌的生長。此外，嗜熱鏈球菌還可以促進腸道健康，增強免疫系統(tǒng)，從而提高抗病能力。

24、黑曲霉菌能分泌多種類型的酶，尤其是纖維素酶、淀粉酶、蛋白酶等。這些酶在消化和分解復雜的有機物質(zhì)（如植物殘渣）方面表現(xiàn)出色，從而能提高飼料的消化利用率。此外，黑曲霉菌能夠在發(fā)酵過程中分泌更多種類的酶，有助于分解植物來源的原料（如豆粕、玉米秸稈、菜籽粕等）中的纖維素、淀粉和蛋白質(zhì)，釋放更多的營養(yǎng)成分，有助于改善飼料的品質(zhì)，間接起到預防僵牛病、僵羊病的作用。

25、枯草芽孢桿菌在飼料中廣泛應用，具有抗菌活性?？莶菅挎邨U菌可以通過分泌抗菌肽抑制厭氧細菌的生長。通過優(yōu)化發(fā)酵條件，可以提高芽孢桿菌在發(fā)酵過程中的活性，并增強其抗病效果。

26、通過聯(lián)合使用嗜熱鏈球菌、黑曲霉和芽孢桿菌，可以實現(xiàn)互補的作用，利用各自產(chǎn)生的有益物質(zhì)（如乳酸、抗菌肽、乙醇等）協(xié)同抑制病原菌，在發(fā)酵過程中協(xié)同作用，產(chǎn)生更多樣的活性物質(zhì)，增強菌酶肽的功能多樣性。

27、珊瑚粘液中也含有一些抗氧化成分，這些成分可以在噴霧干燥過程中幫助抵抗氧化，保護酶和肽的活性。

28、珊瑚粘液作為天然的多糖和蛋白質(zhì)來源，可能具有提高酶菌肽穩(wěn)定性的作用，尤其是在噴霧干燥過程中幫助保護膜，防止酶和肽的活性丟失。另外，珊瑚粘液在酶解和發(fā)酵過程中也可能通過提供營養(yǎng)和促進微生物生長，從而提高酶菌肽的產(chǎn)量和質(zhì)量。

29、在酶解步驟中加入珊瑚粘液，由于珊瑚粘液含有多糖和蛋白質(zhì)等成分，加入珊瑚粘液可能為酶解反應提供一些額外的糖源，有助于提高酶的效率。珊瑚液中的蛋白質(zhì)和糖類成分也能夠促進嗜熱鏈球菌、黑曲霉、芽孢桿菌等的生長，從而提高酶菌肽的產(chǎn)量。另外，珊瑚粘液中的抗氧化成分可能有助于維持發(fā)酵體系的穩(wěn)定性，減少環(huán)境中的氧化對微生物和肽的負面影響。珊瑚粘液中的糖類成分可能在噴霧干燥過程中形成一層保護膜，此保護膜可以防止水分的過快蒸發(fā)，減少酶和肽類物質(zhì)在干燥過程中的失活。另外，粘液中的蛋白質(zhì)可能與酶肽發(fā)生反應，形成穩(wěn)定的復合物，從而避免酶肽的變性或降解。

30、本發(fā)明有益效果：

31、本發(fā)明以豆粕、玉米秸稈、麥麩、菜籽粕為原料，采用粉碎、酸、堿進行預處理，用復合酶酶解、復合發(fā)酵菌發(fā)酵，噴霧干燥，得到所述預防病原性僵牛病、僵羊病的菌酶肽飼料添加劑，并加入珊瑚粘液進行協(xié)同酶解、發(fā)酵，得到了一種穩(wěn)定性高、對病原性僵牛病預防效果好、成本較低的預防病原性僵牛病、僵羊病的菌酶肽飼料添加劑。