本申請(qǐng)涉及聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，具體涉及一種反應(yīng)管。

背景技術(shù)：

1、在生物技術(shù)領(lǐng)域中，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase?chain?reaction，簡(jiǎn)稱(chēng)：pcr)已成為一項(xiàng)擴(kuò)增特定核酸序列的成熟技術(shù)，此反應(yīng)過(guò)程涉及三個(gè)主要步驟：變性、退火、延伸，其各需不同的反應(yīng)溫度。變性的溫度典型地為介于90至97℃之間；退火的溫度為依據(jù)所用引物的解鏈溫度而選擇，典型地為介于50℃至65℃之間；延伸反應(yīng)的典型溫度為72℃。pcr反應(yīng)是核酸擴(kuò)增的常用技術(shù)，廣泛用于病原體、傳染病、遺傳病的檢測(cè)。

2、pcr反應(yīng)通常由以下組分構(gòu)成：反應(yīng)緩沖液(含dntp、鎂離子、緩沖鹽)，酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、taq酶、udg酶、rna酶抑制劑等組成)，引物探針，樣品溶液等等。

3、在實(shí)際應(yīng)用階段，通常需要操作人員人工將以上部分組分快速加入至pcr管，從而完成反應(yīng)。尤其是在高通量測(cè)試中，這個(gè)組分配置、分裝過(guò)程工作量巨大，反應(yīng)體系也非常容易被污染，每一批每一管反應(yīng)體系之間也容易產(chǎn)生誤差。而且對(duì)酶的分裝與加樣對(duì)操作人員的技術(shù)素養(yǎng)有一定要求，否則容易對(duì)酶造成破壞和污染；而酶的成本也較高。

4、專(zhuān)利cn210458197u公開(kāi)了一種通過(guò)單通道可同時(shí)檢測(cè)八種手足口病毒的檢測(cè)試劑盒，試劑盒中設(shè)有凍干試劑層。其中，凍干試劑包括逆轉(zhuǎn)錄酶、dna聚合酶、pcr緩沖液、mg2+、dntp、手足口病相關(guān)病毒的特異性引物和探針以及凍干保護(hù)劑。但是，這種混合式預(yù)存結(jié)構(gòu)在長(zhǎng)期存儲(chǔ)、運(yùn)輸過(guò)程難以保證各組分之間的穩(wěn)定性，同時(shí)其對(duì)于預(yù)存技術(shù)(如凍干技術(shù))要求也更高。

5、因此，當(dāng)前亟需一種能夠簡(jiǎn)化操作人員的手動(dòng)操作，且提升試劑存放穩(wěn)定性的pcr反應(yīng)方案。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本實(shí)用新型的目的在于提供一種反應(yīng)管，部分地解決或緩解現(xiàn)有技術(shù)中的上述不足，通過(guò)獨(dú)立分裝設(shè)計(jì)能夠?qū)Ω麝P(guān)鍵組分(如凍干球、緩沖液)進(jìn)行穩(wěn)定保存，進(jìn)而簡(jiǎn)化pcr試驗(yàn)時(shí)的操作步驟，如僅需直接向預(yù)存有凍干球、緩沖液的反應(yīng)管中加入樣本液體(如核酸)，即能夠快速啟動(dòng)pcr反應(yīng)。

2、為了解決上述所提到的技術(shù)問(wèn)題，本實(shí)用新型具體采用以下技術(shù)方案：

3、一種反應(yīng)管，包括：

4、管體，所述管體沿其第一端至第二端方向依次形成有第一容納空間和第二容納空間，所述第一容納空間內(nèi)存儲(chǔ)有緩沖液，且所述第一容納空間內(nèi)還設(shè)置有至少一個(gè)磁性元件，所述磁性元件能夠在磁力作用下在所述管體內(nèi)進(jìn)行移動(dòng)；所述第一容納空間內(nèi)還設(shè)置有密封層，所述密封層用于對(duì)所述緩沖液進(jìn)行密封，并將所述磁性元件限位在所述緩沖液中；

5、所述第二容納空間的第一端設(shè)置有開(kāi)口，且所述開(kāi)口第一端處的第一內(nèi)徑小于所述開(kāi)口第二端處的第二內(nèi)徑，所述開(kāi)口的第二端為加樣口，所述開(kāi)口內(nèi)設(shè)置有凍干球，所述凍干球的直徑大于所述第一內(nèi)徑。

6、在一些實(shí)施例中，所述磁性元件在作用面上的投影圖形的直徑為所述管體的直徑的30％-90％；其中，所述作用面指的是與所述管體的軸線(xiàn)相垂直或近似垂直的平面。

7、在一些實(shí)施例中，所述磁性元件為磁性鐵塊。

8、在一些實(shí)施例中，所述磁性元件呈鏤空結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，其中，所述磁性元件上分布有貫穿所述磁性元件的多個(gè)網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)。

9、在一些實(shí)施例中，至少一個(gè)所述網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)上修飾有結(jié)合基團(tuán)，所述結(jié)合基團(tuán)用于與所述凍干球中的酶進(jìn)行結(jié)合。

10、在一些實(shí)施例中，所述凍干球僅包含酶和賦形劑，不含緩沖液的成分。酶的形態(tài)可以是單獨(dú)的酶，也可以是與磁性微球連接的復(fù)合物形態(tài)，具體是對(duì)磁性微球進(jìn)行表面修飾(如羧基)之后，再與酶進(jìn)行偶聯(lián)。

11、在一些實(shí)施例中，所述凍干球的直徑大約為2-5mm，且凍干球的直徑大于管體的直徑。

12、在一些實(shí)施例中，所述管體為毛細(xì)管，直徑大約為1-4mm。

13、在一些實(shí)施例中，所述密封層為石蠟。

14、在一些實(shí)施例中，所述開(kāi)口沿其第一端至第二端的方向內(nèi)徑逐漸增大。

15、有益技術(shù)效果：

16、本實(shí)用新型提供了一種能對(duì)酶、緩沖液進(jìn)行獨(dú)立分裝的pcr反應(yīng)管，其分裝方案與分裝結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)能夠保證各組分在保存過(guò)程中的穩(wěn)定性。同時(shí)，磁性元件的設(shè)計(jì)能夠促使管內(nèi)組分在反應(yīng)過(guò)程中快速混勻，節(jié)省反應(yīng)時(shí)間。進(jìn)一步地，本實(shí)用新型針對(duì)上述分裝方案還提出了一種網(wǎng)格狀設(shè)計(jì)的磁性元件，其中鏤空設(shè)計(jì)一方面便于液體的通過(guò)，同時(shí)其與修飾有結(jié)合基團(tuán)(如羧基)的磁鐵珠進(jìn)行吸附結(jié)合，還有利于實(shí)現(xiàn)酶的局部富集，進(jìn)而有助于提升pcr反應(yīng)的效率。

技術(shù)特征：

1.一種反應(yīng)管，其特征在于，包括：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的反應(yīng)管，其特征在于，所述磁性元件(13)在作用面上的投影圖形的直徑為所述管體(10)的直徑的30％-90％；其中，所述作用面指的是與所述管體(10)的軸線(xiàn)相垂直或近似垂直的平面。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的反應(yīng)管，其特征在于，所述磁性元件為磁性鐵塊。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的反應(yīng)管，其特征在于，所述磁性元件呈鏤空結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，其中，所述磁性元件上分布有貫穿所述磁性元件的多個(gè)網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)；當(dāng)所述反應(yīng)管內(nèi)的所述凍干球和所述緩沖液進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)時(shí)，至少一個(gè)所述網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)能夠用于容納對(duì)應(yīng)的混合液體，并形成局部的超高濃度反應(yīng)區(qū)。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的反應(yīng)管，其特征在于，至少一個(gè)所述網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)上修飾有結(jié)合基團(tuán)，所述結(jié)合基團(tuán)用于與所述凍干球中的酶進(jìn)行結(jié)合。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的反應(yīng)管，其特征在于，所述凍干球包括：磁性顆粒，所述磁性顆粒的外周覆蓋有酶。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的反應(yīng)管，其特征在于，所述凍干球的直徑為2-5mm。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的反應(yīng)管，其特征在于，所述管體為毛細(xì)管。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的反應(yīng)管，其特征在于，所述密封層為石蠟。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任意一項(xiàng)所述的反應(yīng)管，其特征在于，所述開(kāi)口沿其第一端至第二端的方向內(nèi)徑逐漸增大。

技術(shù)總結(jié)
本申請(qǐng)涉及PCR反應(yīng)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種反應(yīng)管，包括：管體，所述管體內(nèi)依次預(yù)存有緩沖液、凍干球，且緩沖液上方設(shè)置有石蠟用于密封，緩沖液內(nèi)存儲(chǔ)有活動(dòng)塊。本申請(qǐng)所提出的反應(yīng)管能夠?qū)龈汕蚝途彌_液進(jìn)行預(yù)存分裝，簡(jiǎn)化后續(xù)的試驗(yàn)操作。

技術(shù)研發(fā)人員：薛威,林炳生,陳廷友,張秀杰
受保護(hù)的技術(shù)使用者：北京英諾特生物技術(shù)股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：20240621
技術(shù)公布日：2025/5/8