本發(fā)明涉及一種具有抗缺氧作用的香菇源多酚組合物的制備方法及應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、缺氧是指氧供應(yīng)不足或氧利用障礙時(shí)導(dǎo)致的機(jī)體代謝異常及損傷的病理性過程,高海拔地區(qū)低壓、低氧及高輻射等惡劣環(huán)境會(huì)對(duì)導(dǎo)致急進(jìn)高原人員代謝平衡失調(diào),影響機(jī)體功能,引起重要器官缺氧,從而造成機(jī)體損傷,使得大部分進(jìn)入高原的人群無法適應(yīng),從而導(dǎo)致一系列高原疾病的發(fā)生。
2、香菇(lentinus?edodes)具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤、抗高血糖、抗骨質(zhì)疏松、抗酪氨酸酶甚至抗菌應(yīng)用,香菇子實(shí)體在特殊環(huán)境下產(chǎn)生的一種優(yōu)等菇稱為花菇,它是香菇在生產(chǎn)過程中通過控制溫度、濕度、光照和通風(fēng)等自然條件,人為改變香菇的正常生長(zhǎng)發(fā)育,使菌蓋形成褐白相間的花紋,因而形成花菇。開發(fā)香菇抗缺氧功能,目前主要研究的是香菇全粉、香菇多糖,現(xiàn)有技術(shù)中尚未有研究香菇多酚提取物的抗缺氧活性,更沒有對(duì)花菇多酚提取物中缺氧損傷防護(hù)的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用進(jìn)行系統(tǒng)研究。
3、新興的綠色溶劑如低共熔溶劑因其成本低、易于制造、可生物降解和對(duì)環(huán)境影響小而在提取生物活性分子化合物方面受到重視。低共熔溶劑(des)是由兩種或兩種以上組分組成的液-液態(tài)體系,它們可以作為氫鍵供體或受體。超聲波協(xié)同低共熔溶劑法可以作為一種有效提取化合物的復(fù)合手段,目前主要用于提取香菇多糖、甾醇。
4、鑒于此,特提出本發(fā)明。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、基于以上背景技術(shù),本發(fā)明提供一種具有抗缺氧作用的香菇多酚提取物的制備方法及應(yīng)用。
2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采取以下技術(shù)方案:
3、第一方面,一種香菇多酚提取物的制備方法,包括以下步驟:
4、步驟一,通過超聲波協(xié)同低共熔溶劑法制備香菇多酚粗提物,提取在超聲下進(jìn)行,所用低共熔溶劑含氯化膽堿:乙二醇摩爾比=1:2的des溶劑,優(yōu)選由氯化膽堿和乙二醇組成(簡(jiǎn)稱氯化膽堿-乙二醇des溶劑);提取使用的可為低共熔溶劑的水溶液,水溶液中水的質(zhì)量分?jǐn)?shù)可為30-50%,如40%。
5、可選地,步驟一提取時(shí)的料液比為1:30-40。料液比是本領(lǐng)域常用詞,表示原料質(zhì)量與其提取液的體積比,單位為g:ml。
6、優(yōu)選的,步驟一提取的溫度為40-60℃,如為50℃;獨(dú)立可選地,所述提取的時(shí)間為30-50min,如為40min。
7、優(yōu)選的,超聲功率為220-260w,如為40w;獨(dú)立可選地,超聲頻率為30-50kw,如為40kw。
8、優(yōu)選的,所述提取后經(jīng)離心,保留上清為香菇多酚粗提物;離心速度可為2500-3500rpm,如為3000rpm;獨(dú)立可選地,離心時(shí)間為5-15min,如為10min。
9、可選地,所述制備方法還包括步驟二:而后利用大孔吸附樹脂作為分離介質(zhì)進(jìn)行所述粗提物的純化,相應(yīng)得到香菇多酚純化物bfmps-des。
10、優(yōu)選的,步驟二中,通過乙醇洗脫所述大孔吸附樹脂吸附的香菇多酚提取物,而后相應(yīng)得到香菇多酚純化物bfmps-des。
11、可選地,所用香菇原料為花菇;獨(dú)立可選地,提取的部位為香菇子實(shí)體。
12、優(yōu)選的,步驟二中,純化所用的大孔吸附樹脂類型為dm301。
13、第二方面,本發(fā)明提供了根據(jù)前一方面方法制得的香菇提取物。
14、第三方面,本發(fā)明提供了基于所述香菇提取物的功能產(chǎn)品,如藥品組合物。
15、第四方面,本發(fā)明提供了第二、三方面所得組合物抗缺氧,如預(yù)防或治療缺氧損傷,抗缺氧活性所用的細(xì)胞模型可為cocl2誘導(dǎo)的pc12細(xì)胞損傷模型,所用的動(dòng)物模型可為常壓缺氧動(dòng)物模型。
16、與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果是:
17、本發(fā)明首次通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證香菇源多酚提取物具有顯著的抗缺氧作用,并發(fā)現(xiàn),低共熔溶劑法提取的多酚組合物,抗缺氧活性優(yōu)于醇提法。
1.制備香菇提取物的方法,包括以下步驟:
2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征是,低共熔溶劑由氯化膽堿和乙二醇組成,步驟一提取使用的可為低共熔溶劑的水溶液,水溶液中水的質(zhì)量分?jǐn)?shù)可為30-50%,如40%;獨(dú)立可選地,步驟一提取時(shí)的料液比為1:30-40。
3.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征是,步驟一提取的溫度為40-60℃,如為50℃;獨(dú)立可選地,所述提取的時(shí)間為30-50分,如為40分。
4.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征是,超聲功率為220-260?w,如為40?w;獨(dú)立可選地,超聲頻率為30-50kw,如為40kw。
5.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征是,所述提取后經(jīng)離心,保留上清為香菇多酚粗提物;離心速度可為2500-3500rpm,如為3000rpm;獨(dú)立可選地,離心時(shí)間為5-15分,如為10分。
6.如任一在先權(quán)利要求所述的方法,其特征是,該方法還包括步驟二:用大孔吸附樹脂純化步驟一所得香菇多酚提取物,大孔吸附樹脂可為dm301。
7.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征是,被提取的香菇為花菇;獨(dú)立可選地,提取的部位為香菇的子實(shí)體。
8.任一在先權(quán)利要求所述方法制備的香菇提取物。
9.包含前一權(quán)利要求所述香菇提取物的功能產(chǎn)品。
10.前一權(quán)利要求所述香菇提取物或功能產(chǎn)品用于制備抗缺氧產(chǎn)品的應(yīng)用。