1.一種用于促進(jìn)毛發(fā)生長干細(xì)胞提取物組合物的制備方法,其特征在于,向dmem培養(yǎng)基中加入胎牛血清、地塞米松、青霉素、鏈霉素、白細(xì)胞介素-2、磁性復(fù)合顆粒,制備得到培養(yǎng)基,用于體外培養(yǎng)干細(xì)胞,培養(yǎng)時采用低頻磁場結(jié)合低能量激光培養(yǎng),制得干細(xì)胞溶液,并從提取液中提取外泌體,與干細(xì)胞混合包埋,制得包埋微球,與從生姜、人參、何首烏提取得到的提取物混合均勻,制得用于促進(jìn)毛發(fā)生長干細(xì)胞提取物組合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟s1中所述培養(yǎng)基中胎牛血清的含量為9-11wt%,地塞米松的含量為5-15nmol/l,青霉素的含量為100-120u/ml,鏈霉素的含量為100-120μg/ml,白細(xì)胞介素-2的含量為5-15μg/ml,磁性復(fù)合顆粒的含量為400-500μg/ml;所述磁性復(fù)合顆粒的制備方法如下:
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于,步驟t1中所述球磨的時間為0.5-1h,所述氧化鋯、氯化鐵和氯化亞鐵的質(zhì)量比為10:3.24:1.26,所述加熱攪拌反應(yīng)的溫度為80-90℃,時間為3-5h,所述煅燒的溫度為400-600℃,時間為1-2h;步驟t2中所述磁性氧化物、單寧酸和催化劑的質(zhì)量比為10:2-3:0.1-0.5,所述催化劑為ph=8.5-9.5的tris-hcl溶液,所述加熱攪拌反應(yīng)的溫度為40-50℃,時間為2-4h。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟t3中所述改性磁性氧化物、nhs、edc、轉(zhuǎn)化生長因子-β、谷胱甘肽的質(zhì)量比為12-15:2-3:1.5-2.5:3-4:2-3,所述攪拌活化的時間為20-40min,所述攪拌反應(yīng)的時間為10-12h。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟s2中所述消化液為含有1-2wt%胰蛋白酶、0.5-1wt%堿性蛋白酶的ph為7.5-7.7的pbs緩沖液;所述培養(yǎng)的條件為36-38℃,co2濃度為3-6v/v%,所述低頻磁場培養(yǎng)的時間為5-7d,所述低能量激光培養(yǎng)的時間為3-5d,所述低頻磁場的頻率為40-50hz,刺激時間為30-40min/d,所述低能量激光的能量密度為3-7j/cm2,波長為600-800nm,照射總時間為3-5min/d,每次照射時間為30-60s。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟s4中所述生姜、人參、何首烏的質(zhì)量比為7-10:1-2:5-7,所述加熱沸騰提取物的時間為2-4h。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟s5中所述干細(xì)胞溶液、外泌體、海藻酸鈉的質(zhì)量比為15-30:2-3:7-10。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟s6中所述包埋微球和提取物的質(zhì)量比為12-15:7-10。
10.一種如權(quán)利要求1-9任一項所述的制備方法制得的用于促進(jìn)毛發(fā)生長干細(xì)胞提取物組合物。。