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促進1,3-丙二醇合成的融合蛋白及其應用

文檔序號:41841202發(fā)布日期:2025-05-09 17:59閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種融合蛋白,其是催化微體中的錨定序列與nadph依賴型醇脫氫酶串聯(lián)的融合蛋白,或者與nadh依賴型醇脫氫酶串聯(lián)的融合蛋白。

2.如權利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述nadph依賴型醇脫氫酶yqhd來源于大腸桿菌;所述nadh依賴型醇脫氫酶dhat來源于肺炎克雷伯氏菌;所述錨定序列分別是pdup位點的錨定序列和pduq位點的錨定序列,更具體地其氨基酸序列如seq?id?no:1或seqid?no:2所示。

3.如權利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,錨定序列與nadph依賴型醇脫氫酶串聯(lián)的融合蛋白l-yqhd的氨基酸序列如seq?id?no:3所示;所述錨定序列與nadh依賴型醇脫氫酶串聯(lián)的融合蛋白l-dhat的氨基酸序列如seq?id?no:4所示。

4.如權利要求1至3任一項所述融合蛋白的編碼基因。

5.如權利要求4所述的編碼基因,其特征在于,其核苷酸序列如seq?id?no:5或seq?idno:6所示。

6.如權利要求4或5所述的編碼基因的重組表達載體,優(yōu)選地其是原核表達載體。

7.含有權利要求4或5所述編碼基因的重組宿主菌;優(yōu)選地,其是密歇根克雷伯氏菌;更優(yōu)選地,將所述編碼基因整合到密歇根克雷伯氏菌的基因組上;更優(yōu)選地,其整合到密歇根克雷伯氏菌的pdup基因位點或pduq位點上。

8.權利要求4或5所述編碼基因或其表達載體或其重組宿主菌在制備1,3-丙二醇中的應用。

9.一種制備1,3-丙二醇的方法,其包括如下步驟:發(fā)酵所述權利要求7所述的重組宿主菌以產(chǎn)生1,3-丙二醇,進一步包括收集產(chǎn)生的1,3-丙二醇的步驟。

10.如權利要求9所述的方法,其特征在于,所述重組宿主菌采用重組密歇根克雷伯氏菌,更具體的方法是將所述重組密歇根克雷伯氏菌接種于發(fā)酵培養(yǎng)基,于37℃培養(yǎng),攪拌轉速350?rpm,通氣量0.5vvm,ph控制為7.0,發(fā)酵培養(yǎng)20-30小時后再次接入甘油,與初始培養(yǎng)基中的甘油濃度合計100?g/l;發(fā)酵40h-80后結束發(fā)酵,獲取1,3-丙二醇。


技術總結
本發(fā)明屬于生物領域,具體涉及一種促進1,3?丙二醇合成的融合蛋白及其應用。本發(fā)明所述融合蛋白NADPH依賴型醇脫氫酶融合蛋白或NADH依賴型醇脫氫酶融合蛋白,其能夠包裝進二醇脫水酶并促進1,3?丙二醇合成。并經(jīng)實驗驗證其對菌株發(fā)酵性能有提升作用。

技術研發(fā)人員:張學禮,于勇,徐洪濤
受保護的技術使用者:中國科學院天津工業(yè)生物技術研究所
技術研發(fā)日:
技術公布日:2025/5/8
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