本發(fā)明提供一種兩親性共聚物中peg含量的檢測方法，涉及化合物檢測分析。

背景技術(shù)：

1、生物可降解材料，諸如聚乳酸(pla)、聚丙乙交酯(plga)及聚己內(nèi)酯(pcl)等，憑借其卓越的生物降解性能、出色的生物相容性和良好的力學(xué)性能，在生物醫(yī)用領(lǐng)域展現(xiàn)出廣泛的應(yīng)用潛力。聚乙二醇(peg)，作為一種親水性聚合物，因其優(yōu)良的生物相容性、在組織液中的溶解性以及通過腎濾膜排出體外的特性，而受到醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注，并已獲得美國食品藥品監(jiān)督管理局(fda)的認(rèn)證，被允許用于人體。將peg引入上述聚合物鏈段之中，能夠融合兩種聚合物的優(yōu)勢，并賦予材料優(yōu)異的生物相容性和水溶性，從而在生物醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是藥物傳遞系統(tǒng)、組織工程及基因遞送等方面，得到廣泛應(yīng)用。

2、然而，在peg共聚物的合成過程中，往往會殘留一定量的聚乙二醇，這種潛在的毒性在藥用制劑中尤為關(guān)鍵，因為聚乙二醇的含量與純度直接關(guān)系到藥品的安全性和有效性。因此，對聚乙二醇的分析檢測顯得尤為重要。當(dāng)前，2015年版《中國藥典》三部通則3202中雖提供了一種氯化鋇法以檢測蛋白質(zhì)中聚乙二醇的殘留量，但該方法所形成的復(fù)合物穩(wěn)定性欠佳，特征吸收峰不顯著，測試結(jié)果存在較大的偶然性，故該方法并不適用。針對兩親性嵌段共聚物中聚乙二醇含量的測定，目前尚缺乏有效的方法。盡管中國專利cn116297981a提出了一種共聚物的分離檢測方法，但其聚焦于共聚物含量的整體檢測分析，并未深入到共聚物中游離peg含量的具體測定。同樣，中國專利cn101042351a和中國專利cn110243775a分別提供了水中聚乙二醇含量及銅箔電解液中聚乙二醇的檢測方法，但這些方法的檢測原理在現(xiàn)有技術(shù)中已有所體現(xiàn)，并不適用于疏水性材料中游離聚乙二醇含量的檢測。此外，中國專利cn105067727b雖提供了一種聚合物單體中peg含量的測定方法，但其專屬性過強，難以廣泛應(yīng)用于包括本研究材料在內(nèi)的多數(shù)領(lǐng)域，缺乏普適性。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、為克服現(xiàn)有檢測方法的困難與填補材料檢測領(lǐng)域空白，本發(fā)明的目的在于提供一種簡便準(zhǔn)確的方法檢測peg兩親性嵌段共聚物中peg殘留量，具體方案如下：

2、一種兩親性共聚物中peg含量的檢測方法，包括以下步驟：

3、(2)取peg溶液，加入梯度濃度的d試劑和緩沖溶液，去離子水稀釋定容，搖勻、顯色；使用紫外可見光分光光度計做200-800nm光譜掃描，確定d試劑最佳用量；

4、(3)取peg溶液，加入最佳用量的d試劑和緩沖溶液，去離子水稀釋定容，搖勻、顯色；使用紫外可見光分光光度計做200-800nm光譜掃描，確定絡(luò)合物有最大吸收值的波長；

5、(4)配制peg標(biāo)準(zhǔn)品溶液，稀釋至梯度濃度后，分別加入最佳用量的d試劑和緩沖液，去離子水定容后搖勻、顯色，在步驟(3)確定的波長下檢測吸光度并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；

6、(5)取供試品溶液依次加入最佳用量的d試劑和緩沖液，去離子水定容后搖勻、顯色，在步驟(3)確定的波長下檢測吸光度，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中的peg含量；

7、其中，d試劑中包括次硝酸鉍、碘化鉀、冰醋酸和水。

8、優(yōu)選地，所述d試劑的配制方法為：分別配制次硝酸鉍溶液、碘化鉀溶液，按體積比1:2:4:13將次硝酸鉍溶液、碘化鉀溶液、冰醋酸與水混合。

9、優(yōu)選地，所述次硝酸鉍溶液濃度為0.01mol/l，碘化鉀溶液濃度為2.4mol/l。

10、優(yōu)選地，所述緩沖溶液為ph＝4.8的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液。

11、優(yōu)選地，所述緩沖溶液的配制方法為：稱取冰醋酸配成0.2mol/l乙酸溶液；稱取乙酸鈉配成0.2mol/l乙酸鈉溶液；量取50:32體積比的乙酸鈉溶液和乙酸溶液，可配置成ph＝4.8的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液。

12、優(yōu)選地，步驟(5)所述供試品溶液的制備方法包括：取待測樣品，精密稱量質(zhì)量，加入二氯甲烷后再加入去離子水，搖勻萃取后靜置，取水相作為供試品溶液；所述待測樣品為待測定peg含量的共聚物樣品。

13、優(yōu)選地，所述顯色，顯色時間為15min。

14、優(yōu)選地，所述標(biāo)準(zhǔn)品溶液稀釋的梯度濃度在0-50mg/l范圍內(nèi)。

15、優(yōu)選地，所述peg兩親性共聚物包括聚乙二醇-聚左旋乳酸(peg-plla)、聚乙二醇-聚己內(nèi)酯(peg-pcl)、聚乙二醇-聚丙乙交酯(peg-plga)、聚乙二醇單甲醚-聚左旋乳酸(mpeg-plla)、聚乙二醇單甲醚-聚己內(nèi)酯(mpeg-pcl)、聚乙二醇單甲醚-聚丙乙交酯(mpeg-plga)中的一種或二種以上。

16、優(yōu)選地，標(biāo)準(zhǔn)品包括聚乙二醇與聚乙二醇單甲醚，分子量范圍在1000至5000。

17、本發(fā)明本發(fā)明的有益效果：

18、本發(fā)明公開了一種紫外分光光度計測定兩親性共聚物中游離聚乙二醇含量的方法，利用標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值與濃度的數(shù)值做線性回歸，得出線性方程，帶入樣品溶液的吸光度值進行計算。本發(fā)明的分析方法成本低，重復(fù)性好，快捷高效，精密度好，對市場上的同類產(chǎn)品均可適用。

技術(shù)特征：

1.一種兩親性共聚物中peg含量的檢測方法，其特征在于：包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述兩親性共聚物中peg含量的檢測方法，其特征在于：所述d試劑的配制方法為：分別配制次硝酸鉍溶液、碘化鉀溶液，按體積比1:2:4:13將次硝酸鉍溶液、碘化鉀溶液、冰醋酸與水混合。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述兩親性共聚物中peg含量的檢測方法，其特征在于：所述次硝酸鉍溶液濃度為0.01mol/l，碘化鉀溶液濃度為2.4mol/l。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述兩親性共聚物中peg含量的檢測方法，其特征在于：所述緩沖溶液為ph＝4.8的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述兩親性共聚物中peg含量的檢測方法，其特征在于：所述緩沖溶液的配制方法為：稱取冰醋酸配成0.2mol/l乙酸溶液；稱取乙酸鈉配成0.2mol/l乙酸鈉溶液；量取50:32體積比的乙酸鈉溶液和乙酸溶液，可配置成ph＝4.8的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述兩親性共聚物中peg含量的檢測方法，其特征在于：步驟(4)所述供試品溶液的制備方法包括：取待測樣品，精密稱量質(zhì)量，加入二氯甲烷后再加入去離子水，搖勻萃取后靜置，取水相作為供試品溶液；所述待測樣品為待測定peg含量的共聚物樣品。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述兩親性共聚物中peg含量的檢測方法，其特征在于：所述顯色，顯色時間為15min；所述標(biāo)準(zhǔn)品溶液稀釋的梯度濃度在0-50mg/l范圍內(nèi)。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述兩親性共聚物中peg含量的檢測方法，其特征在于：所述peg兩親性共聚物包括聚乙二醇-聚左旋乳酸(peg-plla)、聚乙二醇-聚己內(nèi)酯(peg-pcl)、聚乙二醇-聚丙乙交酯(peg-plga)、聚乙二醇單甲醚-聚左旋乳酸(mpeg-plla)、聚乙二醇單甲醚-聚己內(nèi)酯(mpeg-pcl)、聚乙二醇單甲醚-聚丙乙交酯(mpeg-plga)中的一種或二種以上。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述兩親性共聚物中peg含量的檢測方法，其特征在于：標(biāo)準(zhǔn)品包括聚乙二醇與聚乙二醇單甲醚，分子量范圍在1000至5000。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種兩親性共聚物中PEG含量的檢測方法，涉及化合物檢測分析技術(shù)領(lǐng)域，方法包括以下步驟：取PEG溶液，加入梯度濃度的D試劑和緩沖溶液，去離子水稀釋定容，搖勻、顯色；使用紫外可見光分光光度計做200?800nm光譜掃描，確定D試劑最佳用量；采用最佳用量的D試劑確定絡(luò)合物有最大吸收值的波長；繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，檢測樣品吸光度值并計算樣品中PEG含量；其中，D試劑中包括次硝酸鉍、碘化鉀、冰醋酸和水。本發(fā)明利用標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值與濃度的數(shù)值做線性回歸，得出線性方程，帶入樣品溶液的吸光度值進行計算。本發(fā)明的分析方法成本低，重復(fù)性好，快捷高效，精密度好，對市場上的同類產(chǎn)品均可適用。

技術(shù)研發(fā)人員：譚小琴,王俊,石道昆,謝青,陳銳,楊義滸
受保護的技術(shù)使用者：深圳聚生生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/8