本發(fā)明涉及細(xì)胞培養(yǎng)，特別涉及一種nk細(xì)胞高效培養(yǎng)裝置及其培養(yǎng)方法技術(shù)。

背景技術(shù)：

1、nk細(xì)胞即自然殺傷細(xì)胞，作為機(jī)體重要的免疫細(xì)胞，歸屬于淋巴細(xì)胞一類，其主要源自骨髓造血干細(xì)胞，在骨髓中發(fā)育成熟后進(jìn)入外周血和淋巴組織，通過對(duì)nk細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，能夠在體外模擬體內(nèi)環(huán)境，深入探究nk細(xì)胞識(shí)別和殺傷靶細(xì)胞的方式，以及各類細(xì)胞因子和信號(hào)分子對(duì)nk細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用。

2、當(dāng)下nk細(xì)胞主要有三種培養(yǎng)方式，而不論采用哪種方式，都離不開培養(yǎng)箱的配合，培養(yǎng)箱能夠?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)增殖過程提供所需的溫度、二氧化碳以及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，確保培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的nk細(xì)胞得到良好的培養(yǎng)與增殖，在使用培養(yǎng)箱時(shí)，預(yù)先進(jìn)行箱內(nèi)預(yù)熱以及二氧化碳濃度的調(diào)整，可降低環(huán)境變化帶來的影響，然而現(xiàn)有的培養(yǎng)箱在放置培養(yǎng)瓶時(shí)，打開箱門仍會(huì)導(dǎo)致大量熱量和二氧化碳逸散，使得內(nèi)部環(huán)境變化較大，如此一來細(xì)胞依舊會(huì)因環(huán)境的突然改變而產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，受到細(xì)胞內(nèi)酶活性變化的影響，進(jìn)而干擾細(xì)胞正常的生理過程，給細(xì)胞的代謝和生長(zhǎng)帶來不良后果。

3、因此需要提供一種nk細(xì)胞高效培養(yǎng)裝置及其培養(yǎng)方法技術(shù)，旨在解決上述問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的主要目的在于提供一種nk細(xì)胞高效培養(yǎng)裝置及其培養(yǎng)方法技術(shù)，可以有效解決背景技術(shù)中的問題。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：

3、一種nk細(xì)胞高效培養(yǎng)裝置，包括培養(yǎng)箱體，所述培養(yǎng)箱體的相鄰的外側(cè)壁上分別固定安裝有預(yù)熱箱體和伺服電機(jī)，所述培養(yǎng)箱體的內(nèi)部設(shè)置有培養(yǎng)架組件，所述預(yù)熱箱體的內(nèi)部設(shè)置有密封組件；

4、所述培養(yǎng)架組件包括有驅(qū)動(dòng)軸、安裝座、連接座、連接機(jī)構(gòu)和放置平臺(tái)，所述驅(qū)動(dòng)軸轉(zhuǎn)動(dòng)連接于培養(yǎng)箱體的內(nèi)部，所述安裝座固定連接于驅(qū)動(dòng)軸位于培養(yǎng)箱體內(nèi)的一端外側(cè)，所述連接座、連接機(jī)構(gòu)和放置平臺(tái)的數(shù)量均設(shè)為多個(gè)，所述連接座和放置平臺(tái)之間通過連接機(jī)構(gòu)實(shí)現(xiàn)可拆卸安裝，所述驅(qū)動(dòng)軸與伺服電機(jī)輸出軸之間通過聯(lián)軸器固定連接，所述放置平臺(tái)的底部設(shè)置有配重塊；

5、所述密封組件包括有密封板、固定板、傳動(dòng)機(jī)構(gòu)、活動(dòng)塊、對(duì)接塊和對(duì)接機(jī)構(gòu)，所述密封板與預(yù)熱箱體之間鉸接，所述密封板與固定板之間固定連接，所述活動(dòng)塊與對(duì)接塊均滑動(dòng)連接于預(yù)熱箱體的內(nèi)部，所述固定板與活動(dòng)塊之間通過傳動(dòng)機(jī)構(gòu)實(shí)現(xiàn)同步移動(dòng)，所述對(duì)接塊原理活動(dòng)塊的一側(cè)對(duì)稱固定連接有推桿，所述對(duì)接機(jī)構(gòu)用于實(shí)現(xiàn)對(duì)放置平臺(tái)的拿取。

6、作為上述方案的進(jìn)一步改進(jìn)，所述培養(yǎng)箱體的外側(cè)壁上對(duì)稱固定連接有把手，所述培養(yǎng)箱體和預(yù)熱箱體的底部均勻安裝有萬向輪。

7、作為上述方案的進(jìn)一步改進(jìn)，所述連接機(jī)構(gòu)包括對(duì)稱設(shè)置的活動(dòng)座和安裝軸，所述安裝軸轉(zhuǎn)動(dòng)連接于連接座的內(nèi)部，所述活動(dòng)座均與安裝軸固定連接，所述放置平臺(tái)的外側(cè)壁對(duì)稱固定連接有安裝條，所述安裝條滑動(dòng)連接于活動(dòng)座的內(nèi)部。

8、作為上述方案的進(jìn)一步改進(jìn)，所述活動(dòng)座的內(nèi)部均滑動(dòng)連接有推塊，所述推塊與活動(dòng)座內(nèi)壁之間固定連接有彈簧一，所述活動(dòng)座的內(nèi)部均對(duì)稱滑動(dòng)連接有擋塊，所述活動(dòng)座的內(nèi)部均對(duì)稱固定連接有固定塊，所述擋塊滑動(dòng)連接由于固定塊的外側(cè)，所述擋塊內(nèi)壁與固定塊之間固定連接有彈簧二。

9、作為上述方案的進(jìn)一步改進(jìn)，所述傳動(dòng)機(jī)構(gòu)包括有對(duì)稱滑動(dòng)連接于預(yù)熱箱體內(nèi)的滑塊，所述滑塊與活動(dòng)塊之間轉(zhuǎn)動(dòng)連接有連接桿二，所述滑塊與固定板之間轉(zhuǎn)動(dòng)連接有連接桿一。

10、作為上述方案的進(jìn)一步改進(jìn)，所述對(duì)接機(jī)構(gòu)包括有對(duì)稱固定連接于對(duì)接塊外側(cè)壁上的限位桿一，所述活動(dòng)塊滑動(dòng)連接于兩個(gè)限位桿一的外側(cè)，所述活動(dòng)塊與對(duì)接塊之間對(duì)稱固定連接有彈簧三，所述彈簧三套接于限位桿一的外側(cè)。

11、作為上述方案的進(jìn)一步改進(jìn)，所述對(duì)接塊的內(nèi)部對(duì)稱滑動(dòng)連接有卡塊和限位桿二，所述限位桿二均與卡塊之間固定連接，所述卡塊與對(duì)接塊內(nèi)壁之間固定連接有彈簧四，所述活動(dòng)塊的內(nèi)部對(duì)稱開設(shè)有楔形槽，所述卡塊滑動(dòng)連接于楔形槽的內(nèi)部。

12、作為上述方案的進(jìn)一步改進(jìn)，所述放置平臺(tái)與對(duì)接塊的相對(duì)一端均固定連接有磁鐵，所述放置平臺(tái)的外側(cè)壁上對(duì)稱開設(shè)有與卡塊相適配的卡槽。

13、nk細(xì)胞培養(yǎng)方法技術(shù)，包括以下步驟：

14、步驟一：通過靜脈采血的方式從健康供體獲取外周血樣本，并準(zhǔn)備淋巴細(xì)胞分離液，將外周血樣本小心地鋪在淋巴細(xì)胞分離液上層；

15、步驟二：進(jìn)行離心操作，以特定的轉(zhuǎn)速和時(shí)間進(jìn)行離心，使得血液中的不同成分根據(jù)密度分層，pbmc位于血漿和分離液的界面層后，使用移液器小心地吸取pbmc層，轉(zhuǎn)移到新的無菌離心管中；

16、步驟三：將分離得到的pbmc接種到合適的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)；

17、步驟四：選擇無血清培養(yǎng)基或含有特定成分的培養(yǎng)基，以滿足nk細(xì)胞的生長(zhǎng)需求；

18、步驟五：將接種了pbmc的培養(yǎng)容器放置在℃、％co2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

19、步驟六：添加滋養(yǎng)細(xì)胞，促進(jìn)nk細(xì)胞的生長(zhǎng)和活化；

20、步驟七：定期通過顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)、密度和活性；

21、步驟八：當(dāng)nk細(xì)胞達(dá)到一定的數(shù)量或活性時(shí)，使用離心法分離和收集nk細(xì)胞。

22、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：

23、1、放置平臺(tái)通過連接機(jī)構(gòu)安裝在連接座內(nèi)，連接座在伺服電機(jī)間歇式帶動(dòng)下，可帶動(dòng)放置平臺(tái)在培養(yǎng)箱體內(nèi)進(jìn)行位置調(diào)整且保持水平狀態(tài)，放置細(xì)胞培養(yǎng)瓶時(shí)，轉(zhuǎn)動(dòng)預(yù)熱箱體上的密封板，其通過傳動(dòng)機(jī)構(gòu)帶動(dòng)活動(dòng)塊和對(duì)接塊向放置平臺(tái)移動(dòng)，實(shí)現(xiàn)對(duì)放置平臺(tái)的抓取，隨后將放置平臺(tái)從連接座移入預(yù)熱箱體，移動(dòng)過程中，放置平臺(tái)與培養(yǎng)箱體貼合，可減少培養(yǎng)箱體內(nèi)熱量及二氧化碳逸散，確保培養(yǎng)箱體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，降低對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)增殖的不良影響。

24、2、活動(dòng)塊移動(dòng)推動(dòng)對(duì)接塊向放置平臺(tái)靠近，通過推桿推動(dòng)推塊解除安裝條在活動(dòng)座內(nèi)的卡接，之后活動(dòng)塊繼續(xù)推動(dòng)對(duì)接塊，使卡塊進(jìn)入卡槽，借助磁鐵實(shí)現(xiàn)對(duì)接塊與放置平臺(tái)磁性連接，接著活動(dòng)塊帶動(dòng)對(duì)接塊反向移動(dòng)，且活動(dòng)塊先移動(dòng)，使卡塊在磁鐵內(nèi)卡接，從而更穩(wěn)定地將放置平臺(tái)從連接座內(nèi)拉出，從而確保了放置平臺(tái)的平穩(wěn)取出，避免其在取出過程中出現(xiàn)晃動(dòng)或不穩(wěn)定的情況，降低了對(duì)放置在平臺(tái)上細(xì)胞培養(yǎng)瓶的影響。

技術(shù)特征：

1.一種nk細(xì)胞高效培養(yǎng)裝置，包括培養(yǎng)箱體(1)，其特征在于：所述培養(yǎng)箱體(1)的相鄰的外側(cè)壁上分別固定安裝有預(yù)熱箱體(2)和伺服電機(jī)(5)，所述培養(yǎng)箱體(1)的內(nèi)部設(shè)置有培養(yǎng)架組件(6)，所述預(yù)熱箱體(2)的內(nèi)部設(shè)置有密封組件(7)；

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種nk細(xì)胞高效培養(yǎng)裝置，其特征在于：所述培養(yǎng)箱體(1)的外側(cè)壁上對(duì)稱固定連接有把手(4)，所述培養(yǎng)箱體(1)和預(yù)熱箱體(2)的底部均勻安裝有萬向輪(3)。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種nk細(xì)胞高效培養(yǎng)裝置，其特征在于：所述連接機(jī)構(gòu)(64)包括對(duì)稱設(shè)置的活動(dòng)座(641)和安裝軸(642)，所述安裝軸(642)轉(zhuǎn)動(dòng)連接于連接座(63)的內(nèi)部，所述活動(dòng)座(641)均與安裝軸(642)固定連接，所述放置平臺(tái)(65)的外側(cè)壁對(duì)稱固定連接有安裝條(643)，所述安裝條(643)滑動(dòng)連接于活動(dòng)座(641)的內(nèi)部。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種nk細(xì)胞高效培養(yǎng)裝置，其特征在于：所述活動(dòng)座(641)的內(nèi)部均滑動(dòng)連接有推塊(644)，所述推塊(644)與活動(dòng)座(641)內(nèi)壁之間固定連接有彈簧一(645)，所述活動(dòng)座(641)的內(nèi)部均對(duì)稱滑動(dòng)連接有擋塊(646)，所述活動(dòng)座(641)的內(nèi)部均對(duì)稱固定連接有固定塊(648)，所述擋塊(646)滑動(dòng)連接由于固定塊(648)的外側(cè)，所述擋塊(646)內(nèi)壁與固定塊(648)之間固定連接有彈簧二(647)。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種nk細(xì)胞高效培養(yǎng)裝置，其特征在于：所述傳動(dòng)機(jī)構(gòu)(73)包括有對(duì)稱滑動(dòng)連接于預(yù)熱箱體(2)內(nèi)的滑塊(731)，所述滑塊(731)與活動(dòng)塊(74)之間轉(zhuǎn)動(dòng)連接有連接桿二(733)，所述滑塊(731)與固定板(72)之間轉(zhuǎn)動(dòng)連接有連接桿一(732)。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種nk細(xì)胞高效培養(yǎng)裝置，其特征在于：所述對(duì)接機(jī)構(gòu)(77)包括有對(duì)稱固定連接于對(duì)接塊(75)外側(cè)壁上的限位桿一(771)，所述活動(dòng)塊(74)滑動(dòng)連接于兩個(gè)限位桿一(771)的外側(cè)，所述活動(dòng)塊(74)與對(duì)接塊(75)之間對(duì)稱固定連接有彈簧三(773)，所述彈簧三(773)套接于限位桿一(771)的外側(cè)。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種nk細(xì)胞高效培養(yǎng)裝置，其特征在于：所述對(duì)接塊(75)的內(nèi)部對(duì)稱滑動(dòng)連接有卡塊(772)和限位桿二(774)，所述限位桿二(774)均與卡塊(772)之間固定連接，所述卡塊(772)與對(duì)接塊(75)內(nèi)壁之間固定連接有彈簧四(775)，所述活動(dòng)塊(74)的內(nèi)部對(duì)稱開設(shè)有楔形槽(776)，所述卡塊(772)滑動(dòng)連接于楔形槽(776)的內(nèi)部。

8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種nk細(xì)胞高效培養(yǎng)裝置，其特征在于：所述放置平臺(tái)(65)與對(duì)接塊(75)的相對(duì)一端均固定連接有磁鐵(66)，所述放置平臺(tái)(65)的外側(cè)壁上對(duì)稱開設(shè)有與卡塊(772)相適配的卡槽(67)。

9.nk細(xì)胞培養(yǎng)方法技術(shù)，所述方法技術(shù)是基于權(quán)利要求1-8中的任一種nk細(xì)胞高效培養(yǎng)裝置，其特征在于，包括以下步驟：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了一種NK細(xì)胞高效培養(yǎng)裝置及其培養(yǎng)方法技術(shù)，包括培養(yǎng)箱體，培養(yǎng)箱體的相鄰的外側(cè)壁上分別固定安裝有預(yù)熱箱體和伺服電機(jī)，培養(yǎng)箱體的內(nèi)部設(shè)置有培養(yǎng)架組件，預(yù)熱箱體的內(nèi)部設(shè)置有密封組件；放置平臺(tái)通過連接機(jī)構(gòu)安裝在連接座內(nèi)，連接座在伺服電機(jī)間歇式帶動(dòng)下，可帶動(dòng)放置平臺(tái)在培養(yǎng)箱體內(nèi)進(jìn)行位置調(diào)整且保持水平狀態(tài)，轉(zhuǎn)動(dòng)預(yù)熱箱體上的密封板，其通過傳動(dòng)機(jī)構(gòu)帶動(dòng)活動(dòng)塊和對(duì)接塊向放置平臺(tái)移動(dòng)，實(shí)現(xiàn)對(duì)放置平臺(tái)的抓取，隨后將放置平臺(tái)從連接座移入預(yù)熱箱體。移動(dòng)過程中，放置平臺(tái)與培養(yǎng)箱體貼合，可減少培養(yǎng)箱體內(nèi)熱量及二氧化碳逸散，確保培養(yǎng)箱體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，降低對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)增殖的不良影響。

技術(shù)研發(fā)人員：李柏鈞,楊龍秀,紀(jì)安琪,陳如如
受保護(hù)的技術(shù)使用者：洛兮基因科技（杭州）有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/8