本發(fā)明屬于生物發(fā)酵,具體涉及用于生產(chǎn)酵母蛋白的培養(yǎng)基、酵母蛋白生產(chǎn)方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、隨著世界對食品和飼料蛋白質(zhì)需求的不斷增長,人們開始尋找非傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)來源,以補充現(xiàn)有的蛋白質(zhì)來源。從微生物生物質(zhì)中提取的單細胞蛋白(scp)可被用作人類食物和動物飼料中,是一種很有前景的解決方案。這種廉價的蛋白質(zhì),除了其高蛋白質(zhì)含量(干物質(zhì)粗蛋白含量在40%-80%)之外,還含有脂肪、碳水化合物、核酸、維生素和礦物質(zhì)。此外,scp富含某些必需氨基酸,如賴氨酸和甲硫氨酸,而這兩種氨基酸在大多數(shù)植物和動物中獲取有限。scp可作為添加劑添加到主飼料中,能提供豐富蛋白質(zhì)營養(yǎng),促進動物的生長和發(fā)育,在一定程度上能降低飼料成本。
2、我國是食糖生產(chǎn)大國,甜菜制糖產(chǎn)業(yè)豐富。甜菜漿是甜菜制糖過程中的產(chǎn)生的主要副產(chǎn)品,其內(nèi)含碳水化合物含量高,價格低廉。同時,甜菜漿含有豐富的纖維素、半纖維素和果膠,是潛在有用的農(nóng)業(yè)資源。目前甜菜漿常被用作反芻動物飼料,為動物提供能量和纖維,但由于蛋白含量的缺乏,無法作為蛋白飼料提供更高值的營養(yǎng)補充。其內(nèi)部復(fù)雜且致密的木質(zhì)纖維素結(jié)構(gòu),難以作為碳源被菌株直接利用。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的是克服蛋白飼料成本問題,提高飼料營養(yǎng)價值。
2、為此,本發(fā)明提供了一種用于生產(chǎn)酵母蛋白的培養(yǎng)基,包括:甜菜漿酶解液20-30g/l,(nh4)2so45-10g/l,cacl2·2h2o?0.01-0.1g/l,mgso4·7h2o1-2g/l,kh2po43-5g/l,kcl?0.2-0.5g/l,feso40.01-0.1g/l,mnso40.01-0.1g/l,znso40.001-0.01g/l,cuso40.001-0.01g/l。
3、具體的,上述甜菜漿酶解液采用以下步驟制備:向甜菜漿中加水混勻,向得到的甜菜漿水中加入復(fù)合酶制劑進行酶解,酶解后過濾,所得濾液為甜菜漿酶解液;所述復(fù)合酶制劑包括纖維素酶、木聚糖酶和果膠酶。
4、具體的,甜菜漿水與復(fù)合酶制劑的體積質(zhì)量比為100ml:(0.3-0.5)g。
5、具體的,上述復(fù)合酶制劑中纖維素酶、木聚糖酶和果膠酶的質(zhì)量比為(4-6):(10-15):1;纖維素酶的酶活為5000-30000u/g,木聚糖酶的酶活為5000-20000u/g,果膠酶的酶活為15000-50000u/g。
6、具體的,上述酶解ph為4.5-5,酶解溫度為40-50℃,酶解時間為36-48h。
7、本發(fā)明還提供了一種酵母蛋白生產(chǎn)方法,包括以下步驟:
8、s1、配置發(fā)酵培養(yǎng)基,包括甜菜漿酶解液20-30g/l,(nh4)2so45-10g/l,cacl2·2h2o0.01-0.1g/l,mgso4·7h2o?1-2g/l,kh2po43-5g/l,kcl?0.2-0.5g/l,feso40.01-0.1g/l,mnso40.01-0.1g/l,znso40.001-0.01g/l,cuso40.001-0.01g/l;
9、s2、將培養(yǎng)基置于發(fā)酵罐中,接種產(chǎn)朊假絲酵母進行發(fā)酵,當(dāng)溶氧開始上升時流加補料培養(yǎng)基,控制補料至發(fā)酵結(jié)束,得到酵母蛋白。
10、具體的,上述步驟s2中發(fā)酵溫度為28-30℃,轉(zhuǎn)速200-600rpm/min,調(diào)節(jié)ph?5.0-5.5,罐壓0.02-0.05mpa。
11、具體的,上述補料培養(yǎng)基包括200-300g/l甜菜漿酶解液,kh2po45-10g/l,mgso4·7h2o?1-2g/l。
12、具體的,上述步驟s2中控制補料具體為:補料0-5h期間內(nèi),控制溶氧在20-70%,補料5h后,控制溶氧在5-15%。
13、本發(fā)明提供的培養(yǎng)基或酵母蛋白生產(chǎn)方法可用于飼料生產(chǎn)。
14、與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有以下優(yōu)點和有益效果:
15、本發(fā)明提供的這種用于生產(chǎn)酵母蛋白的培養(yǎng)基使用無機氮源無機鹽培養(yǎng),無需添加酵母粉、蛋白胨等高值產(chǎn)品,發(fā)酵成本低。使用的甜菜漿酶解液通過優(yōu)化酶解配方,直接對原料進行酶解處理,酶活高,酶用量少,酶解時間短,酶解后甜菜漿酶解液還原糖濃度大于20g/l,纖維素酶解率為79.96%,將甜菜漿中不易發(fā)酵和利用的木質(zhì)纖維素轉(zhuǎn)化為易被微生物利用的單糖,提高了甜菜漿的利用價值。
16、本發(fā)明提供的酵母蛋白生產(chǎn)方法利用甜菜漿進行產(chǎn)朊假絲酵母高密度發(fā)酵,獲得干物質(zhì)酵母蛋白含量超過52.3%的酵母scp,該蛋白可添加入主飼料提供蛋白質(zhì),并提供必需氨基酸如賴氨酸和甲硫氨酸,實現(xiàn)了制糖產(chǎn)業(yè)副產(chǎn)物的深度利用,減少了scp蛋白的生產(chǎn)成本,通過這種方式,可以獲得更有價值的飼料,有助于實現(xiàn)可持續(xù)消費和生產(chǎn)的目標(biāo),尤其是在可持續(xù)發(fā)展和自然資源高效利用方面。本發(fā)明所使用產(chǎn)朊假絲酵母在木糖培養(yǎng)基經(jīng)長期馴化而來,利用木糖能力強,蛋白含量高達50%以上。
1.一種用于生產(chǎn)酵母蛋白的培養(yǎng)基,其特征在于,包括:甜菜漿酶解液20-30g/l,(nh4)2so45-10g/l,cacl2·2h2o?0.01-0.1g/l,mgso4·7h2o1-2g/l,kh2po43-5g/l,kcl?0.2-0.5g/l,feso40.01-0.1g/l,mnso40.01-0.1g/l,znso40.001-0.01g/l,cuso40.001-0.01g/l。
2.如權(quán)利要求1所述用于生產(chǎn)酵母蛋白的培養(yǎng)基,其特征在于,所述甜菜漿酶解液采用以下步驟制備:向甜菜漿中加水混勻,向得到的甜菜漿水中加入復(fù)合酶制劑進行酶解,酶解后過濾,所得濾液為甜菜漿酶解液;所述復(fù)合酶制劑包括纖維素酶、木聚糖酶和果膠酶。
3.如權(quán)利要求2所述用于生產(chǎn)酵母蛋白的培養(yǎng)基,其特征在于:甜菜漿水與復(fù)合酶制劑的體積質(zhì)量比為100ml:(0.3-0.5)g。
4.如權(quán)利要求2所述用于生產(chǎn)酵母蛋白的培養(yǎng)基,其特征在于:所述復(fù)合酶制劑中纖維素酶、木聚糖酶和果膠酶的質(zhì)量比為(4-6):(10-15):1;纖維素酶的酶活為5000-30000u/g,木聚糖酶的酶活為5000-20000u/g,果膠酶的酶活為15000-50000u/g。
5.如權(quán)利要求2所述用于生產(chǎn)酵母蛋白的培養(yǎng)基,其特征在于:酶解ph為4.5-5,酶解溫度為40-50℃,酶解時間為36-48h。
6.一種酵母蛋白生產(chǎn)方法,其特征在于,包括以下步驟:
7.如權(quán)利要求6所述酵母蛋白生產(chǎn)方法,其特征在于:所述步驟s2中發(fā)酵溫度為28-30℃,轉(zhuǎn)速200-600rpm/min,調(diào)節(jié)ph?5.0-5.5,罐壓0.02-0.05mpa。
8.如權(quán)利要求6所述酵母蛋白生產(chǎn)方法,其特征在于:所述補料培養(yǎng)基包括200-300g/l甜菜漿酶解液,kh2po45-10g/l,mgso4·7h2o?1-2g/l。
9.如權(quán)利要求6所述酵母蛋白生產(chǎn)方法,其特征在于,所述步驟s2中控制補料具體為:補料0-5h期間內(nèi),控制溶氧在20-70%,補料5h后,控制溶氧在5-15%。
10.如權(quán)利要求1-5任意一項所述用于生產(chǎn)酵母蛋白的培養(yǎng)基或如權(quán)利要求6-9任意一項所述酵母蛋白生產(chǎn)方法在飼料生產(chǎn)中的應(yīng)用。