一種以太行菊為主要原料的防霉抗氧化食品保鮮劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于食品領(lǐng)域，涉及食品保鮮劑，具體涉及一種以太行菊為主要原料的防 霉抗氧化食品保鮮劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 食品保鮮劑是指用于防止食品在儲(chǔ)存、流通過(guò)程中，由于微生物繁殖引起的變質(zhì)， 或由于儲(chǔ)存銷(xiāo)售條件不善，食品內(nèi)在品質(zhì)發(fā)生劣變、色澤下降，為提高保存期，延長(zhǎng)食用價(jià) 值而在食品中使用的添加劑。
[0003] 太行菊，又稱(chēng)野菊花，為菊科太行菊屬下的一個(gè)種，多年生草本植物。生于山坡巖 石上，為中國(guó)特有。太行菊為國(guó)家第二批珍稀瀕危保護(hù)植物，與太行花、獨(dú)根草并稱(chēng)為三大 絕壁奇花。太行菊產(chǎn)在南太行的山西陵川、晉城、河南濟(jì)源、新鄉(xiāng)、輝縣、林州市茶店鎮(zhèn)等太 行山區(qū)。據(jù)科學(xué)研究，太行菊清肝明目比菊花效果要好。太行菊富含黃酮等抗氧化成分。
[0004] 重葉蓮為毛茛科植物太白美花草的全草。夏季采收，陰干。原植物為多年生草本， 全體無(wú)毛。根莖暗褐色，有多數(shù)須根。羽狀復(fù)葉;基生葉3~5枚，具長(zhǎng)柄，基部擴(kuò)大成鞘狀，小 葉片羽狀深裂，輪廓近圓形，常呈覆瓦狀重迭;莖生葉具鞘狀短柄?；▎我?，頂生；萼片5,帶 藍(lán)紫色；花瓣7~13，白色，近倒卵形，基部有短爪，橘紅色;雄蕊多數(shù)；心皮多數(shù)，有胚珠一 顆。瘦果多數(shù)，聚合成球果狀。生于高山山坡草叢。分布陜西等地。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種以太行菊為主要原料的防霉抗氧化食品保鮮劑，該防 霉抗氧化食品保鮮劑主要原料為天然植物太行菊和重葉蓮，該提取物具有非常強(qiáng)的自由基 清除作用和防霉變作用。
[0006] 上述目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
[0007] -種防止食品氧化和霉變的太行菊提取物，由以下步驟制備：（a)將干燥的太行菊 和重葉蓮混合，粉碎，用60~70 %乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液； (b)對(duì)步驟(a)濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用大孔樹(shù)脂富集，先用5~15%乙 醇沖洗10~14個(gè)柱體積除去大極性物質(zhì)，再用65~75%乙醇洗脫11~15個(gè)柱體積，收集65 ~75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥；其中，重葉蓮占太行菊與重葉蓮總重的5 %~ 15%〇
[0008] 進(jìn)一步地，太行菊提取物制備方法中步驟(a)中所述熱回流提取采用的乙醇濃度 為 65%。
[0009] 進(jìn)一步地，所述的太行菊提取物制備方法中，步驟(C)中所述大孔樹(shù)脂為AB-8型大 孔樹(shù)脂。
[0010] 進(jìn)一步地，所述的太行菊提取物制備方法中，步驟(C)中先用10%乙醇沖洗12個(gè)柱 體積除去大極性物質(zhì)。
[0011] 進(jìn)一步地，所述的太行菊提取物制備方法中，步驟(c)中除去大極性物質(zhì)后，再用 70 %乙醇洗脫13個(gè)柱體積，收集70 %乙醇洗脫液。
[0012] -種防霉抗氧化食品保鮮劑，含有權(quán)利要求1~5任一所述的太行菊提取物。
[0013] 本發(fā)明的有益效果：
[0014] 本發(fā)明提供的防霉抗氧化食品保鮮劑主要原料為天然植物太行菊和重葉蓮，該提 取物具有非常強(qiáng)的自由基清除作用和防霉變作用，對(duì)食品的防霉抗氧化效果非常好。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性?xún)?nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0016] 藥材來(lái)源:藥材太行菊和重葉蓮購(gòu)自安徽亳州中藥材市場(chǎng)。
[0017]主要試劑:食品級(jí)乙醇購(gòu)自上海凌峰化學(xué)試劑有限公司；AB-8型大孔樹(shù)脂購(gòu)自天 津波鴻樹(shù)脂有限公司；乙腈為HPLC級(jí)，購(gòu)于TEDIA;甲酸為HPLC級(jí)，購(gòu)于TEDIA;色譜用純凈水 為哇哈哈純凈水。所用試劑和材料均為可以購(gòu)買(mǎi)到的常規(guī)商品。
[0018]實(shí)施例1:提取物1的制備
[0019] (a)將5kg干燥的太行菊和重葉蓮（占總重10%)混合，粉碎，用65%乙醇熱回流提 取3次(25LX3次），每次2小時(shí)，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液(3L);(b)對(duì)步驟(a) 濃縮液依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次)和水飽和的正丁醇(3L X 3次)萃取，分 別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔樹(shù) 脂富集，先用10%乙醇沖洗12個(gè)柱體積除去大極性物質(zhì)，再用70 %乙醇洗脫13個(gè)柱體積，收 集70 %乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。
[0020]實(shí)施例2:提取物2的制備
[0021] (a)將5kg干燥的太行菊和重葉蓮（占總重5% )混合，粉碎，用60 %乙醇熱回流提取 3次(25LX3次），每次2小時(shí)，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液(3L);(b)對(duì)步驟(a)濃 縮液依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯(3LX3次)和水飽和的正丁醇(3LX3次)萃取，分別 得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔樹(shù)脂 富集，先用5 %乙醇沖洗14個(gè)柱體積除去大極性物質(zhì)，再用65 %乙醇洗脫15個(gè)柱體積，收集 65 %乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。
[0022]實(shí)施例3:提取物3的制備
[0023] (a)將5kg干燥的太行菊和重葉蓮（占總重15 % )混合，粉碎，用70 %乙醇熱回流提 取3次(25LX3次），每次2小時(shí)，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液(3L);(b)對(duì)步驟(a) 濃縮液依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次)和水飽和的正丁醇(3L X 3次)萃取，分 別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔樹(shù) 脂富集，先用15%乙醇沖洗10個(gè)柱體積除去大極性物質(zhì)，再用75 %乙醇洗脫11個(gè)柱體積，收 集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。
[0024]實(shí)施例4:實(shí)施例1的對(duì)比，不含重葉蓮
[0025] (a)將5kg干燥的太行菊粉碎，用65%乙醇熱回流提取3次(25L X 3次），每次2小時(shí)， 合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液（3L);(b)對(duì)步驟(a)濃縮液依次用石油醚（3LX 3 次）、乙酸乙酯（3LX 3次)和水飽和的正丁醇（3LX 3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸 乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔樹(shù)脂富集，先用10%乙醇沖洗 12個(gè)柱體積除去大極性物質(zhì)，再用70 %乙醇洗脫13個(gè)柱體積，收集70 %乙醇洗脫液，減壓濃 縮，噴霧干燥，得提取物4。
[0026]實(shí)施例5:實(shí)施例1的對(duì)比，重葉蓮占總重
[0027] (a)將5kg干燥的太行菊和重葉蓮（占總重20 % )混合，粉碎，用65 %乙醇熱回流提 取3次(25LX3次），每次2小時(shí)，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液(3L);(b)對(duì)步驟(a) 濃縮液依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次)和水飽和的正丁醇(3L X 3次)萃取，分 別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔樹(shù) 脂富集，先用10%乙醇沖洗12個(gè)柱體積除去大極性物質(zhì)，再用70 %乙醇洗脫13個(gè)柱體積，收 集70 %乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥，得提取物5。
[0028]實(shí)施例6:自由基清除作用試驗(yàn)
[0029] 按照實(shí)施例1~5制備得到提取物1~5。分別用純凈水溶解，配制成每毫升含Img提 取物的供試品溶液1~5。
[0030] 參考Fenton反應(yīng)體系模型，利用H2O2與Fe 2+混合產(chǎn)生· OH，但由于· OH具有很高的 反應(yīng)活性，存活時(shí)間短，若在體系中加入水楊酸，就能有效地捕捉· 0H，并產(chǎn)生有色產(chǎn)物。該 產(chǎn)物在波長(zhǎng)510nm處有強(qiáng)吸收，若在反應(yīng)體系中加入具有清除· OH功能的被測(cè)物，便會(huì)與水 楊酸競(jìng)爭(zhēng)· 0H，而使有色產(chǎn)物生成量減少。采用固定反應(yīng)時(shí)間法，在相同體積的反應(yīng)體系 (8·8mmol · L-1IfeCfeCLSmLdmmol · L-1FG2+CLSmLdmmol · L-1 水楊酸-乙醇溶液0.4mL)中分別 加入供試品溶液1~5各0.1 mL，并以蒸餾水為參比，與試劑空白液比較，在510nm處測(cè)量各濃 度下的吸光度Ax，便能測(cè)定被測(cè)物對(duì)· OH的清除作用，計(jì)算公式為：
[0031 ]消除率（％ ) = (Aq-Ax)/Aq X 100%。
[0032]其中Ao為空白對(duì)照液的吸光度，Ax為加入供試品溶液后的吸光度。
[0033]試驗(yàn)結(jié)果表明，供試品溶液1~3均具有非常高的自由基清除作用，清除率約為 85% ;供試品溶液4和5對(duì)自由基清除率僅為22%，顯著低于供試品溶液1~3。
[0034]實(shí)施例7:防霉作用試驗(yàn)
[0035]按照實(shí)施例1~5制備得到提取物1~5。分別用純凈水溶解，配制成每毫升含Img提 取物的供試品溶液1~5。
[0036] 量取IOmL新鮮牛奶置于經(jīng)過(guò)滅菌處理的塑料杯中，分別添加供試品溶液1~5各 ImL(液面直徑5. Ocm)，于35 °C培養(yǎng)箱中自然生菌，以添加 ImL質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)0.01 %山梨酸鉀 溶液的新鮮牛奶作為陽(yáng)性對(duì)照，以不添加任何物質(zhì)的新鮮牛奶作為空白對(duì)照。培養(yǎng)72h后， 按照文獻(xiàn)方法(杜敏華等，超聲波提取油菜花黃色素及其防腐作用研究，中國(guó)油料作物學(xué) 報(bào)，2007年02期)觀察牛奶表面的霉變程度，根據(jù)菌斑數(shù)量和級(jí)別計(jì)算病情指數(shù)，并統(tǒng)計(jì)霉 菌孢子數(shù)。按直徑(D)可將霉斑大小分為5個(gè)級(jí)別：I級(jí)，D < Imm; Π 級(jí)，lmm〈D < 2mm; ΙΠ 級(jí)，2_ 〈0仝3111111;1￥級(jí)，3111111〈0<6111111;/^級(jí)，0>61111]1。病情指數(shù)(1〇的計(jì)算公式為 ：
[0037] K= Σ (各級(jí)霉斑數(shù)X各級(jí)級(jí)別)/M
[0038] 其中，M =觀察樣面面積/各級(jí)霉斑面積X最高級(jí)別=(π X625)/(31 X9) X 5 = 347。
[0039]向培養(yǎng)72h的牛奶樣品中加入玻璃球，振蕩攪拌均勻后，取1滴牛奶于載玻片上制 片，每個(gè)樣品制片3張，在SZXlO顯微鏡（日本Olympus公司生產(chǎn)）下觀察，每個(gè)載玻片隨機(jī)選 取3個(gè)視野，統(tǒng)計(jì)霉菌孢子數(shù)，計(jì)算平均值。結(jié)果見(jiàn)表1。
[0040]表1提取物1~5防霉變能力分析結(jié)果(X±SD，n = 9)

[0042] 結(jié)果表明：供試品溶液1~3能使牛奶中各級(jí)霉斑數(shù)總體上均減少，霉斑總數(shù)也減 少，病情指數(shù)也隨之減小，牛奶中的霉菌孢子數(shù)也減少。供試品溶液1~3的防霉效果接近于 陽(yáng)性對(duì)照山梨酸鉀。供試品溶液4和5防霉效果較差，明顯不如供試品溶液1~3。
[0043] 上述實(shí)施例的作用在于說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性?xún)?nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護(hù) 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種防止食品氧化和霉變的太行菊提取物，其特征在于由以下步驟制備：（a)將干燥 的太行菊和重葉蓮混合，粉碎，用60~70%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得 到濃縮液；（b)對(duì)步驟(a)濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到 石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用大孔樹(shù)脂富集，先用5 ~15%乙醇沖洗10~14個(gè)柱體積除去大極性物質(zhì)，再用65~75 %乙醇洗脫11~15個(gè)柱體 積，收集65~75%乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥;其中，重葉蓮占太行菊與重葉蓮總重的 5% ~15%〇2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的太行菊提取物，其特征在于：步驟(a)中所述熱回流提取采用 的乙醇濃度為65 %。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的太行菊提取物，其特征在于:步驟(c)中所述大孔樹(shù)脂為AB-8 型大孔樹(shù)脂。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的太行菊提取物，其特征在于:步驟(c)中先用10%乙醇沖洗12 個(gè)柱體積除去大極性物質(zhì)。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的太行菊提取物，其特征在于:步驟(c)中除去大極性物質(zhì)后，再 用70 %乙醇洗脫13個(gè)柱體積，收集70 %乙醇洗脫液。6. -種防霉抗氧化食品保鮮劑，其特征在于:含有權(quán)利要求1~5任一所述的太行菊提 取物。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種以太行菊為主要原料的防霉抗氧化食品保鮮劑，含有太行菊提取物。太行菊提取物由以下步驟制備：(a)將干燥的太行菊和重葉蓮混合，粉碎，用60～70％乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液；(b)對(duì)步驟(a)濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(c)正丁醇萃取物用大孔樹(shù)脂富集，先用5～15％乙醇沖洗10～14個(gè)柱體積除去大極性物質(zhì)，再用65～75％乙醇洗脫11～15個(gè)柱體積，收集65～75％乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥；其中，重葉蓮占太行菊與重葉蓮總重的5％～15％。
【IPC分類(lèi)】A23L3/3472
【公開(kāi)號(hào)】CN105707645
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610124280
【發(fā)明人】吳正鋒
【申請(qǐng)人】吳正鋒