技術(shù)特征：

1.一種家犬誘導(dǎo)多能干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的方法，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：s2步驟中所述的神經(jīng)元誘導(dǎo)分化液為2％50×b27、1％100×n2、10-25ng/mlbdnf、10-25ng/mlgdnf、dmem/f12培養(yǎng)基；所述的少突膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化液為2％50×b27、1％100×n2、10-25ng/mlpdnf、dmem/f12培養(yǎng)基；所述的星形膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化液為1％100×n2、1-2％fbs、10-25ng/mlegf、10-25ng/mlfgf、10-25ng/mlcntf、dmem/f12培養(yǎng)基。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：s2步驟中所述的神經(jīng)元誘導(dǎo)分化液成分為2％50×b27、1％100×n2、20ng/mlbdnf、20ng/mlgdnf；少突膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化液成分為2％50×b27、1％100×n2、20ng/mlpdnf、dmem/f12培養(yǎng)基；星形膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化液成分為1％100×n2、2％fbs、20ng/mlegf、20ng/mlfgf、20ng/mlcntf、dmem/f12培養(yǎng)基。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：s1步驟中所述的神經(jīng)前體細(xì)胞誘導(dǎo)液1為2％50×b27、0.5μmy27632、dmem/f12培養(yǎng)基；神經(jīng)前體細(xì)胞誘導(dǎo)液2為2％50×b27、20ng/mlegf、20ng/mlfgf、2μg/mlheparin、dmem/f12培養(yǎng)基。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：s1步驟所述的mtesr多能干細(xì)胞完全培養(yǎng)液的成分為39.84mlmtesrtm1基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10ml5×supplement+10ng/mlfgf+10ng/mlhlif+0.3μmpifithrin-μ+0.5μma83-01+0.5μmy27632+0.5μmpd0325901+3μmchir99021+250μmsodiumbutyrate。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的laminin的工作濃度為10-20ng/ml；多聚鳥氨酸的工作濃度為20ng/ml。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供一種家犬誘導(dǎo)多能干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)化的方法，誘導(dǎo)的神經(jīng)前體細(xì)胞具備向神經(jīng)元、少突膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞分化的能力，屬于細(xì)胞工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明首次成功將家犬誘導(dǎo)多能干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元、少突膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞等多種神經(jīng)細(xì)胞，解決了現(xiàn)有技術(shù)中需要從動(dòng)物活體中獲取神經(jīng)細(xì)胞的方式，避免了倫理問題的產(chǎn)生，也能減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用，一定程度上減少了實(shí)驗(yàn)成本。本發(fā)明方法培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞有望應(yīng)用到神經(jīng)退行性疾病的研究中，為治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病提供新的理想神經(jīng)細(xì)胞。

技術(shù)研發(fā)人員：張樹潤(rùn),李錦秀,張亞平,黃雪禎
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中國(guó)科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/8